戴晓莉
- 作品数：9 被引量：36H指数：3
- 供职机构：江苏大学更多>>
- 发文基金：镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省社会发展科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人外周血CD8^+T细胞Runx3的基因克隆及其原核表达被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆人Runx3基因全长编码区的cDNA,进行鉴定和测序分析,并利用载体pQE30在大肠埃希菌(M15)原核表达人Runx3基因全长序列,为从转录水平探讨Runx3基因与免疫相关性疾病以及肿瘤发生发展的关系奠定基础。方法:MACS分离外周CD8+T细胞;采用RT-PCR方法从人外周血CD8+T细胞获得Runx3基因的cDNA,并连接pMD19-T载体导入大肠埃希菌DH5α,选择阳性克隆,应用M13F/R通用引物进行双向反应测序,以作序列鉴定。利用PCR技术从克隆载体pMD19-T/Runx3获得人Runx3的全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pQE30,形成重组表达质粒pQE30/Runx3;酶切鉴定挑选阳性重组质粒转化大肠埃希菌M15,测序鉴定后经IPTG30℃诱导4h,SDS-PAGE电泳判断以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白并进行Western blot鉴定。结果:扩增获得的Runx3基因CDS区全长1248bp,编码415个氨基酸残基,与GenBank中发表的序列完全一致。成功构建了原核表达载体pQE30/Runx3,并在工程菌M15中获得大量表达.结论:获得了人Runx3基因的克隆,并成功原核表达和制备出人Runx3融合蛋白。
- 李雅贞王胜军石燕戴晓莉彭素芳苏兆亮邵启祥许化溪
- 关键词：RUNX3基因CDNA克隆原核表达
- H2.0样同源盒基因研究进展被引量：1
- 2008年
- H2.0样同源盒基因(Hlx)作为同源盒基因家族成员之一,结构上高度保守,参与造血祖细胞的增殖、分化和成熟,并参与免疫应答的调节,是 T-bet 的靶基因和调节基因,与多种造血系统疾病、胚胎发育异常性疾病等有关。
- 戴晓莉许化溪
- 关键词：造血系统胚胎发育
- 人脐血单个核细胞H1x基因的克隆、表达及其融合蛋白的免疫原性分析
- 1991年,Allen等人[1]从鼠前B细胞中分离得到一种新型同源盒基因(homeobox genes,HOX),该基因和果蝇的同源盒基因H2.0高度类似,被命名为H2.0样实框(H2.0-likehomeobox ge...
- 戴晓莉王胜军苏兆亮彭素芳李雅贞薛渊何志强陈建国邵启祥黄新祥许化溪
- 文献传递
- 胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子与相关细胞因子的检测及临床意义被引量：24
- 2010年
- 目的了解胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的转录因子及其相关细胞因子的表达水平，探讨其在胃癌发展进程中的作用。方法收集57例胃癌患者、31例胃部良性疾病患者和40例健康志愿者的外周血，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）技术，检测外周血单个核细胞中Th17和Treg细胞的特异性转录冈子RORγt和FoxP3mRNA的表达水平；采用酶联免疫吸附试验（ELISA），检测胃癌患者血浆中IL一17、IL-23、转化生长因子β（TGF一β）和IL一10的浓度。结果胃癌组FoxP3和RORγt／tmRNA的表达水平分别为2．349±0．491和0．794±0．304，明显高于健康对照组和良性疾病组（均P〈0．05），FoxP3／RORγt比值也高于健康对照组和良性疾病组（P〈0．05），而良性疾病组与健康射照组差异无统计学意义（P〉0．05）。中晚期胃癌组的FoxP3／RORγ／t比值明显高于早期胃癌组（P〈0．05）。胃癌组血浆中IL一17、IL一23、TGF一β和IL一10的水平明显高于健康对照组（P〈0．05），中晚期胃癌组TGF一β和IL一10水平明显高于早期胃癌组（P〈0．05）。结论胃癌患者存在高Th17和Treg细胞水平，且随着病程的进展Treg细胞仍维持强势，FoxP3／RORγt比值明显增高。监测胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子和相关细胞因子水平，有助于对病程的判断。
- 彭素芳王胜军陈建国戴晓莉石燕李雅贞苏兆亮薛渊何志强黄新祥许化溪
- 关键词：RORΓTFOXP3TREG细胞
- 人脐血单个核细胞Hlx基因的克隆、表达及其融合蛋白的免疫原性分析
- 2009年
- 目的克隆人Hlx基因全长编码区,利用载体pQE30在大肠埃希菌M15中原核表达人Hlx基因,对表达产物进行纯化、免疫动物和制备多克隆抗体。方法利用RT-PCR技术从人脐血单个核细胞中克隆出Hlx基因,构建重组表达质粒pQE30/Hlx,并于大肠埃希菌M15中表达,经Western blot判断,以可溶形式存在带6×His标签的融合蛋白,用Ni2+-MAC层析柱对其进行纯化;将纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。结果成功克隆人Hlx基因编码区全长,包含1467bp,编码488个氨基酸残基。获得人Hlx融合蛋白和多克隆抗体,ELISA和Western blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性。结论成功构建了原核表达质粒pQE30/Hlx,经纯化获Hlx蛋白,制备了效价和特异性良好的多克隆抗体,为进一步研究人Hlx的生物学功能奠定了基础。
- 戴晓莉王胜军苏兆亮彭素芳李雅贞薛渊何志强陈建国邵启祥黄新祥许化溪
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- Ⅰ类整合子在多重耐药铜绿假单胞菌中的分布与结构分析被引量：4
- 2008年
- 目的了解分离于镇江地区的铜绿假单胞菌对13种常用抗生素的耐药率；明确Ⅰ类整合子基因盒结构及其在耐药基因播散中的作用。方法采用K-B纸片法检测71株铜绿假单胞菌的耐药率；煮沸法提取71株铜绿假单胞菌基因组DNA；PCR扩增Ⅰ类整合子基因，并通过测序分析其所携带耐药基因盒。结果71株铜绿假单胞菌对临床常用的13种抗生素的耐药率在18．3％-77．5％不等；Ⅰ类整合子检出率为38％，包括aadB、aae（6’）-Ⅱ、PSE-Ⅰ、dfrAl7和aadA5 5种基因盒，其中最常见者为dfrAl7和aadA5。Ⅰ类整合子阳性菌株对哌拉西林、哌拉西林／他唑巴坦、头孢曲松、头孢吡肟、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、左氧氟沙星、环丙沙星等10种抗生素的耐药率明显高于整合子阴性菌株。结论不同铜绿假单胞菌临床株对13种常用抗生素的耐药率各不相同，整合子阳性菌株耐药率明显高于整合子阴性菌株，提示Ⅰ类整合子是铜绿假单胞菌多重耐药的重要因素。
- 陈建国戴晓莉蒋玉凤柳迎昭虞建人苏兆亮黄新祥张驰宇王胜军邵启祥邵世和许化溪
- 关键词：假单胞菌铜绿抗药性整合子类
- 临床分离的革兰阴性菌3类整合酶基因的筛查与Ⅰ类整合子结构分析被引量：2
- 2009年
- 目的调查镇江地区临床分离的革兰阴性菌3类整合酶基因的检出情况,分析I类整合子-基因盒结构特征。方法对临床收集的细菌采用PCR方法、T-A克隆以及基因测序技术对3类整合酶基因以及I类整合子的结构进行分析。结果296株革兰阴性肠杆菌科细菌和不发酵糖菌中I类整合酶基因的检出率最高为43.2%。其中在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌中的检出率分别为61.0%、14.3%、37.3%和20.0%,而Ⅱ、Ⅲ类基因的检出率较低。对I类整合子基因盒结构分析发现共检测到5种不同基因盒,分别为:dfrA17、aadA5、aadA1、aadA2、dhrfⅪ,有4种不同的基因盒排列方式。结论镇江地区临床分离的细菌I类整合子-基因盒检出率较高。
- 戴晓莉苏兆亮陈建国彭素芳李雅贞许化溪
- 关键词：整合子基因盒革兰阴性菌
- 铜绿假单胞菌B细胞表位-MyD88表达质粒的构建及其相关研究
- 2009年
- 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）外膜蛋白F（OprF）的主动免疫能诱发机体产生特异性体液免疫应答，发挥局部保护作用。然而OprF的完整蛋白对机体具有潜在的危害性。现有研究表明OprF蛋白含有大量的B细胞表位，因此，应用OprF优势抗原表位设计的疫苗，既能诱导机体产生抗Pa的中和抗体，又能克服非抗原决定簇成分潜在的毒副作用。考虑到表位蛋白的免疫原性较弱，不足以引发良好的免疫应答，
- 陈建国王胜军柳迎昭苏兆亮李雅贞戴晓莉彭素芳邵启祥许化溪
- 关键词：铜绿假单胞菌B细胞表位表达质粒体液免疫应答抗原决定簇主动免疫
