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排序方式：

茶愈伤组织实时定量PCR分析中内参基因的选取被引量：2: 2014年; 为了选取合适的内参基因来分析培养基中前体物诱导及对照的茶愈伤组织中茶氨酸代谢相关基因的差异表达,利用Gen Bank上登录的茶树基因序列以及通过构建文库测序所得的基因(具有完整的阅读框)共7个持家基因设计引物。在分析这些引物的扩增效率和特异性后,测定了它们在茶愈伤组织生长过程中(对照和愈伤培养基中添加含氮外源物的情况下)的表达水平。利用ge Norm和Norm Finder软件分析了这些持家基因的稳定性,确定在该条件下合适的内参基因为β-actin和GAPDH。; 史成颖李正国徐乾宛晓春; 关键词：实时定量PCR 内参基因基因表达茶树

培养基中添加相关外源物对茶氨酸生物合成的影响被引量：2: 2011年; 以龙井43的嫩叶等为材料,考察在培养基中添加茶氨酸合成前体物、代谢中间物及NO供体硝普钠对愈伤组织中茶氨酸含量的影响,并研究水培苗中添加一定浓度的硫酸铵对茶氨酸含量的影响。结果表明：培养基中添加25 mmol/L的盐酸乙胺可促进茶氨酸的合成,特别是在培养的第6-12天,愈伤组织中茶氨酸的含量增加明显,培养至第12天时,茶氨酸的含量最高,为108.96μmol/g（以干质量计）,是对照的7.72倍;培养基中分别添加低浓度的谷氨酰胺、丙氨酸及谷氨酸钠可在一定程度上提高愈伤组织中的茶氨酸含量,其中添加5 mmol/L的谷氨酰胺时增加最为明显,茶氨酸含量是对照的近7倍;培养基中添加0.05或0.075 mmol/L的硝普钠时,茶氨酸的含量有所增加,但总体水平较低。水培苗营养液中添加硫酸铵至100 mg/L时,茶苗培养3 d时的茶氨酸含量是对照的2.25倍。; 史成颖徐乾金璐杨华张正竹宛晓春; 关键词：茶氨酸愈伤组织前体物硝普钠水培

祁门红茶自动化、智能化加工关键技术研发与应用: 夏涛宁井铭彭学权李尚庆陆国富方世辉张正竹戴前颖李叶云徐乾谢永中李立祥孙长应; 为改变“祁门红茶”加工机械化、自动化程度较低，加工装备滞后于产业发展的局面，结合市场产品发展需求。安徽农业大学与安徽省祁门县祁红茶业有限公司联合攻关，项目组对“祁门红茶”自动化加工工艺及关键装备进行了技术研究，通过3年的...; 关键词：; 关键词：祁门红茶自动化智能化

茶树谷氨酰胺合成酶同源基因的克隆及表达分析被引量：3: 2017年; 在实验室前期构建cDNA幼根文库获得谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS,EC 6.3.1.2)同源序列(contig48)的基础上设计引物,通过SMART RACE技术克隆了该基因cDNA全长序列(命名为GS1-2,GenBank登录号:JQ925873.1)。结果显示:(1)GS1-2基因全长为1 710bp,开放阅读框长1 071bp,编码356个氨基酸,预测蛋白分子质量为39.3kD,理论等电点为5.65;核酸序列分析表明,GS1-2基因与从安吉白茶中克隆的茶氨酸合成酶基因相似性为99%。(2)将GS1-2基因克隆至原核表达载体pET-32a和pMAL-c5x,转化至大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE检测结果表明,pET-32a-CsGS1-2转至Rosetta中诱导表达的蛋白与预测蛋白大小一致,主要以包涵体形式存在;而pMAL-c5x-CsGS1-2转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达可产生可溶性蛋白。(3)进一步构建茶树GS1-2酵母表达载体pYES-DEST52-CsGS1-2并转化至酿酒酵母(WAT11)菌液中,添加底物(谷氨酸钠100μmol/L和盐酸乙胺500μmol/L)震荡培养并离心,UPLC-MS测定酶反应产物结果初步表明,目的蛋白不能催化盐酸乙胺和谷氨酸钠合成茶氨酸,但可以合成谷氨酰胺。; 史成颖李正国徐乾李海婧汤之近邓威威宛晓春; 关键词：茶树谷氨酰胺茶氨酸酵母表达

茶树中与氨基酸合成相关的三个基因的克隆与分析: 在构建茶树幼根cDNA文库获得相关EST序列的基础上，通过SMARTRACEPCR技术获得了茶树中谷氨酰胺合成酶(Glutaminesynthetase，GS1-1、GS1-2)及精氨酸脱羧酶(Argininedecar...; 徐乾; 关键词：茶树谷氨酰胺合成酶全长CDNA克隆原核表达; 文献传递

祁门红茶自动化、智能化初制关键技术研发与应用: 夏涛宁井铭彭学权李尚庆陆国富方世辉张正竹戴前颖李叶云徐乾谢永中李立祥孙长应; 该项目研发的双槽斜型运行、动态连续萎凋，分段式自动投叶、自动加压揉捻，两段式变温、动态发酵、自动控制温湿度等自动化、智能化祁门红茶初制关键技术及设备，解决了祁门红茶传统加工中萎凋不均、发酵不匀、用工量大的问题，有利于保证...; 关键词：; 关键词：祁门红茶自动化智能化

一种茶氨酸合成酶基因及其制备茶氨酸的方法: 本发明公开了一种茶氨酸合成酶基因及其制备茶氨酸的方法，所述合成酶的基因cDNA全长为2886bp，阅读框长度为2532bp，所述基因cDNA序列如SEQ ID No.1所示。该茶氨酸合成酶基因可用于合成制备茶氨酸。具体方...; 宛晓春史成颖李正国徐乾李海婧佘广彪方从兵孙俊陈琪张正竹杨华; 文献传递

茶树中精氨酸脱羧酶基因的cDNA克隆及序列分析被引量：2: 2013年; 通过SMARTRACE PCR技术获得了茶树中精氨酸脱羧酶(ADC)的cDNA全长序列,并登录GenBank(登录号为JQ653274)。ADC基因cDNA全长为2 988 bp,开放阅读框(ORF)全长为2 163 bp,共编码720个氨基酸,编码的蛋白质的分子量为77.430 kDa,理论等电点为5.373,其序列中不存在卷曲螺旋结构。ADC蛋白为亲水性非分泌不稳定蛋白,不跨膜运动,无信号肽序列存在,共有41个可能的磷酸化位点,存在于叶绿体基质中,是细胞质蛋白。精氨酸脱羧酶的基因cDNA全长序列的获得,对于进一步研究精氨酸在茶树氮代谢中的作用及茶氨酸代谢途径提供基础。; 徐乾史成颖宛晓春汤志近; 关键词：全长CDNA 基因克隆

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徐乾