尹小毛
- 作品数：33 被引量：80H指数：5
- 供职机构：南方医科大学第五附属医院更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目国家科技重大专项广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 直接检测痰标本中MPB64蛋白在结核病诊断中的临床应用价值被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨直接检测痰液标本MPB64蛋白作为结核病快速诊断方法的可能性。方法:对65例肺结核病患者和72例非结核病患者的痰液标本同时进行痰涂片染色抗酸菌检查、实时荧光定量PCR检测结核杆菌DNA和免疫胶体金法检测MPB64蛋白,比较分析3种方法的检测结果,并依据临床诊断对MPB64蛋白检测结果进行诊断方法学评价。结果:MPB64蛋白检测法与涂片染色、荧光定量PCR检测结果的符合率均为60.58%;MPB64蛋白检测的敏感度、特异度、准确度分别为58.46%、69.44%和64.23%,其敏感度显著高于涂片染色法的27.69%与荧光定量PCR法的35.38%,但其特异度和准确度则低于涂片染色法(100%、65.69%)与荧光定量PCR法(98.61%、68.61%)。结论:采用免疫胶体金法直接检测痰液标本中MPB64蛋白对结核病的诊断具有较高的敏感度,可以作为筛查检测手段;但特异度相对较低,可否作为一种结核病快速诊断方法值得进一步研究。
- 孟繁荣谢贝郑小凌尹小毛蔡杏珊许婉华彭湘明赖艳榕刘志辉
- 关键词：结核MPB64
- 胶体金免疫层析和实时荧光PCR在分枝杆菌快速检测与鉴定中的应用研究
- 研究背景和目的 分枝杆菌大部分属于腐生菌,但也有一些能导致人类或动物疾病,其中结核分枝杆菌复合物（Mycobacterium tuberculosis complex,MTC）可引起结核病,麻风分枝杆菌能导致麻风病...
- 尹小毛
- 关键词：非结核分枝杆菌胶体金免疫层析实时荧光PCR
- 建立基于gyrB基因检测结核分枝杆菌复合物的荧光定量PCR法
- 2013年
- 目的建立基于gyrB基因扩增检测结核分枝杆菌复合物(MTC)的荧光定量PCR(FQ-PCR)法。方法根据gyrB基因设计合成引物和探针,建立并评价TaqMan探针FQ-PCR法,并与基于IS6110序列的FQ-PCR法分别检测50例临床标本,比较两种方法的检测结果。结果建立的FQ-PCR法标准曲线方程为Y=-3.18X+42.84,相关系数(r2)为0.995、扩增效率为106.25%,其检测灵敏度为102CFU/mL;MTC中结核分枝杆菌和非洲分枝杆菌阳性,其他分枝杆菌和4株临床其他细菌均为阴性。批内及批间变异系数(CV)均<2%,重复性良好。本法与基于IS6110序列的FQ-PCR法对50例临床标本的检测结果差异无统计学意义(χ2=0.06,P>0.05),一致性好(κ=0.94)。结论基于gyrB基因扩增的FQ-PCR法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于结核分枝杆菌复合物的早期快速诊断。
- 毛欣茹尹小毛郑磊王前
- 关键词：荧光定量PCR
- 分枝杆菌菌株库建设模式与实践研究被引量：5
- 2012年
- 目的建立生物安全保证、菌种资源丰富、相应资料齐全、操作流程顺畅、资源共享便捷的分枝杆菌菌株库,为结核病临床诊疗与科学研究提供基础性平台。方法主要依照二级生物安全(BSL-2)实验室管理要求和"中国医学微生物菌种保藏管理办法"、"人间传染的病原微生物名录"等法规构建分枝杆菌菌株库生物安全保证体系;根据菌株库的功能作用结合结核病临床诊疗与科学研究的最新成就及未来发展要求确立分枝杆菌菌株库建设的内涵与外延;以临床分离菌株、专项研究收集菌株为操作对象制定适宜的菌株资料、相应病例资料收集及信息库建设流程;采用网络通讯和数据库技术建立分枝杆菌菌株库信息系统以提高建库工作效率和提供便捷的资源共享服务。结果①构建了包括生物安全管理领导机构、实验技术生物安全水平标准、实验室生物安全管理与防护、菌株库生物安全管理等在内的分枝杆菌菌株库生物安全保证体系;②分枝杆菌菌株库包括菌株保存库、菌株资料库及相应病例资料库、菌株库信息系统三大主要部分,保存菌株的资料收集以相应的1个治疗周期为界限,菌株保存周期为10年;③临床分离菌株的菌株资料、相应病例资料收集及信息库建设流程按时间序列包括收集菌株库外暂存、菌株资料录入、病例资料录入、菌株保存价值判定、菌株入库保存、特定菌株取用及研究信息补充录入等重大步骤,专项研究收集菌株则按其特定的要求建立相应的工作流程;④采用SQL SERVER大型数据库和Delphi7开发工具开发了基于C/S体系结构包含保藏管理、质控管理、文档管理、资源管理、系统管理等五大子系统的分枝杆菌菌株库信息系统。结论在分枝杆菌菌株库建设中,生物安全保证是前提、丰富内涵建设是中心、合理流程设置是关键、信息系统开发是基础。
- 刘志辉钟球陈涛孟繁荣钱明李昕洁尹小毛刘健雄张言斌王云南薛植强陈其琛谭守勇
- 关键词：分枝杆菌菌种保藏菌种资源生物安全
- 循环microRNA检测技术及分析前质量控制被引量：1
- 2015年
- miRNA在许多疾病中起着重要作用，如与细胞增殖、分化和凋亡等相关。鉴于循环miRNA的稳定性，血液标本获取的无创性，因此它可作为生物标志物应用于临床。目前miRNA检测方法多样，影响其检测的因素很多，无统一操作规程，本文即对miRNA的检测技术及分析前影响因素进行探讨。
- 曹顺旺尹小毛郑磊王前
- 关键词：微RNAS临床实验室技术生物学标记
- 155例汉族结核病患者N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因多态性分析被引量：10
- 2011年
- 目的探讨中国汉族结核病患者N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因分布特征。方法应用PCR-DNA测序技术测定外周血淋巴细胞基因组NAT2基因的特定序列,分析常见位点的单核苷酸突变,并与文献报道的中国其他地区健康人群NAT2基因多态性进行比较。结果对155例汉族结核病患者NAT2基因的特定序列进行了测定,NAT2等位基因频率分别为:NAT2*4(50.7%),NAT2*5A(0.6%),NAT2*5B(4.8%),NAT2*5C(1.0%),NAT2*6(28.7%),NAT2*7(14.2%);共检测到NAT2*4/4、NAT2*4/5A、NAT2*4/5B、NAT2*4/5C、NAT2*4/6、NAT2*4/7、NAT2*5B/6、NAT2*5B/7、NAT2*6/6、NAT2*6/7、NAT2*7/7 11种基因型,根据基因表型的代谢速度将其分为快型(NAT2*4/4)、中间型(NAT2*4/5A、NAT2*4/5B、NAT2*4/5C、NAT2*4/6、NAT2*4/7)、慢型(NAT2*5B/6、NAT2*5B/7、NAT2*6/6、NAT2*6/7、NAT2*7/7)3类,出现频率分别为:23.2%,54.9%(1.3%,3.2%,1.9%,34.9%,13.6%),21.9%(1.9%,4.5%,5.8%,9.0%,0.6%);结核病患者与健康人群间的代谢速度分型频率差异有统计学意义(2χ=11.93,P<0.01)。结论中国汉族结核病患者NAT2的基因表型以中间型为主要存在形式(占54.9%),NAT2的基因型分布可能与结核病易感性有关。
- 李昕洁王云南邹永红何刚尹小毛张言斌苏雯婕刘志辉
- 关键词：汉族
- 结核杆菌复苏促进因子在分枝杆菌培养中的作用观察
- 2011年
- 目的探讨结核杆菌复苏因子（TB—RPF）在结核患者标本的分枝杆菌培养中的作用。方法收集疑似结核患者的痰液42例，支冲液8例，胸腔积液25例，经4％NaOH液化处理后用PBS洗涤并悬浮菌体，每份标本分设对照组和RPF组，按照两组各0．5ml菌液量接种于MGIT培养管。对照组培养基采用含Middlebrook7H9的常规MGIT培养管，RPF组则在对照组基础上加入RpfA／B／C／D／E五种蛋白混合物。接种后的所有培养管放入960全自动分枝杆菌培养系统中培养。阳性培养物行分枝杆菌菌种鉴定，记录培阳标本的报阳时间，统计培阳率。结果痰液的RPF组和对照组培阳率分别为42．86％（18／42）和45．24％（19／42）；支冲液的RPF组和对照组的培阳率分别为37．5％（3／8）和62．5％（5／8）；胸腔积液的RPF组和对照组的培阳率均为20％（5／25），各类标本两组间培阳率差异无统计学意义（P〉0．05o在结核培阳的标本中，9例为两组报阳天数相等；6例（胸水3例，痰2例，支冲液1例）RPF组报阳天数少于对照组，缩短天数为1～11天，平均缩短4．33天；9例RPF组报阳天数长于对照组，延长时间为1～2天，平均延长1．11天。另有3例对照组结核培阳，而RPF组培阴。结论结核杆菌复苏因子对痰液、支冲液和胸水的结核培阳率无明显提高，对胸水结核培阳时间的缩短有较明显的促进作用。复苏因子在不同标本中的复苏作用有待进一步摸索。
- 郑小凌蔡杏珊谢贝孟繁荣高俊文尹小毛周辉林刘志辉
- 关键词：结核杆菌
- 基于gyrB序列Taqman实时荧光PCR检测在MTC鉴定中的应用被引量：4
- 2014年
- 目的:初步分析基于gyrB序列的Taqman实时荧光PCR在MTC(结核分枝杆菌复合群)鉴定中的应用。方法:根据MTC gyrB序列设计引物和探针,应用荧光定量PCR对14株标准株及90株临床分离株进行临床研究,并与测序法结果进行比较。结果:14株标准株中,非洲分枝杆菌与结核分枝杆菌结果为阳性,其余结果为阴性;30株临床分离株与ITS测序比较,有1株NTM结果为阳性,1株MTC结果为阴性,其余菌株检测结果与测序结果符合,分析特异度高;将60株临床分离株的检测结果与测序结果进行比较,得到该方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均为100%。结论:采用基于gyrB序列的Taqman荧光PCR可快速检测和鉴别MTC和NTM。
- 张诗蒙尹小毛刘非郑磊王前
- 关键词：结核分枝杆菌
- 广州地区耐喹诺酮结核分枝杆菌gyr基因突变特点被引量：4
- 2010年
- 目的分析广州地区耐喹诺酮结核分枝杆菌临床菌株的gyr基因突变特点,为进一步研究结核分枝杆菌耐喹诺酮类药物的分子机理提供地区性资料。方法采用绝对浓度法测定结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性,应用DNA直接测序法检测结核分枝杆菌gyr基因的突变情况。结果23株左氧氟沙星耐药株中,15株存在gyrA基因突变,突变率为65.2%,突变位点包括89位、90位、91位和94位;1株存在gyrB基因突变,突变率为4.3%,突变位点为511位。结论广州地区耐喹诺酮结核分枝杆菌临床菌株的gyr基因突变情况与其它地区存在差异。
- 尹小毛俞朝贤谢贝郑小凌
- 关键词：喹诺酮GYRA基因结核分枝杆菌
- 肺结核患者强化治疗前后血清差异蛋白质质谱分析被引量：4
- 2010年
- 目的研究肺结核患者强化治疗前后血清蛋白质谱的变化。方法利用弱阳离子(WCX)液体蛋白质芯片和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对16例肺结核患者强化治疗前后的血清蛋白质谱进行比较分析。结果强化治疗前后有22种蛋白质的相对含量有明显差异,11种蛋白质在强化治疗后相对含量明显升高(P<0.05),另外11种蛋白质在强化治疗后相对含量明显降低(P<0.05)。结论肺结核患者强化治疗前后血清蛋白质谱存在明显差异。
- 尹小毛刘志辉刘玉美罗强生谭守勇刘健雄
- 关键词：肺结核蛋白质组学
