张莹
- 作品数：18 被引量：40H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理更多>>
- 牛乳中乳房链球菌PCR检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- 奶牛乳房炎是危害奶牛业最常见的疾病之一,对奶牛业造成了严重的经济损失。引起奶牛乳房炎的病原菌较多,其中乳房链球菌是常见的致病菌之一。为快速准确地检测样品中的该菌,参照GenBank公布的乳房链球菌pauA基因序列设计引物,建立了乳房链球菌的PCR检测方法。对460份临床奶样进行检测,传统细菌分离方法共检出11份(2.39%)阳性奶样;PCR方法共检出40份(8.70%)阳性奶样,2种方法的吻合率为93.7%。结果显示,建立的乳房链球菌PCR检测法敏感性高,特异性强,适用于临床检测。
- 刁巧虹卞国志王娟罗蔼剑张莹高潇祎贾坤孙凌霜袁建丰
- 关键词：奶牛乳房炎乳房链球菌聚合酶链反应
- 猪源狂犬病病毒N和G基因的序列分析
- 2012年
- 通过对新分离的猪源狂犬病病毒GD-SH01株N基因和G基因进行序列分析,解析它们与其他狂犬病病毒N和G基因的差异.提取猪源狂犬病病毒GD-SH01株的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增N基因和G基因,并与T载体连接,克隆至大肠埃希菌DH5α.测序后与国内外部分毒株的N基因和G基因进行核苷酸序列和氨基酸序列比对.与其他毒株相比,N基因核苷酸相似性为84.3%～98.0%;氨基酸相似性为92.5%～99.3%.G基因核苷酸相似性为80.4%～98.2%;氨基酸相似性为87.8%～99.6%.
- 张莹刘祥茵罗永文杨先峰黄永亮施赫赫傅秋玲阳佑天吴晓薇郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒
- 猪源狂犬病病毒基因序列分析
- 通过对新分离的猪源狂犬病病毒(GD-SH01)全基因进行序列分析，为了解析该毒株的来源及国内其它流行毒株的关系.将来自病猪的脑组织制备成乳液，颅内接种3天龄的乳鼠和6周龄的成鼠.结果显示，该毒株在乳鼠脑内传代5次后，病毒...
- 张莹罗永文刘祥茵杨先峰黄永亮施赫赫傅秋玲阳佑天郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒流行病学全基因组
- 文献传递
- 猪狂犬病的确证
- ＜正＞目的了解广东省某一猪场发生狂犬病猪只的感染状况。方法采集疑似狂犬病发病猪的大脑、小脑以及海马回,制成切片,用姬姆沙染色,在光学显微镜下检测狂犬病病毒包涵体。用抗狂犬病病毒N蛋白荧光抗体染色,在荧光显微镜下检测特异荧...
- 刘祥茵邓衔柏施赫赫范小龙张莹郑声陶郭霄峰
- 关键词：狂犬病包涵体
- 文献传递
- 狂犬病病毒G蛋白的过表达及对病毒的抑制
- 2018年
- 【目的】探究G蛋白在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制中的作用,以揭示携带双G基因的重组RABV的Hep-dG与亲代毒株rHep-Flury在神经母细胞瘤(NA)细胞中滴度差异的原因,为RABV致病机制的研究奠定基础。【方法】通过病毒吸附、入侵、荧光定量PCR、Western-blot以及中和抗体阻断等试验,检测G蛋白过表达对IFN-β以及相关因子转录的影响。【结果】Hep-dG感染能显著上调NA细胞中IFN-βmRNA的表达,激活了下游因子STAT1的表达与磷酸化,在较低的感染复数(MOI=0.01)下,Hep-dG感染后24 h即可显著促进IFN-β基因的表达,36 h达到最高水平(P<0.001)。该病毒进入细胞后,产生了更多的病毒Leader RNA和RIG-I mRNA,且与IFN-βmRNA的表达高度一致。抗体阻断IFN-β后,Hep-dG在NA细胞中的病毒滴度显著上升(P<0.01),约为阻断前的7.9倍,且与亲代毒株rHep-Flury无显著差异。与阴性对照比较,5μg的pH-G质粒转染能刺激IFN-β的转录(P<0.05),表明真核表达RABV G蛋白能在一定程度上刺激IFN-β的转录。【结论】本研究初步揭示了G蛋白激活先天性免疫应答的原因和作用。RABV G蛋白的过表达,通过促进病毒Leader RNA的转录,激活了RIG-I介导的IFN-β通路,进而抑制了Hep-dG在NA细胞的繁殖。G蛋白的过表达也对干扰素通路起到一定的作用。
- 阳佑天张琼张博越刘文俊罗永文赵静梅明珠张莹罗均郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒G蛋白Β干扰素病毒滴度
- 猪源狂犬病病毒N和G基因的序列分析
- 目的：通过对新分离的猪源狂犬病病毒(GD-SH01)N基因和G基因进行序列分析，解析它们与其它狂犬病病毒N和G基因的差异。方法：提取猪源狂犬病病毒(GD—SH01)的总RNA，采用RT-PCR的方法扩增N基因和G基因，并...
- 张莹刘祥茵杨先峰黄永亮施赫赫傅秋玲阳佑天郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒基因克隆
- 广东珠三角地区犬细小病毒分离与鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了解珠三角地区犬细小病毒(CPV)的流行情况及研制有效的疫苗,本研究开展了CPV流行病学调查,并将32份疑似CPV感染犬的粪便样品处理后接种F81细胞进行病毒分离,并对分离株进行鉴定。鉴定结果显示:32份样品中有19份样品提取液在F81细胞上可以产生明显的细胞病变;HA效价可达到1∶256。回归动物试验显示分离株可以导致犬出现明显的CPV感染症状,PCR鉴定也进一步确定所分离的病毒为CPV。通过VP2基因同源性分析显示分离株与国内主要的流行基因亚型CPV-2a的同源性达98%以上。
- 黄永亮施赫赫冯顺意王怡飞米政实刘慧思徐晓娟张莹吴晓薇牛学锋郭霄峰
- 关键词：犬细小病毒
- 狂犬病基因工程灭活疫苗（Hep-Flury-dG株）的免疫效力
- ＜正＞目的为了检测狂犬病基因工程灭活疫苗（Hep-Flury-dG株）注射犬只后的免疫效力。方法在广州市增城区某村进行狂犬病基因工程灭活疫苗（Hep-Flury-dG株）环境释放试验,登记该村所有家养犬的信息并存档,同时...
- 施赫赫宋伟科黄永亮刘祥茵代元元傅秋玲张莹林颖仪阳佑天徐晓娟王怡飞郭霄峰
- 关键词：狂犬病基因工程疫苗免疫效力
- 文献传递
- 猪狂犬病的确证被引量：1
- 2012年
- 目的了解广东省一猪场发生狂犬病猪只的感染状况。方法采集疑似狂犬病发病猪的大脑、小脑以及海马回,制成切片,用姬姆沙染色,在光学显微镜下检测狂犬病病毒包涵体。用抗狂犬病病毒N蛋白荧光抗体染色,在荧光显微镜下检测特异荧光。用蛋白酶K处理病料,抽提核酸,以狂犬病病毒N基因特异引物作RT-PCR检测狂犬病病毒特异性核酸。将病料接种小白鼠接毒,观察小鼠的发病。结果病理学切片检测病猪脑海马神经细胞中有包涵体;脑组织印片经特异性抗狂犬病病毒核蛋白(NP)单克隆抗体免疫荧光染色后,荧光显微镜下可见大量的针尖状绿色荧光颗粒;狂犬病病毒NP特异性目的基因RT-PCR得到与预期结果大小一致的扩增产物;小白鼠接毒试验,3日龄以内乳鼠接毒后出现特异性的神经症状。结论该猪场病死猪检测狂犬病病毒感染阳性,确定猪群中发生狂犬病。
- 刘祥茵邓衔柏施赫赫范小龙张莹郑声陶郭霄峰
- 关键词：狂犬病包涵体
- 马红球菌菌落印迹检测方法的建立被引量：1
- 2017年
- 为建立快速检测环境中马红球菌(R.equi)的方法,本研究以非致病性R.equi ATCC6939以及致病性R.equi毒力相关脂蛋白A(Vap A)分别免疫家兔,制备了兔抗非致病性R.equi多抗与兔抗致病性R.equi Vap A蛋白多抗,并以其作为检测抗体,通过优化反应条件,建立了R.equi菌落印迹检测方法。结果显示该方法可特异性检测R.equi并可区分致病性与非致病性R.equi;其R.equi检测敏感性高,特异性强,均明显优于R.equi的PCR鉴定法。利用本研究建立的方法对全国部分地区马场土壤样本的初步调查表明R.equi在部分地区马场土壤中普遍存在,然而未检测到致病性R.equi。本实验建立的检测方法可应用于我国马场环境中R.equi的流行病学调查,为我国马病防控平台提供有力的技术支持,并为中国现代育马场的建设提供必要的参考。
- 龚凤平张莹罗蔼剑张西君白洁吴腾鱼海琼孙凌霜
- 关键词：马红球菌土壤
