李宁
- 作品数：95 被引量：201H指数：8
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 两种定量检测hTPOAb和hTGAb ELISA的建立及应用
- 目的:分别以重组人甲状腺过氧化物酶(hTPO)和从组织提取的人甲状腺球蛋白(hTG)为抗原,建立定量检测hTPOAb和hTGAb的ELISA试剂盒,检测临床血样,为诊断
- 柴锦燕方佩华李宁董升
- 文献传递
- 年龄及甲状腺球蛋白抗体阳性水平对分化型甲状腺癌预后的影响被引量：8
- 2021年
- 目的在不同年龄段甲状腺球蛋白抗体(TgAb)阳性的分化型甲状腺癌(differentiated thyroid cancer,DTC)患者中,探讨经手术及131I治疗后的预后影响因素及TgAb水平及变化趋势等在DTC患者预后及随访中的价值。方法回顾性分析131例TgAb阳性的DTC患者临床资料,按照年龄分为年轻组(年龄<55岁,95例)与年长组(年龄≥55岁,36例),根据疗效评价分为疗效满意组(110例)和疗效不满意组(21例),采用χ2检验、t检验等比较不同组别间临床病理特征。通过logistic回归分析影响患者预后的独立危险因素。通过受试者工作特征曲线确定诊断DTC患者持续或复发的TgAb界值,以Kaplan-Meier回归曲线分析TgAb转阴时间。P<0.05为差异有统计学意义。结果在年轻组患者中,131I治疗前血清TgAb水平高及肿瘤合并颈侧区淋巴结转移是患者预后差的独立影响因素[OR=0.89(95%CI 0.83~0.95),OR=0.15(95%CI 0.05~0.52);均P<0.05],而年长组患者肿瘤腺外侵犯以及131I治疗前血清TgAb越高则患者预后越差[OR=0.05(95%CI 0~0.83),OR=0.91(95%CI 0.76~1.13);P<0.05]。预测DTC持续或复发的血清TgAb界值为315.5 IU/mL(年轻组为246.0 IU/mL,年长组为516.5 IU/mL)。所有患者血清TgAb平均转阴时间为(26.37±2.22)个月[年轻组为(23.28±2.37)个月,年长组为(32.64±4.07)个月],首次131I治疗后1年TgAb下降率>50%的患者发生疾病持续或复发的概率均低于未下降组(P<0.05)。结论在年轻组患者中131I治疗前血清TgAb水平高及合并颈侧区淋巴结转移是患者预后差的独立影响因素,而年长组肿瘤腺外侵犯以及131I治疗前血清TgAb越高患者预后越差,131I治疗后1年内TgAb的变化率可能可以作为预测TgAb阳性患者疾病状态的早期标志物。
- 孙丹阳孟召伟孟召伟谭建李宁贾强王任飞钱玉梅何雅静
- 关键词：分化型甲状腺癌甲状腺球蛋白抗体年龄预后
- 以重组sICAM-1 I～Ⅲ功能区蛋白作抗原制备抗体建立人血清sICAM-1 RIA
- 2004年
- 目的 :探讨用重组可溶性细胞间黏附分子 -1(sICAM -1)I～Ⅲ功能区蛋白免疫家兔制备抗体 ,及用其建立人血清sICAM -1放免方法 (RIA)。方法 :对获得的抗体和建立的RIA方法学进行鉴定。测定214例正常人和38例初诊Grave's病 (GD)患者的sICAM -1。结果 :抗体的亲和常数为1 056×108L/mol ,最终稀释度为1∶14000。灵敏度为1 4μg/L ;非特异结合<5.0 % ;批内变异<5 % ,批间变异<8 % ;样品平均回收率为102 52 % ;平行实验的稀释曲线与标准曲线基本平行 ,参考值范围 (x±2s)为 (175 15±66 88) μg/L ,各年龄、性别组间差别无统计学意义(P>0.05) ,初诊GD患者血清sICAM -1显著高于对照组(P<0.01)。结论 :成功制备出抗体 ,用其建立了人血清sICAM -1RIA 。
- 孟召伟方佩华李宁吕枚
- 关键词：SICAM-1RIA人血清初诊功能区
- hTSHR膜外区氨基端基因原核表达载体的构建和鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的:为研究人促甲状腺素受体膜外区氨基端(hTSHR462bp)肽段的免疫学特性,将hTSHR462bpcDNA片段在原核表达系统中表达,故构建原核表达载体。方法:以人Graves病患者甲状腺组织中提取mRNA为模板,利用RT-PCR方法扩增双链甲状腺组织cDNA,又以PCR技术扩增目的基因,定向克隆法构建融合基因的原核表达载体pET102-hTSHR462bp。结果:获得了重组目的基因原核表达载体并经PCR鉴定、酶切鉴定插入片段方向、大小正确,DNA测序分析表明插入处接头和读框与预期序列相符。结论:成功构建了融合基因的原核表达载体pET102-hTSHR462bp,为进一步的蛋白表达、其生物学功能研究和未来临床应用奠定了基础。
- 陈慧方佩华陆凤先李宁吕枚许静
- 关键词：基因克隆测序
- 构建多功能外泌体用于治疗未分化甲状腺癌被引量：1
- 2022年
- 目的观察131I标记、内化精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(iRGD)靶向的多功能外泌体(iRGD-Exo-131I)对未分化甲状腺癌(ATC)细胞的杀伤作用。方法蛋白印迹检测Hth7、Cal-62(购自上海生命科学院细胞所)两种ATC细胞中整合素αvβ3的表达;设计包含酪氨酸、iRGD肽段及外泌体膜蛋白(Lamp2b)基因的质粒,将其转染HEK-293T(天津医科大学肿瘤医院)细胞后利用超高速离心法得到靶向外泌体(iRGD-Exo);共聚焦显微镜观察Hth7细胞对靶向及无靶向外泌体的摄取情况;氯胺T法制备iRGD-Exo-131I;细胞毒性实验验证iRGD-Exo的细胞安全性,并比较131I标记的靶向及无靶向外泌体对Hth7细胞的毒性;构建Hth 7荷瘤鼠模型,当瘤体直径约8 mm时按随机数字表法分为4组(每组5只),分别尾静脉注射磷酸盐缓冲液、无靶向外泌体(blank-Exos)、blank-Exos-131I或iRGD-Exos-131I溶液,在注射后不同时间点(0、3、6、9、12、15、18 d)记录瘤体体积及荷瘤鼠体重。采用两样本t检验、单因素方差分析统计数据。结果整合素αvβ3在Hth7、Cal-62细胞中明显高表达。共聚焦实验显示外泌体经iRGD修饰后可增强Hth7细胞对其的摄取能力。iRGD-Exo-131I的标记率为(50.16±4.21)%,放化纯>95%。共孵育48 h后,131I标记的靶向与无靶向外泌体组Hth7细胞存活率均显著低于游离Na131I组[靶向组:(40.97±6.55)%比(83.80±5.21)%,t=12.531,P<0.05;无靶向组:(67.32±8.92)%比(83.80±5.21)%,t=3.912,P<0.05];且无靶向组高于靶向组[(67.32±8.92)%比(40.97±6.55)%,t=5.833,P<0.05];动物实验亦证实iRGD-Exo-131I能更有效地抑制ATC细胞的增殖。结论成功制备iRGD-Exo-131I,且该标志物较稳定,靶向性良好;体外及体内实验证实其能有效杀伤ATC细胞。
- 张瑞国王聪聪李宁侯莎莎张文新张如意申一鸣孟召伟贾强谭建
- 关键词：外泌体碘放射性同位素同位素标记未分化甲状腺癌
- 甲状腺疾病患者血清可溶性细胞间粘附分子-1的研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨血清可溶性细胞间粘附分子-1（SICAM-1）水平与甲状腺疾病的关系。方法采用^125Ⅰ-sICAM-1 RIA方法，检测了健康人273名（对照组），Graves（GD）病患者557例，初诊慢性淋巴细胞性甲状腺炎（HT）患者33例，初诊单纯性甲状腺肿（SG）患者17例，初诊非毒性结节性甲状腺肿（NTNG）患者9例的血清sICAM-1水平，比较各组间差异及其与其他指标的相关性。变量资料为正态分布时，应用ANOVA或t检验进行组间比较；不满足条件时，应用秩和检验（Kruskal-Wallis或Mann-Whitney）进行分析。结果初诊GD组[58例，（255．04±82．40）ug/L]和HT组[（227．22±77．08）ug／L]sICAM-1水平均高于对照组[（149．89±39、45）-L]（GD：Z=-9．401，HT：Z=-5．902；P均〈0．01），而SG组[（173．82±59．50）ug/L]和NTNG组[（159．31±28．73）ug/L]与对照组差别无统计学意义（SG：Z=-1．9，NTNG：Z=-0．949；P均〉0．05）。初诊及各治疗阶段GD伴突眼组sICAM-1水平均高于非突眼组，但仅在治疗≥19个月组差异有统计学意义[（211．58±53．58）与（189．50±39．99）ug/L；t=2．004，P〈0．05]。复发GD突眼及非突眼组sICAM-1水平亦显著高于对照组（X^2=88．257，P〈0．01）。在经抗甲状腺药物（ATD）治疗后甲状腺功能恢复正常且病情稳定的GD患者中，sICAM-1水平随疗程延长逐步缓慢降低，且当疗程≥19个月时，GD组在非突眼及突眼患者中，其血清sICAM-1[（189．50±39．99），（211．58±53．58）ug/L]与各自初诊组[（244．75±81．58），（287．36±79．20）ug/L]差异有统计学意义（F=9．986和3．398，P〈0．01和P〈0．05），但直至停药时仍高于对照组[（185．25±39．64）与（149．89±39．45）ug/L；Z=-3．813，P〈0．05]。结论血清sICAM-1可反映自身免疫性甲状腺疾病（AITD）患者体内的自身免疫状态，其测定对GD、HT有辅助诊断价值，这对于了解GD患者的�
- 刘金泉方佩华冯凭李宁孟召伟吕枚许静
- 关键词：甲状腺疾病细胞粘着分子放射免疫检测
- 高脂血症、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎患者血清sICAM-1水平观察及意义
- 1、目的细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)属于免疫球蛋白超家族成员之一, 是—种细胞表面单链跨膜锫蛋白,它与其配基淋巴细胞功能相关抗原-1结合,介导细胞...
- 李宁方佩华
- 2型糖尿病患者血清肿瘤坏死因子和可溶性细胞间黏附因子与内生肌酐清除率的相关性被引量：2
- 2011年
- 目的 探讨2型糖尿病患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、可溶性细胞间黏附分子（sICAM）-1水平的变化及与内生肌酐清除率（Ccr）的相关性.方法 分别应用放射免疫分析方法、酶联免疫吸附法检测我院住院的122例2型糖尿病患者血清sICAM-1、TNF-α水平,设正常对照组（30例）,比较2组之间血清sICAM-1、TNF-α水平,分析2型糖尿病患者Ccr与血清sICAM-1、TNF-α水平的相关性.结果 2型糖尿病患者血清sICAM-1、TNF-α水平显著高于正常对照组[（178.25±33.34）μg/L比（212.68±63.91）μg/L,P＜0.01;（10.13±4.00）μg/L比（12.01±4.34）μg/L,P＜0.05].调整了年龄、性别、糖尿病病程后,2型糖尿病患者血清TNF-α、sICAM-1之间呈显著正相关（r=0.222,P=0.015）.2型糖尿病肾病患者血清sICAM-1、TNF-α水平显著高于不合并糖尿病肾病患者[（200.34±56.05）μg/L比（228.74±70.22）μg/L,P＜0.05;（11.15±2.69）μg/L比（13.13±5.68）μg/L,P＜0.05].2型糖尿病患者Ccr与血清TNF-α、sICAM-1呈显著负相关（r=-0.233、-0.185;P=0.010、0.041）,调整了性别、年龄、糖尿病病程、BMI、血压、血脂、血糖控制情况后,Ccr仍与TNF-α、sICAM-1呈显著负相关（P=0.0190.010）.结论 2型糖尿病患者血清TNF-α、sICAM水平显著增高,其可能是2型糖尿病患者Ccr下降的独立危险因素.
- 赵伟张宏李宁刘松平方佩华
- 关键词：肿瘤坏死因子Α可溶性细胞间黏附分子1
- hTPO膜外区基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建
- 2012年
- 目的:探索克隆人甲状腺过氧化物酶(hTPO)膜外区基因并构建其杆状病毒表达载体。方法:PCR扩增hTPO膜外区基因,并将其先后重组入pGEM3zf(+)质粒和pFastBac1质粒,以hTPO-pFastBAC1质粒转染E.coliDH10Bac大肠杆菌,获得重组hTPO杆状病毒表达载体(hTPO-Bacmid),每一步均以PCR及酶切、基因测序等方法鉴定其正确性。结果:与预期一致,PCR扩增hTPO膜外区基因的产物为一约2.5kb的条带;hTPO-pGEM3zf(+)经EcoRⅠ+HindⅢ、EcoRⅠ+SalⅠ双酶切后均获得2.5和3.2kb条带;hTPO-pFastBAC1以EcoRⅠ+HindⅢ双酶切得到2.5和4.8kb的带,均符合预期。分别以重组hTPO-pGEM3zf(+)质粒、hTPO-pFastBAC1质粒为模板进行PCR扩增鉴定,均得到约2.5kb的目的条带;对hTPO-Bacmid进行PCR鉴定,得到约4.8kb的片段。对hTPO-pFastBAC1上下游接口测序正确无误。结论:本研究成功克隆了hTPO膜外区基因,并完成了其杆状病毒表达载体hTPO-Bacmid的构建。
- 刘金泉肖茜李宁李进韩梅方佩华
- 关键词：碘化物过氧化物酶甲状腺聚合酶链反应基因克隆
- 原癌基因c-myc在GD和PTC患者甲状腺组织中的表达被引量：1
- 2008年
- ①目的探讨c-myc在Graves disease病(GD)和乳头状甲状腺癌(PTC)患者甲状腺组织中的表达。②方法各标本均采用TRIzol法提取总RNA,RT-PCR法获取cDNA,多重PCR法同时扩增187bp的c-myc和459bp的β-actin,产物行琼脂糖凝胶电泳并照相存盘,用Gel Base/Gel Biot-Pro分析软件获取各标本c-myc和β-actin的密度值,并计算比较。③结果正常组、GD病组、PTC组的c-myc/β-actin比值(x±s)分别为:0.367±0.044、0.599±0.080和0.682±0.111。Ⅰ～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期PTC组中c-myc/β-actin的比值分别为0.596±0.077、0.740±0.092。方差分析正常组、GD病组、PTC 3组之间差异有显著性(P<0.01)。q检验结果显示:c-myc在PTC组中的表达明显高于GD病组和正常对照组,c-myc在GD病组中的表达明显高于正常对照组。t检验结果表明,在PTC标本中c-myc在Ⅲ期-Ⅳ期中的表达明显高于Ⅰ期-Ⅱ期中的表达(P<0.01)。④结论原癌基因c-myc在GD病和PTC患者甲状腺组织中的表达均增高,且随PTC分期的增加,c-myc的表达量亦随之增加。
- 杨立平冯洁李宁吕枚
- 关键词：GRAVES
