张奇舒
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 密码子优化的肺炎支原体P1蛋白在大肠杆菌中的克隆表达被引量：4
- 2012年
- 目的：获得密码子优化的肺炎支原体P1黏附蛋白优势表位抗原基因,并在大肠杆菌中表达,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法：采用生物信息学分析肺炎支原体P1蛋白的抗原表位,筛选特异性P1蛋白优势表位区;采用大肠杆菌优势密码子,设计上述P1蛋白优势表位基因序列;采用退火PCR技术合成上述基因,并利用载体pGEX-4T-2实现P1优势表位抗原在大肠杆菌中的表达;采用ELISA法对纯化的P1抗原活性进行测定。结果：肺炎支原体P1蛋白特异性抗原表位主要位于1154~1521 aa,获得的P1优化密码子基因平行突变37个稀有密码子和2个终止密码子;在大肠杆菌中表达的GST-P1融合蛋白的相对分子质量为65.9×103,纯化后重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性的免疫反应。结论：采用密码子优化基因合成技术实现了肺炎支原体P1优势表位抗原在大肠杆菌中的高效表达,为肺炎支原体感染的诊断试剂研究提供了重要参考。
- 张奇舒修冰水宋晓国张贺秋谢宝贵
- 关键词：肺炎支原体原核表达
- 一种肺炎支原体抗原、制备方法以及免疫检测试剂盒
- 本发明提供了一种肺炎支原体(MP)抗原，该抗原的抗原片段为MP371或MP661。MP371位点位于MP黏附蛋白P1的N末端371-480aa；MP661位点位于MP黏附蛋白P1的N末端661-772aa。本发明还涉及含...
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- 肺炎支原体黏附蛋白P30的高效表达及初步应用被引量：1
- 2014年
- 目的:克隆表达肺炎支原体黏附蛋白P30,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法:采用大肠杆菌优势密码子设计P30蛋白优化基因序列,采用Genscript软件评价设计基因的密码子适应指数(CAI),并利用载体p BVIL1实现P30优势表位基因在大肠杆菌中的表达,采用ELISA法对纯化的P30抗原活性进行测定。结果:野生P30基因的CAI为0.59,优化P30基因的CAI为0.84;在大肠杆菌中表达的IL1-P30融合蛋白的相对分子质量为43.5×103,纯化后的重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性免疫反应,灵敏度和特异性分别为82.35%和89.36%,ROC曲线下面积为0.9088。结论:采用密码子优化技术实现了肺炎支原体黏附蛋白P30在大肠杆菌中的高效表达,获得的重组P30蛋白具有很好的抗原性,可用于肺炎支原体诊断试剂的研究。
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- 关键词：肺炎支原体原核表达
- 肺炎支原体黏附蛋白表位抗原的筛选、克隆表达及初步应用
- 目的利用生物信息学分析筛选肺炎支原体三个黏附蛋白的优势诊断抗原表位,克隆表达多种表位抗原,建立酶联免疫检测方法,初步用于肺炎支原体的抗体检测。方法 BioStm生物学软件分别预测肺炎支原体三个黏附蛋白抗原B细胞表位,利用...
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- PCR-EIA技术的研究进展及应用被引量：1
- 2011年
- 聚合酶链反应-酶免疫测定(PCR-EIA)技术是将PCR技术的简捷高效性与ELISA技术的灵敏特异性结合于一体,利用微孔板进行的快速、高通量、非放射性新型核酸检测技术。与以往的基因检测方法相比,PCR-EIA技术在灵敏度、特异性、一次性检测样本量、检测时间等方面有诸多优势,具有更广泛的应用前景。我们简要介绍了其原理、分类及应用。
- 张奇舒修冰水张贺秋谢宝贵
- 关键词：ELISA引物探针
- 一种肺炎支原体抗原、制备方法以及免疫检测试剂盒
- 本发明提供了一种肺炎支原体(MP)抗原，该抗原的抗原片段为MP371或MP661。MP371位点位于MP黏附蛋白P1的N末端371-480aa；MP661位点位于MP黏附蛋白P1的N末端661-772aa。本发明还涉及含...
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- 文献传递
- 密码子优化技术在肺炎支原体检测试剂研发中的初步应用
- 肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae, Mp）是儿童和青少年非典型肺炎的首要病原微生物，我国5岁以下儿童约有2110万临床肺炎新发病例(0.22次/人年)，且呈逐年递增趋势。Mp引起的肺炎临床表现与肺炎...
- 张奇舒
- 关键词：肺炎支原体黏附蛋白P1P30
- 文献传递
