李启明
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鼠疫菌V抗原基因在大肠杆菌中的克隆及表达被引量：5
- 2003年
- 从鼠疫杆菌野毒株总DNA中利用PCR方法扩增出V抗原编码基因 ,将此基因克隆到大肠杆菌的表达质粒pET 42b( + )中 ,经IPTG诱导后 ,在大肠杆菌BL2 1 (DE3)细胞中成功地表达出鼠疫菌V抗原蛋白。目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 32 8%。
- 傅林锋王秉翔李启明雷清蒋琳沈心亮
- 关键词：鼠疫菌大肠杆菌克隆
- 戊型肝炎病毒开读框架3的分子生物学特性及研究进展被引量：3
- 2002年
- 结合近年来在HEV病毒ORF3基因片断方面的研究成果 ,详细论述了ORF3的分子生物学特性 ,编码蛋白的生物学功能和它在戊型肝炎的诊断与预防中发挥的作用。对来自不同实验室的科研数据进行了综合分析及科学推论 。
- 李启明沈心亮
- 关键词：戊型肝炎病毒分子生物学特性戊肝病毒
- 戊型肝炎病毒基因片段开读框架3(369bp)的克隆载体及真核表达载体的构建被引量：3
- 2002年
- 通过聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,以戊肝病毒cDNA为模板将开读框架 3的基因片段扩增并克隆入载体pUC18中。再对扩增片段进行酶切鉴定及测序 ,结果表明此片段与膜板序列的同源性达到 99%以上。将此片段克隆后通过一系列分子生物学技术装入真核胞内表达载体PPIC3及分泌性载体PPIC9中 ,并对载体进行酶切鉴定证实外源基因插入的正确性。
- 李启明沈心亮蒋琳张春江
- 关键词：戊型肝炎病毒基因片段克隆载体真核表达载体
- 戊型肝炎病毒基因ORF3编码蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：4
- 2003年
- 实验以两种不同的表达策略构建了两个以大肠杆菌DE3为宿主的原核表达载体 ,由T7启动子启动外源基因的转录 ,在诱导剂IPTG诱导下成功地进行了戊肝病毒ORF3蛋白的原核表达。并通过SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、竞争抑制法酶联免疫等一系列实验对两种表达产物进行了鉴定和分析。综合分析两种表达结果发现 ,在融合型表达中ORF3蛋白与其融合标签蛋白 (谷胱甘肽S一转移酶 )之间存在免疫交叉反应 。
- 李启明沈心亮蒋琳雷清刘鹏
- 关键词：戊型肝炎病毒融合蛋白
- 人巨细胞病毒磷蛋白65及糖蛋白B在大肠杆菌中的高效表达、免疫原性研究及初步应用
- 2006年
- 实验成功的构建了含有pp65与gB主要抗原决定簇基因的表达质粒pET-pp65、pET-gB;表达产物通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、间接酶联免疫等一系列鉴定试验进行了分析。表达蛋白经初步纯化后免疫BALB/c小鼠,经0、2、4周免疫三次,免疫后2、4、6周眼眶采血收集抗血清,进行中和试验和ELISA检测。动物试验表明两种表达蛋白具有免疫原性,并可在小鼠体内诱导产生特异性抗体,其中用重组gB蛋白免疫小鼠后得到的抗血清在体外试验中能抑制天然病毒感染细胞。同时将这两种表达蛋白作为诊断用抗原,对临床94份血清进行检测,证实pp65具有较好的特异性,为今后研制HCMV诊断试剂提供了科学依据。
- 蒋韬谢溱蒋琳雷清李启明马亚茹蒋烈沈心亮
- 关键词：免疫原性
