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PPM1A蛋白的表达纯化及鼠多克隆抗体制备研究被引量：3: 2008年; 目的表达、纯化PPM1A-His融合蛋白及制备鼠多克隆抗体。方法将pBEX1-PPM1A-His原核表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内进行诱导表达,用纯化的PPM1A-His融合蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA、免疫组化和免疫荧光检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功表达并纯化了PPM1A-His融合蛋白,纯化后纯度可达90%;ELISA法测定抗体效价为1∶100000;免疫组化和免疫荧光结果显示所制备的抗体可特异性检测肝和肝癌细胞的PPM1A。结论获得的PPM1A鼠多克隆抗体有较高的效价和特异性,为PPM1A在肝癌的相关研究打下了基础。; 吴淑坤杨燕王宝菊田拥军张娥娟张振华杨东亮; 关键词：多克隆抗体肝癌

PD-1／PD-L1抑制性通路在病毒性感染中的研究进展被引量：2: 2008年; 杀伤性T细胞（CTL）是病毒感染过程中主要的效应细胞。在急性病毒性感染中，CTL细胞通过杀伤病毒感染的细胞，分泌抗病毒细胞因子从而有效清除病毒。而在慢性病毒感染过程中，病毒特异性CTL发生克隆耗竭，细胞数量少，细胞功能受损，分泌细胞因子能力下降。目前证明，CD28家族成员Programmed Death-1（PD-1）是一种重要的细胞表面分子，能够抑制CTL细胞功能，参与外周免疫耐受，维持T细胞克隆耗竭，保护机体不受免疫病理损伤。在慢性病毒性感染中，T细胞表面的PD-1与其受体PD．L1／2结合后，传递抑制性信号，下调外周T细胞功能。阻断PD-1通路，能够重建CD8^＋T细胞功能，抑制病毒复制，促进病毒清除。因此，通过干扰PD-1／PD-L1抑制途径进行免疫调节，可能是处理慢性病毒感染性疾病的一个新方法。; 张娥娟田拥军徐飓陆蒙吉杨东亮; 关键词：感染免疫慢性病毒感染 PD-1

截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白原核表达、多克隆抗体的制备和鉴定被引量：2: 2008年; 目的：构建截短型鸭乙型肝炎病毒（DHBV）核心蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，制备多克隆抗体。方法：应用基因工程技术将编码截短型DHBV核心蛋白（DH-BcAg 1～214aa）的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内，在宿主菌Rosetta（DE3）pLacI内进行诱导表达，运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白。用纯化的重组蛋白免疫BALB／c小鼠制备多克隆抗体，并采用酶联免疫吸附实验（ELISA），Western blot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性。结果：成功地构建了含截短型DHBV核心区基因的质粒，并纯化得到了相对分子质量（Mr）约为28000的目的蛋白，用之免疫BALB／c小鼠获得了高效价的特异性多克隆抗体。结论：获得的重组截短型DHBV核心抗原纯度高，免疫反应性强；获得的多克隆抗体有较高的效价和较好的特异性，为DHBV的检测和研究奠定了实验基础。; 王超田拥军张娥娟吴洪坤刘嘉王宝菊赵西平杨东亮; 关键词：鸭乙型肝炎病毒核心蛋白多克隆抗体

截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白单克隆抗体的制备及初步应用: 2009年; 目的:制备能与鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHB-cAg)特异性结合的单克隆抗体(mAb),使之能特异性地对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)进行检测。方法:以原核表达的截短型鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg1-214)免疫BALB/c小鼠后常规杂交瘤技术进行细胞融合,有限稀释法克隆化,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(IHC)筛选、鉴定。结果:筛选出3株(3H4、4A11、5A12)能有效分泌抗鸭乙肝病毒核心抗原的杂交瘤细胞株。该mAb可用于ELISA、IHC和Westernblot研究。结论:获得了3株有效分泌抗核心抗原的mAb,可用于鸭乙肝病毒相关肝病组织与血清的检测。; 王超田拥军龚劲松张娥娟刘嘉王宝菊赵西平杨东亮; 关键词：鸭乙型肝炎病毒核心蛋白单克隆抗体

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张娥娟