李帆
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 果蝇血液标记基因srp原核表达质粒构建及多克隆抗体制备被引量：2
- 2011年
- 果蝇基因srp是血液发育的早期标记基因,为了研究果蝇这一模式动物中血液发育的详尽过程,通过提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,设计引物克隆出srp基因,将所得片段插入原核表达载体pET28a中,经酶切和序列鉴定,成功构建重组质粒,并通过IPTG诱导表达出His-srp融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯化后,免疫新西兰大白兔制备srp多克隆抗体,为血液发育研究奠定了基础.
- 鲁建鑫雷孝锋李帆江志刚吴秀山万永奇
- 关键词：果蝇SRP原核表达多克隆抗体
- TT-10在制备预防和/或治疗生殖器官损伤的药物中的应用
- 本发明涉及生物用药领域，尤其涉及TT‑10在制备预防和/或治疗生殖器官损伤的药物中的应用。本发明提供了TT‑10在制备预防和/或治疗生殖器官损伤的药物中的应用。本发明提供一种TT‑10小分子在预防雌鼠生殖器官损伤中的应用...
- 朱勇飞王晴白铭新辛冰艳李帆王旭宁
- 斑马鱼Foxp4基因多克隆抗体的制备及检测被引量：2
- 2011年
- Foxp4为Fox基因家族的一员,目前研究发现其与怖、肠、心脏以及中枢神经系统的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。按照巢式PCR原理,经过两次PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Foxp4基因片段,将其克隆入表达载体pGEX4T-1,转化至大肠杆菌BL21中,再通过IPTG进行诱导表达GST-Foxp4融合蛋白。融合蛋白先经谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,再经切胶纯化回收,然后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,分别进行Western-blot实验检测抗体效价和特异性。所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Foxp4多克隆抗体,为Foxp4功能的进一步研究奠定了基础。
- 刘华友朱玲李帆王琨江志钢吴秀山李永青
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- Smydl基因在心肌肥大中的调控作用
- 心肌肥大是一种渐进性的心脏疾病,是心肌层的一般反应,发生在不同的心血管疾病中,如高血压、心肌梗塞、心房室瓣疾病,以及基因、病毒或代谢引起的不同心肌病。高达50%左右的心肌肥大患者在患病5年内都会因心力衰竭而导致死亡。尽管...
- 李帆
- 关键词：心肌肥厚过表达RNA干扰
- Smyd1干扰真核表达质粒及其稳定转染H9c2细胞系的构建
- 2011年
- 运用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)构建pSUPER.retro-Smyd1真核表达质粒,经鉴定后用脂质体法转染H9c2细胞,通过G418筛选出稳定表达pSUPER.retro-Smyd1的细胞系,最后经Western blot及RT-PCR实验鉴定其干扰效果。经鉴定,通过H9c2细胞系构建的pSUPER.retro-Smyd1干扰细胞系的干扰效果显著。因此,本实验成功构建了Smyd1干扰真核表达质粒及其稳定转染的H9c2细胞系,为进一步研究Smyd1基因在心脏发育中的作用奠定了良好的实验基础。
- 李帆廖四芳刘华友鲁建鑫刘宪楚刘明吴秀山李永青
- 关键词：RNAI技术SIRNA稳定转染
- 斑马鱼Lefty1特异性多克隆抗体的制备被引量：7
- 2010年
- Lefty蛋白是TGFβ大家族的配体,通过与Nodal以及Nodal的受体结合而抑制Nodal信号转导。本文采用PCR技术扩增出斑马鱼lefty1基因(z-lefty1)的部分编码区,将其插入到pGEX-4T-1原核表达载体中。所构建的重组质粒(pGEX/z-Lefty1)转化入BL21大肠杆菌,通过IPTG诱导表达GST-z-Lefty1融合蛋白。蛋白经尿素洗涤分离后用于免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体。Western blotting检测结果表明获得了高效价的特异性兔抗z-Lefty1多克隆抗体。这为进一步研究斑马鱼心脏发育的分子机制创造了条件。
- 满贤龚琳王跃群李帆刘华友莫小阳邓云万永奇吴秀山李永青
- 关键词：原核表达多克隆抗体
