张舰
- 作品数：15 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华东理工大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 短链脱氢酶Lvchun的分子改造及其在氯霉胺合成中的应用
- 2023年
- 2-氨基-1-(4-硝基苯基)-1,3-丙二醇俗称氯霉胺(ANP),由于具有两个手性中心,且结构中的O原子和N原子有良好的配位能力,具有广泛的应用价值。针对化学合成法存在生产成本高、原子经济性低、环保压力大等诸多缺点,旨在通过化学水解法与生物催化法相结合的方式,构建以对硝基-α-乙酰氨基-β-羟基苯丙酮(p-NAH)为底物合成(1R)-ANP的新途径。首先采用化学法水解p-NAH制备1-(4-硝基苯基)-2-氨基-3-羟基苯丙酮(AHNA),并筛选对水解产物具有催化活性的羰基还原酶,通过分子改造提高该酶的催化活性,并对突变体mut-V112Y的酶学性质进行研究;然后构建mut-V112Y与甲酸脱氢酶的双酶共表达及融合表达重组菌株,并对重组菌株的催化效率进行比较;最后优化催化反应条件,并进行制备反应。结果表明,化学法可水解p-NAH生成AHNA,筛选到的短链脱氢酶Lvchun可催化AHNA生成(1R)-ANP,通过对该酶进行定点突变获得了催化效率提高3.47倍的突变体mut-V112Y,其最适温度为30℃,最适pH为7.5,具有良好的温度和pH稳定性。成功构建了mut-V112Y和甲酸脱氢酶CbFDH的双酶共表达和融合表达重组菌株,通过比较发现共表达菌株mut-V112Y-CbFDH的催化效率最高。通过优化催化反应条件,最终可在最适条件下反应30 min催化50 mmol/L AHNA生成14.56 mmol/L(1R)-ANP,收率为29.12%。化学水解法与生物催化法相结合的方式可有效地催化p-NAH合成(1R)-ANP,该方法为合成光学纯的ANP提供了新途径。
- 韩惠张舰任宇红
- 关键词：分子改造定点突变甲酸脱氢酶
- 一种白介素融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明提供一种白介素融合蛋白及其制备方法和应用。所述白介素融合蛋白包括：(1)白介素IL‑24；(2)解离素多肽CN；以及(3)位于所述白介素IL‑24和所述解离素多肽CN之间的由0‑20个氨基酸构成的连接肽。本发明首次...
- 孙爱友魏东芝白超刚王晓娟张舰吕欣欣
- 文献传递
- 一种含hok/sok基因的菌株及其制备与应用
- 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是涉及一种含hok/sok基因的菌株及其制备与应用。本发明通过将hok/sok基因片段插入重组蛋白表达载体中，并优化基因插入位点，筛选到在重组大肠杆菌高密度发酵过程中质粒稳定性有显著提高的...
- 张舰魏东芝蒋怀谷陈安祥
- 高纯度白细胞介素-24包涵体的制备方法
- 本发明涉及一种高纯度白细胞介素‑24包涵体的制备方法，包括以下步骤：制备含有白细胞介素‑24基因的重组大肠杆菌；重组大肠杆菌进行发酵培养；发酵培养后得到的菌体进行超声破碎得到包涵体；对包涵体进行洗涤；对洗涤后的包涵体进行...
- 孙爱友魏东芝王学东王晓娟白超刚张舰吕欣欣
- 文献传递
- 重组人白细胞介素24的表达及其抗肿瘤活性研究
- 白细胞介素-24(IL-24)是在用干扰素和密植毒素处理人黑色素瘤细胞时利用差减杂交技术首次发现的。在恶性黑色素瘤中IL-24的表达量减少，在发生转移的黑色素瘤细胞中几乎检测不到IL-24的表达。研究表明，将含有IL-2...
- 张舰
- 关键词：蛋白表达抗肿瘤活性
- 高纯度白细胞介素-24包涵体的制备方法
- 本发明涉及一种高纯度白细胞介素-24包涵体的制备方法，包括以下步骤：制备含有白细胞介素-24基因的重组大肠杆菌；重组大肠杆菌进行发酵培养；发酵培养后得到的菌体进行超声破碎得到包涵体；对包涵体进行洗涤；对洗涤后的包涵体进行...
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- 文献传递
- 根癌农杆菌介导透明颤茵血红蛋白基因(vgb)在短密青霉菌中的克隆表达被引量：2
- 2015年
- 利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗性筛选、PCR分子鉴定和MPA发酵验证等结果表明,vgb基因在短密青霉中成功获得了表达;vgb基因的表达提高了短密青霉的菌体密度,转化子MPA产量达到2.18 g·L?1,比原始菌株提高了27.5%。
- 董玉国王丽华徐瑞张舰孙爱友魏东芝
- 关键词：根癌农杆菌VGB霉酚酸
- TAT-IL-24-KDEL融合蛋白及其制备方法和应用
- 一种TAT-IL-24-KDEL融合蛋白，是指TAT穿膜肽和内质网定位信号肽KDEL分别连接在白细胞介素-24(IL-24)的N端和C端的融合蛋白。其制备步骤包括：PCR扩增获取TAT-IL-24-KDEL编码基因，利用...
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- 文献传递
- 一种白介素融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明提供一种白介素融合蛋白及其制备方法和应用。所述白介素融合蛋白包括：(1)白介素IL-24；(2)解离素多肽CN；以及(3)位于所述白介素IL-24和所述解离素多肽CN之间的由0-20个氨基酸构成的连接肽。本发明首次...
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- 一种SAC-TRAIL融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种SAC‑TRAIL融合蛋白及其制备方法和应用，利用柔性链接(G<Sub>4</Sub>S)<Sub>3</Sub>将抗肿瘤蛋白TRAIL融合到SAC蛋白的C末端，形成所述的SAC‑TRAIL融合蛋白，该融合...
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- 文献传递
