张学晶
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
- 供职机构:河北大学化学与环境科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:理学医药卫生更多>>
- 双链特异性核酸酶介导的高灵敏度microRNA分析被引量:3
- 2014年
- 基于氧化石墨烯(GO)对荧光标记单链DNA探针的荧光猝灭效应以及双链特异性核酸酶(DSN)选择性切割DNA/RNA杂合结构中DNA单链的特性,本文建立了一种新型恒温信号放大方法用于microRNA(miRNA)的高灵敏度检测.靶标miRNA首先与荧光DNA探针杂交,DSN能够特异性地将杂合双链中的DNA探针水解为碎片但不会降解miRNA,GO对酶切产生的寡核苷酸碎片吸附能力显著降低,使得荧光基团远离GO表面而不被猝灭.释放出的miRNA可再次发生与荧光DNA探针杂交、DSN酶切等反应,如此反复,可实现恒温条件下一个miRNA分子与多个探针杂交、酶切、释放荧光基团的循环过程,最终体系的荧光信号得到显著放大,通过记录体系的荧光信号即可实现对靶标miRNA的灵敏检测.
- 李晓利王愈聪张学晶赵云颉刘成辉李正平
- 关键词:MICRORNA氧化石墨烯
- 基于荧光偏振的高灵敏度蛋白激酶活性分析被引量:2
- 2013年
- 利用TiO2纳米棒与磷酸化肽的特异性相互作用,基于荧光偏振检测,建立了快速、简便的高灵敏度蛋白激酶活性分析方法.在蛋白激酶催化作用下,荧光标记的肽底物被磷酸化,磷酸化的荧光肽通过磷酸基团特异性结合在TiO2纳米棒表面,从而使底物肽上标记的荧光分子的旋转速率发生改变,通过对荧光偏振度进行测量,可实现蛋白激酶活性的定量检测,该方法对蛋白激酶A(PKA)的检出限可达0.0004 UμL-1.此外,该方法还成功用于PKA抑制剂H-89的检测,在基于蛋白激酶抑制剂的靶向药物筛选方面具有很好的应用前景.
- 王志彬张学晶王愈聪高金鹏李正平
- 关键词:荧光偏振蛋白激酶A磷酸化抑制剂筛选