孙恒文
- 作品数：38 被引量：162H指数：7
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南方医科大学南方医院院长基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- X线诱导肺腺癌SPC-A-1细胞发生Parthanatos被引量：1
- 2015年
- 目的初步探讨X线诱导肺癌SPC-A-1细胞是否发生新的细胞死亡形式Parthanatos。方法以肺腺癌SPC-A-1细胞为研究对象,以1、2、4、6、8、10 Gy梯度剂量辐射细胞,平板克隆法测定X线辐射对人肺癌细胞SPC-A-1的半数致死剂量(LD50),WST-1法进行验证。LD50辐射细胞后4、8、12、24 h,RT-PCR法检测细胞AIF转录水平变化,Western blot检测细胞AIF蛋白表达变化,激光共聚焦观察细胞AIF向细胞核内转移情况,Western blot检测细胞辐射后不同时间AIF在线粒体蛋白组分和核蛋白组分中的分布变化。TUNEL法检测辐射后12 h细胞核DNA的断裂。结果 X线对SPC-A-1细胞的LD50大致为3 Gy。以3 Gy辐射细胞后不同时间AIF在转录、蛋白水平均无显著变化(P>0.05)。辐射后12 h AIF由线粒体向细胞核转位,伴随细胞核的溶解、碎裂。亚细胞组分Western blot检测到12 h后AIF在线粒体蛋白组分中显著下降,由对照组的1.12±0.15下降至12 h组的0.21±0.07(P<0.05),而在核蛋白组分中显著上升,由对照组的0.05±0.02上升至12 h组的0.45±0.07(P<0.05),同时在固缩的细胞核中检测到DNA的断裂。结论 AIF核转位参与了X线诱导的细胞凋亡过程。辐射后12 h AIF由线粒体向细胞核转位显著增多,导致细胞核固缩、碎裂、溶解,细胞发生了Parthanatos。
- 孙恒文曾子君方良毅谭佩欣谢松喜张红丹潘燚高东升
- 关键词：AIFX线辐射核转位
- 鼻咽癌细胞株CNE1、HONE1、C666-1和CNE2的亚致死性损伤修复速度测定被引量：1
- 2010年
- 目的测定CNE1、HONE1、C666-1和CNE2的亚致死性损伤修复速度参数-半修复时间(repair half-time,T1/2)。方法设0s、15s、30s、1h、2h、4h及6h共7个间隔时间,将8Gy照射剂量分为平分为两个4Gy间断照射4株细胞。采用集落形成法得到4株细胞在不同间隔时间两个4Gy照射后的存活分数。拟合细胞存活分数随间隔时间延长的变化曲线,并测算出T1/2。结果CNE1、HONE1、C666-1和CNE2的T1/2分别为18、22、29和27s。结论鼻咽癌细胞的亚致死性损伤修复速度较快。提示调强放疗中被延长的分次照射时间(15～45s)可能导致鼻咽癌细胞的辐射死灭效应降低。
- 王雯珺郑小康刘佳宾袁亚维陈龙华孙恒文
- 关键词：鼻咽癌
- 一种基于蒙特卡罗的后装三维剂量计算方法、介质及终端
- 本发明适用于放射治疗技术领域，涉及一种基于蒙特卡罗的后装三维剂量计算方法、介质及终端，包括：S10、建立HDR<Sup>192</Sup>Ir放射源的蒙特卡罗模型，计算模型在水中的剂量分布，验证模型的准确性；S20、导出...
- 韩俊杰孙恒文
- 非小细胞肺癌INK4a和ARF基因甲基化与其蛋白共表达关系的探讨被引量：3
- 2006年
- 目的:分析INK4a和ARF基因启动子甲基化与其蛋白共表达之间的关系。方法:选择前期实验中p14ARF和p16INK4a蛋白共表达阴性的非小细胞肺癌(NSCLC)患者35例,共表达阳性的NSCLC患者20例作为研究对象,分别称为(p14+p16)阴性组和(p14+p16)阳性组。运用甲基化特异性PCR(MSP)方法对两组患者癌组织INK4a和ARF基因启动子的甲基化状态进行检测。结果:(p14+p16)阴性组有18例发生INK4a基因甲基化,(p14+p16)阳性组有2例发生INK4a基因甲基化,两组差异有显著意义(P<0.01)。(p14+p16)阴性组有8例发生ARF基因启动子甲基化,(p14+p16)阳性组有2例发生ARF基因启动子甲基化,两组差异无显著意义(P>0.05)。INK4a和ARF基因异常甲基化相互之间无显著相关性(P>0.05)。结论:NSCLC患者肺癌组织INK4a基因甲基化是导致p16INK4a蛋白表达阴性的重要机制;INK4a和ARF基因甲基化可能是相对独立的事件。
- 高丽莉胡义德李军果谢启超孙恒文胡中华
- 关键词：非小细胞肺癌甲基化甲基化特异性PCR
- 人线粒体DNA基因表达谱芯片的制备及鉴定
- 2015年
- 研制人线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)表达谱芯片,鉴定芯片的特异性和稳定性,完善芯片的制备和使用程序,优化实验参数,为线粒体功能研究提供物质基础及技术保障。以人mt DNA剑桥序列为标准,设计mt DNA编码的13种mRNA、2种rRNA和9种tRNA基因及蛋白产物定位于线粒体的核DNA(n DNA)编码的5种凋亡相关基因寡核苷酸探针。芯片点样仪点制芯片,进行荧光显示和洗脱,用其检测人宫颈癌上皮Hela细胞和人肾小管上皮Hc1细胞c DNA文库mt DNA编码基因及n DNA编码凋亡相关基因的差异表达情况。所点制的芯片扫描结果显示,样点分布均匀、清晰,规整度好,无漏点、连点。c DNA文库杂交鉴定结果显示,整张芯片荧光信号均匀一致,背景清晰,各基因重复样点杂交结果一致,各质控点能正常显示。成功制备了人mt DNA基因表达谱芯片,完善了该芯片的制备和使用程序,通过初步应用,证明所研制的人mt DNA基因表达谱芯片具有特异性高、稳定性好等优点,可用于不同组织或细胞样本c DNA文库mt DNA基因的差异表达分析。
- 孙恒文胡义德曾子君潘燚方良毅谭佩欣曾向伟
- 关键词：线粒体DNA基因表达寡核苷酸芯片信使RNA核糖体RNA
- 细胞质DNA的提取方法
- 本发明涉及一种提取细胞DNA的方法，采用以下过程：单细胞或外周白细胞——细胞、线粒体的裂解——DNA变形与复性--DNA提取及纯化，直接从细胞中提取细胞质DNA，所得DNA样品完全可以满足常规分子生物学和分子遗传学如PC...
- 胡义德孙恒文刘丽红钱海洪
- 文献传递
- 基因芯片技术在人线粒体遗传研究中的应用被引量：2
- 2007年
- 线粒体携带除核DNA外的遗传物质线粒体DNA。由于线粒体DNA的多拷贝,随细胞分裂的随机性,造成了非严谨性的遗传特性。研究发现,线粒体编码的13个多肽在电子传递链中发挥重要作用,同时也可能直接影响细胞的分裂和增殖。因此,线粒体的功能异常可引起许多与能量代谢相关的疾病,称之为线粒体相关性疾病。基因芯片技术可同时检测成千上万个基因的突变和差异表达情况,为我们全面研究线粒体遗传功能规律提供了条件和可能性。本文综述了基因芯片技术在mtDNA突变分析、mtDNA基因表达谱分析、线粒体疾病研究及法医学方面的研究进展。
- 孙恒文胡义德
- 关键词：基因芯片线粒体DNA突变基因表达
- 原发巨大肝癌介入化疗栓塞合并三维适形放疗疗效观察被引量：12
- 2009年
- 目的评价肝动脉化疗栓塞(TACE)合并三维适形放疗(3-DCRT)对晚期原发巨大肝癌的疗效。方法搜集2001年1月～2004年12月诊治病例,对84例无法进行手术的巨大(直径≥10cm)原发性肝癌进行TACE、3-DCRT序贯治疗。其中UICC/AJCC T3期49例,T4期35例,均为N0,合并有门脉癌栓30例。根据Child-Pugh肝硬化分级,A级64例,B级20例。可见肿瘤体积(GTV)为(705±430)cm3(170～2099cm3)。先行TACE:将氟尿嘧啶和羟喜树碱注入患者肝肿瘤的供血动脉(靶动脉),然后将卡铂和丝裂霉素(或吡柔比星)与超液化碘油充分混合成乳剂注入靶动脉,再用明胶海绵颗粒栓塞治疗,根据患者情况每1.5～2个月重复1次,1～3次治疗。后行3-DCRT,每次分割剂量4～6Gy,照射次数(11±2)次(7～15次),肿瘤剂量(53.6±6.6)Gy,每周3次,隔日1次。结果8例患者3-DCRT后3个月内死亡,未能评价疗效,总有效率(CR+PR)68.9%(51/74),1、2和3年累积生存率分别为55.4%、24.7%和15.4%,T分期、GTV、门脉癌栓和分割剂量对生存率的影响无显著差异,Child-Pugh肝硬化分级是独立的预后因子(P=0.035,相对危险度=2.440)。结论3-DCRT合并TACE对晚期巨大原发肝癌有一定疗效,Child-Pugh是独立预后因子。
- 孙恒文陈龙华韦传军郑小康李启生官键
- 关键词：原发性肝癌介入治疗
- 靶向治疗时代全脑同步整合加量调强放疗对肺腺癌多发或大体积脑转移患者的疗效分析被引量：7
- 2019年
- 目的探讨靶向治疗时代全脑同步整合加量调强放疗对多发或大体积脑转移肺癌患者的疗效及安全性。方法回顾性分析广东省人民医院放疗科58例非小细胞肺癌脑转移患者接受全脑同步整合加量调强放疗的疗效及毒副反应。结果58例患者全部接受了全脑同步整合加量调强放疗,8例(14%)患者完全缓解,46例(79%)患者部分缓解,4例(7%)患者疾病稳定。全组中位颅内无进展生存期为15.9个月,中位放疗后颅内无进展生存期为12.4个月;中位总生存期为21.6个月,中位放疗后总生存期为18.4个月。有驱动基因初治脑转移组、有驱动基因继发脑转移组和无驱动基因脑转移组患者的放疗后颅内无进展生存期(9.0个月vs.10.4个月vs.13.9个月,P=0.166)及放疗后总生存期(13.7个月vs.20.9个月vs.16.9个月,P=0.762)无明显差异;有驱动基因继发脑转移组和无驱动基因脑转移组的颅内无进展生存期(12.5个月vs.14.7个月vs.25.7个月,P=0.047)及总生存期(22.5个月vs.17.6个月vs.30.6个月,P=0.048)差于有驱动基因初治脑转移组,差异有统计学意义。早期毒性反应(CTC V4.0)Ⅰ度54例,Ⅱ度3例,Ⅲ度1例,无Ⅳ度反应。晚期毒性反应(RTOG)Ⅰ度55例,Ⅱ度3例,无Ⅲ、Ⅳ度反应。结论全脑同步整合加量调强放疗对于肺癌多发或大体积脑转移患者具有较好疗效,毒副反应可耐受。
- 林辉梁瑜孙恒文李伟雄谢松喜
- 关键词：脑转移瘤
- 线粒体DNA在肺癌发生及治疗中的作用及其分子机制研究
- 胡义德钱桂生孙恒文刘丽红钱海洪孙玉兰贾立明
- 线粒体DNA（mtDNA）在肺癌发生及治疗中的作用及其分子机制的研究。该研究中首先成功建立了简便、快速制备各种组织及单细胞mtDNA的新方法并得到广泛应用；成功研制了寡核苷酸芯片，用于不同组织或细胞样本cDNA文库mtD...
- 关键词：
- 关键词：线粒体DNA肺癌基因
