张春雷
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 一氧化氮增强环磷酰胺对白血病细胞损伤效应的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的:观察体外培养条件下一氧化氮(NO)能否增强环磷酰胺对L1210细胞的损伤效应,并探讨其作用机制。方法:将不同的转染3T3细胞与L1210细胞进行共培养,DMEM培养液中加入终浓度为400μg/ml的环磷酰胺。根据接种的转染细胞不同分为三组:第1组为pcDNA3.0iNOS转染的3T3细胞,第2组为pcDNA3.0转染的3T3细胞,第3组为pcDNA3.0iNOS转染3T3细胞,并添加终浓度100μmmol/L的Caspase-3特异性抑制剂DEVDCHO。分别采用锥虫蓝拒染试验和TUNEL试验,检测各组L1210细胞在不同培养时间的细胞成活率和凋亡率,同时利用流式细胞术分析各组L1210细胞的增殖状态。结果:①各组L1210细胞成活率随培养时间的延长均逐渐下降,第1组较第2组下降更快,从12h开始两组差异已有显著性意义(P<0.05);第3组的细胞成活率明显高于第1组,培养24h开始差异有显著性意义(P<0.05)。②各组L1210细胞的凋亡率持续上升,第1组较第2组升高更快,从培养12h开始即差异有显著性意义(P<0.05);第3组细胞凋亡率明显下降,从12h开始即显著低于第1组(P<0.05)。③培养4h时,各组L1210细胞中的G1期细胞百分率(G1%)显著升高,S期细胞百分率(S%)明显下降,第2、3组的G1%显著低于第1组(P<0.05),S%显著高于第1组(P<0.01、P<0.05);培养8、12h时,三组之间的G1%和S%均无明显差异;培养24h后,第2、3组G1%开始下降,S%上升较快,第1组的G1%保持较高水平,S%持续较低(P均<0.05)。结论:NO可增强环磷酰胺对L1210细胞的直接损伤作用,促进细胞凋亡,使环磷酰胺对G1期细胞的阻滞作用更敏感、持续时间更长,上述作用可能与Caspase3蛋白的活化有关。
- 姚仁南朱培元张春雷王涛
- 关键词：一氧化氮白血病细胞凋亡CASPASE-3
- 乳腺癌细胞抗原和自身淋巴结树突状细胞对细胞因子诱导的杀伤细胞作用研究被引量：6
- 2002年
- 目的：从乳腺癌患者淋巴结 中分离和定向诱导培养扩增 树突状细胞（ＤＣ），观察其经自身肿瘤细胞抗原冲击后对自身细胞因子诱导的杀伤细胞（ＣＩＫ） 杀伤活性的影响。方法：取手术切除肿瘤周围转移的淋巴结，提取单个核 细 胞，将贴壁生长的细胞用细胞因子基因重组粒巨集落生长因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）、基因重组白介 素４（ｒｈＩＬ－４）、基因重组α－肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α）联合诱导培养ＤＣ，然后用 自身肿瘤细胞抗原冲击ＤＣ并作用ＣＩＫ，最后检测ＣＩＫ杀伤３种靶细胞（自身乳腺癌细胞、Ｋ５６２和 ＳＧＣ－７９０１细胞）的活性。结果：乳腺癌患者转移淋巴结中的贴壁细胞，经 细胞因子联合诱导培养，ＤＣ含量可达１５．３％～３７．０％。经自身肿瘤抗原冲击的淋巴结ＤＣ活化的Ｃ ＩＫ，杀伤自身肿瘤细胞活性达７１．３％，单纯ＣＩＫ为３７．０％，两者比较差异有显著性（Ｐ＜０ ．０１）；而对Ｋ５６２和ＳＧＣ－７９０１细胞杀伤活性无明显差异。结论：肿瘤周围转 移淋巴结贴壁细胞在体外能定向诱导扩增出大量ＤＣ；ＤＣ经自身肿瘤抗原冲击后能明显提高ＣＩ Ｋ对自 身肿瘤细胞的杀伤活性。
- 巩新建刘军权陈复兴张春雷
- 关键词：乳腺肿瘤树状细胞细胞因子协同刺激分子乳腺癌细胞抗原
- NO对白血病L1210细胞的作用及机制研究被引量：1
- 2006年
- 将白血病L 1210细胞随机分为1、2、3、4组,均以2×105/孔浓度加入隔离培养器内培养,1组同时加入pcDNA 3.0-iNO S转染的3T 3细胞,2组加入pcDNA 3.0转染的鼠成纤维3T 3细胞,3组加入未转染的鼠成纤维3T 3细胞,4组加入pcDNA 3.0-iNO S转染的鼠成纤维3T 3细胞及终浓度为100μmm o l/L的DEVD-CHO。各组鼠成纤维3T 3细胞的浓度均为105/孔,37℃,5%CO2,饱和湿度下常规培养。分别于作用后1、2、3d观察各组上清液中NO含量,于12、24、48、72h观察L 1210细胞的受损情况。结果2组活细胞率在24、48h均显著高于1组,P均<0.05;2、3组各时点细胞凋亡率均显著低于1组,P分别<0.01、<0.05。提示NO可直接损伤白血病L 1210细胞,其机制与激活天冬氨酶特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)有关。
- 王涛黄晓静张春雷李轶
- 关键词：一氧化氮白血病细胞凋亡天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3
