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姜苏蓉

作品数:22 被引量:60H指数:6
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22 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
人胰岛素样生长因子1前体基因的重组、表达及纯化被引量:2
2006年
目的构建含有人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)前体编码基因的重组载体,在E.coliBL21中表达,并探讨其抗原性和应用价值。方法用PCR法,从现有重组质粒pBakPAK8/hIGF-1中,扩增编码hIGF-1前体的基因片段,经双酶切、纯化、连接后得到pET29a(+)/hIGF-1重组体,再将其转化大肠杆菌BL21-CodonPlus并诱导表达。表达产物经镍柱亲和层析纯化后,用Western blot法检测重组蛋白的抗原活性。结果重组持粒pET29a(+)/hIGF-1经双酶切鉴定和测序分析证实构建成功。在大肠杆菌BL21-CodonPlus中经IPTG诱导表达,有一相对分子质量15000的重组蛋白hIGF-1前体,该蛋白经镍柱亲和层析获得了良好的纯化效果,具有特异的抗原活性。结论成功地克隆并表达相对分子质量为15000的hIGF-1前体编码基因,为进一步制备抗hIGF-1抗体和后续hIGF-1生物学功能研究打下了良好基础。
姜苏蓉刘莉陈晨程蕴琳
关键词:基因抗原性人胰岛素样生长因子1亲和层析纯化前体基因相对分子质量WESTERN
HSPB1对H_2O_2诱导大鼠心肌细胞损伤中线粒体膜电位的影响被引量:4
2005年
目的:观察热休克蛋白B1(heatshockproteinB1,HSPB1)对H2O2诱导的大鼠心肌细胞损伤过程中线粒体膜电位(DY)的影响,从线粒体水平阐明HSPB1保护心肌细胞抗氧化损伤机制。方法:以本室建立的稳定转染人HSPB1的大鼠心肌细胞系H9c2(HSPB1H9c2)和空载体转染的H9c2(CON)为实验对象,300μmol/LH2O2刺激2、4和8h后,倒置光学显微镜观察细胞形态学变化,荧光探针JC鄄1测定线粒体膜电位。结果:HSPB1高表达显著抑制了H2O2诱导的典型凋亡形态学改变;HSPB1高表达使线粒体膜电位升高42%以上(P<0.001);HSPB1高表达显著抑制线粒体膜电位下降,H2O2刺激2、4、8h后,HSPB1H9c2和CON的线粒体膜电位分别降至刺激前的69.5%和66.5%(P<0.05),74.4%和67.0%(P<0.05),70.7%和58.1%(P<0.05)。结论:HSPB1有效抑制了氧化应激诱导的以凋亡为主的细胞损伤和线粒体膜电位丧失,提示线粒体膜电位的稳定可能参与了HSPB1抗心肌细胞的氧化损伤机制。
姜苏蓉刘莉张小进程蕴琳
关键词:心肌细胞线粒体膜电位细胞凋亡
心肌特异性高表达热休克蛋白27转基因鼠建立被引量:9
2006年
目的:建立人热休克蛋白27(heat shock protein27,Hsp27)基因在小鼠心肌特异性表达的转基因鼠模型。方法:将人心肌Hsp27cDNA插入含有心肌特异性表达启动子αMHC的pBSⅡ-SK+载体中,限制性内切酶EcoRI酶切、纯化后,获得含有αMHC启动子-Hsp27cDNA-HGHpolyA的线性DNA片段,以显微注射法将目的基因导入受精卵,PCR筛选基因型,Western blot鉴定转移基因的表达和表达的组织特异性。结果和结论:共获得两个转基因系小鼠,均呈心肌组织特异性高表达。
刘莉张小进姜苏蓉程蕴琳
关键词:转基因热休克蛋白27
热休克蛋白B1对大鼠心肌细胞氧化应激性损伤的作用被引量:12
2006年
目的探讨线粒体在热休克蛋白 B1(HSPB1)抗氧化应激诱导的大鼠心肌细胞株 H9c2损伤中的作用。方法以培养的稳定高表达 HSPB1 H9c2(HSPB1细胞)和空载体转染的 H9c2(对照细胞)为模型,0~1000/μmol/L H_2O_2刺激2h,观察细胞形态学、线粒体内膜跨膜电位、内源性活性氧自由基(ROS)水平。结果 (1)HSPB1高表达显著减轻 H_2O_2诱导的细胞形态学的损伤变化;(2)HSPB1高表达显著减轻 H_2O_2诱导的线粒体跨膜电位丧失:0、75、150、300、500、1000μmol/LH_2O_2刺激后,HSPB1和对照细胞的跨膜电位分别为10.0±0.11和7.01±0.26,9.11±0.17和6.05±0.19,7.69±0.28和5.14±0.28,6.95±0.13和4.66±0.11,6.61±0.20和1.85±0.35,6.60±0.05和1.19±0.01,各组差异均有统计学意义(P<0.01);(3)HSPB1和对照细胞在0、75、150、300、500、1000μmol/L H_2O_2诱导后,内源性 ROS 水平分别为5527±248和5964±387、6719±336和8528±411、6469+160和7795±136、7042±12和7591±203、6148±208和6911±136、5468±546和6822±371,除0 μmol/L 外,其他各组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HSPB1高表达显著保护了大鼠心肌细胞因氧化应激诱导的形态学变化,这可能与稳定线粒体膜电位和抑制线粒体产生的 ROS 有关。
刘莉姜苏蓉张小进陈晨丁国宪黄峻程蕴琳
关键词:热休克蛋白质类线粒体氧化性应激心肌
Hsp27和HspA12B对心肌损伤的保护作用及机制研究
丁正年刘莉吴军张小进姜苏蓉程蕴琳丁国宪马蓉钱进闵笑颜庞斯斯
1.研究范畴:本研究属于“麻醉与复苏”领域的“重要脏器损伤与保护”范畴。2.主要背景:心肌损伤是临床麻醉面临的一种常见病理生理过程。体外循环下的心脏手术、冠心病患者心脏手术的围手术期等,都有发生心肌损伤的可能;感染、历经...
关键词:
关键词:心脏手术心肌保护抗氧化应激
线粒体在HSPB1抗氧化应激性大鼠心肌细胞损伤中的作用
目的氧化应激参与心肌老化和心力衰竭等的发生发展。胞内95%以上活性氧自由基(reactive oxygen spesies,ROS)来源于线粒体,可损伤胞浆和线粒体生物大分子。线粒体内膜跨膜电位(△φ)降低不仅提示氧化磷...
刘莉姜苏蓉张小进陈晨丁国宪高翔程蕴琳
文献传递
稳定高表达HSPB1对大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用研究
本文研究克隆和重组了人心肌热休克蛋白B1基因,观察HSPB1高表达对大鼠心肌细胞氧化应激的保护作用并阐明其可能机制。   研究以稳定转染细胞系H9c2(HSPB1H9c2)和空载体转染的H9c2(CON)为实验对象,不...
姜苏蓉
关键词:心肌细胞线粒体膜电位ROS细胞凋亡
文献传递
热休克蛋白27抗细胞凋亡的分子机制被引量:7
2004年
姜苏蓉刘莉程蕴琳
关键词:热休克蛋白27细胞凋亡分子机制信号通路
一种便携式急救电源
本实用新型公开了一种便携式急救电源,涉及便携式急救用辅助装置技术领域,为解决现有的便携式急救电源在使用时常常由于在拿取时晃动过大而导致使用寿命大大降低的问题。所述急救电源箱体侧上方设置有限位横块,且限位横块与急救电源箱体...
洪牮闵笑颜姜苏蓉
文献传递
不同衰弱评估工具对老年射血分数保留的心力衰竭患者的临床意义
2024年
目的比较临床衰弱量表(CFS)、衰弱筛查量表(FRAIL)、衰弱表型量表(Fried)及衰弱指数(FI)四种衰弱评估工具在老年射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者中的临床意义与价值。方法单中心横断面研究。纳入2021年9月至2023年2月南京医科大学第一附属医院老年心血管科的住院患者190例,其中HFpEF组61例,非HFpEF组129例。分别使用CFS、FRAIL、Fried和FI进行衰弱评估,构建综合衰弱指数(CI)作为“金标准”,比较不同工具间的一致性、敏感度、特异度和受试者工作特征曲线下面积(AUC)。结果与非HFpEF组相比,HFpEF组的年龄、心房颤动比例、N末端B型利钠肽原水平、简版老年抑郁量表(GDS-15)评分更高,吸烟史比例、体质指数、舒张压、握力、简易精神状态评价量表(MMSE)评分、微型营养评估量表(MNA-SF)评分更低(均为P<0.05)。针对同一群体,所使用的衰弱评估工具不同,衰弱的患病率也各不相同;无论使用何种评估工具,HFpEF组中衰弱的患病率均高于非HFpEF组(均为P<0.001)。在整体人群及非HFpEF组中,CFS具有良好的敏感度(98.44%、100.00%,P<0.001)和特异度(91.27%、94.23%,P<0.001),AUC分别为0.960、0.975(P<0.001),与CI之间的一致性高(Kappa值=0.846、0.864,P<0.001);在HFpEF人群中,Fried具有最高的敏感度(100.00%,P<0.001)与可接受的特异度(77.27%,P<0.001),AUC为0.956(P<0.001),与CI之间的一致性最高(Kappa值=0.813,P<0.001)。结论衰弱在老年患者中十分普遍,尤其在HFpEF人群中发生率更高。在老年HFpEF人群中Fried适用性更好,在老年一般人群及非HFpEF人群中CFS更具优势。
程曦查志敏王向明姜苏蓉郭妍
关键词:老年人衰弱
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