敖艳华
- 作品数：12 被引量：44H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅源禽副黏病毒感染特性的研究被引量：1
- 2006年
- 从患病鹅群中分离到一株禽副黏病毒,编号为2/GD/05/Go,简写为GPMV-2/05。经纯化后发现该病毒在透射电镜下呈圆形、大小比较均一,表面有纤突,对氯仿和酸敏感,不耐热,在中性和碱性溶液中比较稳定。血清学试验结果表明该病毒具有血凝活性,且能被鸡新城疫病毒(NDV)Ⅰ系、Ⅳ系抗血清部分抑制,但与禽流感、小鹅瘟等病毒无交叉反应。人工感染结果显示,新分离到的病毒对1、14、28、48日龄的鹅均有很强的致病性,尤以30日龄内最为严重,死亡率高达100%;经口服、点眼滴鼻、肌注、皮下注射等途径均能感染鹅,并且临床症状和死亡率与自然感染病例相似。该病毒对鸡也有很高的致病性和致死率,但用NDV强毒攻毒的鹅并不发病。通过免疫保护试验发现,GPMV-2/05与NDVⅠ系、Ⅳ系及强毒F48E9有部分免疫原性交叉。血清学、电镜观察、理化鉴定、病理组织学观察、免疫保护试验、RT-PCR鉴定以及致病性指数的测定等结果均表明该病毒是一株对鹅具有高致病力的禽副黏病毒。
- 任涛孔令辰敖艳华陈金顶陈勇文郑煦灿廖明
- H7亚型禽流感RT-PCR诊断方法的建立被引量：1
- 2007年
- 参照GenBank中已发表的H7亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因设计合成了一对预计扩增片段大小约为310bp的引物。利用这对引物,通过对RT-PCR反应体系和反应条件的优化,建立了针对H7亚型禽流感的RT-PCR检测方法。敏感性试验和特异性试验结果表明,该方法敏感性高,最低可检出100pg的AIV-H7的mRNA,且应用该引物对新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)及其他亚型的流感病毒(H1、H3、H5、H9)在相同反应条件下未扩增出任何片段,具有较好的特异性。用所建立RT-PCR方法检测发病鸡组织病料及咽、肛拭子,检测结果与鸡胚病毒分离结果相比,阳性符合率高达90.6%。
- 徐珊张停婷陈梓栋敖艳华邱筱妍任涛辛朝安
- 关键词：H7亚型禽流感病毒
- 应用环介导逆转录等温扩增技术快速检测新城疫病毒被引量：10
- 2008年
- 参考新城疫病毒融合基因(fusion gene,F gene)序列,设计了2对能够特异性地识别F基因上的6个区域的引物,并以此建立了一种简单、快速、有效的环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)方法检测NDV.试验结果表明:该方法用时短(2 h内完成)、特异性好而且灵敏度高,最小检测限可达100 pg;对人工发病样品进行鸡胚分离和RT-LAMP检测,二者的阳性符合率高达93.5%;同时采用镁离子沉淀对检测结果进行可视化处理,方便利用肉眼直接观察.
- 孔令辰侯佳蕾蒋文泓聂飞敖艳华廖明任涛
- 关键词：新城疫病毒
- 鸡γ-干扰素基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2006年
- 为了研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因的功能并进一步探究其在控制家禽传染病方面的应用,根据GenBank已发表的ChIFN-γcDNA基因序列自行设计引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从伴刀豆球蛋白A(Co-nA)刺激培养鸡脾淋巴细胞中提取的总RNA中扩增得到ChIFN-γ,然后连接到pMD18-T载体上并转化到Top10感受态细胞中,获得阳性重组质粒并进行正确性序列测序.核甘酸序列结果表明,试验得到了长为513 bp的ChIFN-γ基因,与原鸡(Gu llus)IFN-γ的同源性可高达100%,其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸,推测其成熟蛋白的相对分子质量约为18 000.
- 敖艳华任涛孔令辰
- 关键词：克隆
- H5和H7亚型禽流感多重RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立被引量：3
- 2007年
- 目前，国家标准及农业行业标准规定禽流感诊断及检验技术包括：病毒分离、免疫荧光、血凝抑制、琼脂扩散和RT—PCR等。其中RT—PCR技术具有敏感、特异、快速并且散毒的危险较小的优点，成为当前诊断禽流感的主要方法之一。本文建立了H5和H7亚型AIV的多重RT—PCR检测方法，并通过条件优化，提高诊断的敏感性和特异性，为H5和H7亚型AIV多重RT—PCR快速诊断试剂盒的研制打下坚实基础，希望能在禽流感的快速鉴别诊断和预警预报工作中发挥重要作用。
- 敖艳华邱筱妍任涛辛朝安
- 关键词：PCR技术H7亚型禽流感PCR检测方法
- 几株野生鸟类来源的Ⅰ型禽副粘病毒分子生物学特征的研究被引量：3
- 2008年
- 参考GenBank中Ⅰ型禽副粘病毒（Avian paramyxovirus,APMV-1）序列,在F基因的3’端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近两年来从广州和深圳两个地区分离的4种动物来源共10株Ⅰ型禽副粘病毒毒株的F基因进行扩增,其扩增长度约为450bp。测序结果表明：广州株与NDV的基因Ⅵ型有高度的同源性,1个深圳株与Ⅶ型有较高的同源性,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112-117）强毒株的氨基酸序列特征;其他4个深圳株均与基因Ⅰ型有很高的同源性,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112-117）弱毒株的氨基酸序列特征。
- 刘海霞敖艳华
- 关键词：F基因基因型
- NDV F蛋白多表位片段的表达及其免疫活性的研究
- 本研究对华南农业大学禽病学教研室分离并保存的NDV分离株35/GD/05/Ch的主要生物学特性进行了研究。毒力鉴定结果显示，该毒株的鸡胚平均致死时间(MDT)为57h，脑内接种指数(ICPI)为1.788，静脉接种指数(...
- 敖艳华
- 关键词：NDVF蛋白免疫活性基因分型同源性分析
- 文献传递
- 新城疫病毒F蛋白免疫活性片段的原核表达被引量：4
- 2008年
- 利用已构建的新城疫病毒F基因重组质粒,通过氨基酸序列分析和InsightⅡ基因工作站的MODELER程序和同源模建技术,预测了试验株F蛋白的表面抗原分布位置。设计引物扩增了2段含有多个抗原位点的多肽片段,通过双酶切定向克隆到原核表达载体pET32a,获得了重组质粒pET32a-F1和pET32a-F2以及2个片段串联起来后克隆的重组质粒pET32a-F3。重组质粒经诱导表达并取产物进行分析,结果显示,F1、F2、F3片段均获得了融合表达。Western-blotting证实,表达产物F1、F2和F3与NDV阳性血清均具有免疫反应性。用表达的重组蛋白加免疫佐剂经皮下接种免疫鸡,免疫2次后产生较高的抗体水平,用100 LD50的超强毒株GD-05-2攻击,重组蛋白免疫组鸡可达到约70%的保护率,并可显著抑制排毒。
- 敖艳华陈晓春廖明蒋文泓聂飞任涛
- 关键词：新城疫病毒F蛋白抗原表位原核表达
- 用ELISA方法进行猪圆环病毒病血清学调查被引量：13
- 2003年
- 本研究用猪2型圆环病毒ORF2基因的表达产物包被酶标板,建立ELISA诊断方法,用此方法对临床1257份送检血清进行了检测,其总阳性率为57.28％(720/1257),仔猪阳性率为30.83％(119/386),肥猪阳性率为64.93％(137/211),母猪阳性率为71.50％(419/586),公猪阳性率为70.27％(52/74)。这一结果表明猪圆环病毒在我国流行较普遍,且抗体阳性率随猪体年龄的增长而升高。
- 琚春梅陈焕春刘正飞曹胜波何启盖敖艳华
- 关键词：圆环病毒病ELISA方法血清学酶联免疫吸附试验
- 几株野生鸟类来源的Ⅰ型禽副粘病毒分子生物学特征的研究
- 本研究参考GenBank中的Ⅰ型禽副粘病毒(Avian paramyxovirus,APMV-1)序列,在F基因的3端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近两年来从广州和深圳两个...
- 敖艳华任涛孔令辰
- 关键词：F基因基因型分子生物学
- 文献传递
