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绵羊肺炎支原体Y98 P30基因的克隆、表达及免疫试验被引量：8: 2012年; 根据猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)跨膜蛋白P30基因序列设计引物,通过PCR克隆出绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜蛋白P30基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MOP30基因与Mhp P30基因核苷酸序列同源性为79%。抗原表位及跨膜结构预测的结果表明,MO P30基因与Mhp P30基因的抗原表位及跨膜结构均具有高度的一致性。该片段中含1个TGA编码Trp,而不是终止密码子。将P30基因与原核表达载体pET-28a连接构建pET-28a-P30表达质粒,转化受体菌Rossta得到重组菌株Rossta(pET-28a-P30)。经诱导后SDS-PAGE表明有30 000左右的目的条带出现;Western blot表明Rossta(pET-28a-P30)表达的30 000蛋白主要以包涵体的形式存在;小鼠免疫试验表明Rossta(pET-28a-P30)原核表达的蛋白对小鼠具有一定的保护作用。; 赵红艳刘文青车腾飞卢金华宋静岚赵宝华; 关键词：P30基因基因表达免疫动物

染料木黄酮的抗巨噬细胞泡沫化效应及其分子机制研究被引量：2: 2013年; 目的研究染料木黄酮对动脉粥样硬化过程中巨噬细胞泡沫化的抑制作用，并探讨其抗泡沫化的分子作用机制。方法采用体外OX．LDL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264．7产生泡沫化，通过油红0染色观察细胞内脂质聚集程度判定细胞的泡沫化程度以及药物效应；利用报告基因细胞检测方法评价染料木黄酮对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体PPAR和肝x受体LXR的转录调控功能的激动作用；利用实时定量PCR检测染料木黄酮对巨噬细胞中OX．LDL摄取以及胆固醇逆转运相关基因的mRNA水平。结果OX—LDL处理的空白组小鼠RAW264．7单核巨噬细胞内聚积大量的脂质，而经过10gg／ml染料木黄酮处理后的RAW264．7细胞内脂滴量明显减少，细胞泡沫化程度被大幅度降低。瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果说明，染料木黄酮对核受体PPAR和LXR均有较高的转录激活效应，其EC50值分别为3．5～9．2gg／ml和1．6～3_3gg／ml。定量PCR研究结果显示，染料木黄酮可以有效地使巨噬细胞中的胆固醇逆转运基因LXRa、LXRl3、ABCAl、ABCGl、和SR-B1的表达上调，而作为主要摄取OX—LDL受体的CD36基因的表达无明显变化。结论染料木黄酮可以有效抑制动脉粥样硬化过程中巨噬细胞的泡沫化，而该作用机制可能是通过激活PPAR和LXR通路，上调胆固醇逆转运蛋白的ABCAl、ABCGl、LXRGt、LXR13、SR．131基因的表达，增强了巨噬细胞的胆固醇外排，从而防止动脉粥样硬化的发生和发展。; 宋静岚刘晨赵颖孟雅娟路新华赵宝华郑智慧段宝玲; 关键词：染料木黄酮动脉粥样硬化泡沫细胞胆固醇逆转运

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宋静岚

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