孙丹凤
- 作品数：33 被引量：111H指数：6
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 胃癌组织中叶酸水平与代谢酶亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的关系研究被引量：8
- 2006年
- 目的 探讨人胃癌组织中叶酸水平与代谢酶亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性的变化及其关系.方法 收集38例晚期胃癌患者的癌区、癌旁和外周正常区域组织标本,以自动化学发光系统测定人胃癌组织叶酸含量,PCR-限制性内切酶片段长度多态性技术检测MTHFR基因677（C→T）和1298（A→C）两个常见多态,并以34例慢性浅表性胃炎（CSG）组织作为对照,分析叶酸、MTHFR基因多态性的变化及其关系.结果 CSG对照组中叶酸含量[（5.48±2.15）ng/m1]明显高于胃癌组织[癌区（3.65±1.97）ng/ml,癌旁（4.01±2.11）ng/ml,外周正常组织（4.00±2.20）ng/ml],胃癌组织MTHFR基因的两个多态位点中,677CT基因型叶酸含量最高,而1298（A→C）多态则未见明显差异.677TT基因型与CC基因型相比有减少胃癌发生的趋势,但与其生物学行为关系不密切.677TT基因型高叶酸组与CC基因型低叶酸组相比发生胃癌的相对风险度为0.11（95%CI：0.01～1.02）.癌组织标本检测中未发现1298CC基因型.结论 组织叶酸含量降低者发生胃癌风险明显增加.MTHFR基因多态性并不是胃癌的一个孤立危险因素,它和组织叶酸含量共同作用于胃癌发生.
- 翁玉蓉房静远孙丹凤陈朝飞朱红音
- 关键词：胃癌叶酸亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性
- 叶酸和丁酸盐在胃肠癌发生与预防中的作用
- 房静远萧树东朱舜时陈萦晅陆嵘施尧陈朝飞王霞杨丽翁玉蓉孙丹凤陆娟程中华
- 1992年1月-2006年12月，在国家自然科学基金面上项目、国家973计划、高等学校优秀博士毕业论文获奖作者基金、上海市“曙光计划”资助下，进行了该项目的研究。胃癌和大肠癌是常见的恶性肿瘤，发生率高。慢性萎缩性胃炎是胃...
- 关键词：
- 关键词：结肠直肠肿瘤叶酸治疗药物病理组织学
- GSTM1基因多态性及启动子甲基化在结肠癌细胞系中的研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究参与内毒物代谢的重要酶谷胱甘肽-S-转移酶M1(glutathione-s-transferase M1,GSTM1)在结肠癌细胞系中的基因表达状况与其遗传基因型及启动子甲基化的关系。方法采用多重PCR方法检测GSTM1基因型,甲基化特异PCR(MSP)方法检测GSTM1基因启动子甲基化状态;用5-aza-dC处理结肠癌细胞系,RT-PCR方法检测GSTM1基因转录水平。结果结肠癌细胞系HT29、SW480、SW1116为GSTM1非空白基因型,而HCT116、Lovo、Colo结肠癌细胞系为GSTM1空白基因型。MSP检测发现SW1116细胞中GSTM1基因主要呈非甲基化状态,其他5个细胞系中呈甲基化状态,而且基因表达缺失。经5-aza-dC处理后,HT29和SW480细胞的GSTM1基因表达复活,而HCT116、Lovo、Colo细胞中GSTM1仍无扩增。结论 GSTM1基因转录受到遗传基因型和表观遗传启动子甲基化双重调控。
- 田筱青孙丹凤房静远
- 关键词：结肠癌基因多态性甲基化甲基化特异PCR
- 抑制mTOR信号通路可增强5-aza-dC对胃癌细胞生长的抑制作用被引量：9
- 2008年
- 本实验主要研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路与DNA甲基化在人胃癌细胞生存活力、细胞周期、相关基因及蛋白表达方面的相互作用.分别单独或联合DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-dC)、mTOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)和PI3K抑制剂LY294002干预人胃癌MKN45和SGC7901细胞,以MTT检测细胞生存活力,流式细胞术检测细胞周期,real-timePCR检测PTEN,p27Kip1基因表达情况,亚硫酸氢盐修饰后测序检测DNA甲基化改变,蛋白免疫印迹检测相关蛋白表达情况.结果发现单独应用5-aza-dC对胃癌细胞的抑制作用不明显,当其联合mTOR信号通路抑制剂时则显著抑制胃癌细胞生长(P<0.01);抑制mTOR信号通路可增强5-aza-dC使细胞阻滞在G2期的作用;联合用药还能提高抑癌基因PTEN,p27Kip1的表达,但不影响DNA甲基化状态;LY294002及RAPA使Akt,p70S6K及4E-BP1磷酸化表达显著下降(P<0.01),但5-aza-dC并不增强这一效应.以上研究提示mTOR信号通路抑制剂可间接促进DNA甲基化酶抑制剂对胃癌细胞的抑制作用,为肿瘤的治疗提供新思路.
- 孙丹凤田筱青张燕捷陈萦晅陆嵘王霞房静远
- 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素DNA甲基化
- DNA甲基化酶抑制剂与雷帕霉素对人结直肠癌细胞周期及mTOR信号转导通路的联合作用被引量：5
- 2007年
- 目的探讨5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)与雷帕霉素(RPM)对人结直肠癌细胞的联合作用及机制。方法应用 MTY 比色法检测5-aza-dC 与 RPM 对3种人结直肠癌细胞株的生长抑制作用;应用流式细胞术检测两者对细胞周期的调控;应用免疫印迹法检测两者对于 mTOR 信号转导通路相关蛋白的影响。结果 5-aza-dC 与 RPM 对人结直肠癌细胞株 SW480、HT29和 HCT116均有生长抑制作用,在相同作用条件下,5-aza-dC 与 RPM 的联合抑制效果明显优于两者单独用药。5-aza-dC 与 RPM单独或联合用药对3种细胞的生长周期均具有调控作用(P<0.05),但作用位点不尽相同。5-aza-dC与 RPM 可下调 mTOR、p70s6K、4E-BP1蛋白的磷酸化水平,对蛋白的总体水平无明显影响,以两者的联合作用最为显著。结论 5-aza-dC 与 RPM 可联合抑制人结直肠癌细胞株 SW480、HT29和 HCT116的生长,并阻滞其细胞周期进程。其作用机制可能与影响 mTOR 信号转导通路蛋白磷酸化水平有关。
- 张燕捷房静远矫强赵树靓孙丹凤沈冠凤郭竹英
- 关键词：雷帕霉素结直肠癌信号转导
- 叶酸和丁酸盐在胃癌和大肠癌发生与预防中的作用
- 房静远萧树东朱舜时陆嵘陈萦晅施尧孙丹凤陈朝飞张燕捷唐洁婷
- 该项目历时15年的研究，较系统地分析并证实了表观遗传修饰在胃癌和大肠癌发生与预防中的作用。1、通过手术标本分析，并首次应用DNA甲基化酶(Dnmt)1重组质粒、与Dnmt1结合的单链核酸、ERK1-siRNA转染细胞等证...
- 关键词：
- 关键词：胃癌大肠癌叶酸丁酸盐
- 大肠癌高危人群：筛查和预防的重点被引量：15
- 2009年
- 大肠癌是常见的恶性肿瘤，其发病率在西方发达国家居恶性肿瘤的第2位。随着我国居民生活水平的不断提高和饮食习惯的日益西方化，大肠癌的发病率也逐年升高，已跃居第3～5位。局限于肠壁的大肠癌诊治后5年存活率可达90％；而伴淋巴结转移者5年存活率仅68％。
- 房静远沈镭孙丹凤
- 关键词：大肠癌高危人群5年存活率恶性肿瘤淋巴结转移饮食习惯
- mTOR信号通路抑制剂和DNA甲基转移酶抑制剂对人胃癌细胞株Syk表达的影响被引量：1
- 2013年
- 背景:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号途径和DNA甲基化均参与肿瘤的发生、发展。脾酪氨酸激酶(Syk)是一种候选抑癌基因,与肿瘤发生有关。目的:研究mTOR信号通路抑制剂和DNA甲基转移酶抑制剂对人胃癌细胞株Syk表达的调控作用。方法:分别单独或联合应用mTOR抑制剂雷帕霉素(RAPA)、DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)抑制剂LY294002干预人胃癌细胞株MKN45和SGC7901,以细胞计数法检测细胞增殖能力,实时定量PCR法检测Syk表达情况,亚硫酸氢盐修饰后测序法检测DNA甲基化改变。结果:单独应用5-Aza-dC对细胞增殖抑制不明显,与RAPA、LY294002联合则显著抑制细胞增殖。单独应用5-Aza-dC可通过抑制DNA甲基化上调胃癌细胞的Syk表达,联合应用5-Aza-dC、RAPA和LY294002则显著上调Syk表达,但未进一步抑制DNA甲基化。结论:抑制mTOR信号通路可间接增强DNA甲基转移酶抑制剂上调Syk表达,从而抑制胃癌细胞生长。
- 孙丹凤张燕捷田筱青房静远
- 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白脾酪氨酸激酶肿瘤抑制
- 丝裂原激活蛋白激酶阻断剂与DNA甲基化酶抑制剂对人结肠癌细胞的协同影响被引量：6
- 2006年
- 目的研究细胞外信号调节激酶-丝裂原激活蛋白激酶途径(ERK-MAPK)与DNA甲基化间的关系及对结肠癌细胞生物学行为的协同影响。方法培养人结肠癌细胞SW1116,分别以PBS、二甲基亚砜(DMSO)为对照组,PD 98059 50μmol／L、5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)5μmol／L、PD 98059 50 μmol／L+5-aza-dC 5μmol／L进行药物干预,以定量RT-PCR检测DNA甲基化酶(Dnmt)1、3a和3b基因转录水平;流式细胞仪分析细胞周期;MTT测定细胞活力;光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果 ERK-MAPK途径阻断剂PD 98059下调Dnmt 1和Dnmt 3b,Dnmt抑制剂5 aza-dC下调Dnmt 1、 Dnmt 3a和Dnmt 3b,日5-aza-dC联合PD98059对Dnmt1及Dnmt 3a mRNA的表达下调更为显著。5- aza-dC明显降低G0／G1期细胞百分比(P<0．05),G2／M期细胞百分比明显增加(P<0．05);PD98059 使G0／G1期细胞百分比降低(P<0．05),G2／M期增加(P<0．05)。PD98059明显抑制细胞生长。PD 98059促进细胞分化,呈上皮样改变,细胞变狭长,胞质减少,细胞排列开始出现相对整齐;5-aza-dC干预组细胞大小不一,出现较多多倍体细胞(多个核分裂相)。结论 ERK-MAPK途径阻断剂及Dnmt抑制剂均能抑制结肠癌SW1116细胞分裂、增殖,并诱导细胞分化;两者有协同作,ERK-MAPK信号转导途径能调控DNA甲基化水平。
- 陈朝飞房静远孙丹凤翁玉蓉李恩灵朱红音顾伟齐
- 关键词：细胞周期
- 叶酸受体α在胃癌组织中的表达及其与叶酸、亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性以及胃癌生物学行为的关系被引量：7
- 2006年
- 背景:叶酸缺乏与胃癌发生有关,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是叶酸代谢途径的关键酶之一,叶酸受体α(FRα)可介导细胞外叶酸进入细胞内。目的:探讨人胃癌组织中FRα的表达及其与叶酸、MTHFR基因多态性以及胃癌生物学行为的关系。方法:收集38例胃癌患者的癌组织、癌旁和外周正常组织标本,以自动化学发光系统测定叶酸含量,以聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)技术检测MTHFR基因677(C→T)和1298(A→C)两个常见多态,并以即时逆转录PCR(real-timeRT-PCR)检测FRα的表达。结果:FRα在胃癌组织中的表达显著降低(P<0.01),且表达降低癌组织与表达无变化癌组织相比,叶酸含量呈降低趋势(P=0.06)。FRα的表达与MTHFR基因多态性无明显相关性。年龄≥60岁、有淋巴结转移以及肿瘤直径≥5cm的胃癌组织FRα表达水平更低(P≤0.05)。结论:胃癌组织中FRα低表达影响了细胞外叶酸进入细胞内,从而参与了胃癌的发生,其表达降低与年龄增长和胃癌的进展有关。
- 翁玉蓉房静远孙丹凤陈朝飞陆嵘顾伟齐朱红音
- 关键词：叶酸受体Α叶酸亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性
