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李平川

作品数:5 被引量:15H指数:3
供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇乳头
  • 5篇瘤病毒
  • 4篇蛋白
  • 4篇人乳
  • 4篇人乳头瘤
  • 4篇人乳头瘤病毒
  • 4篇人乳头瘤病毒...
  • 4篇乳头瘤
  • 4篇乳头瘤病毒
  • 4篇L1蛋白
  • 2篇湿疣
  • 2篇酵母
  • 2篇尖锐湿疣
  • 1篇多态
  • 1篇多态性
  • 1篇多态性分析
  • 1篇疫苗
  • 1篇原核表达
  • 1篇乳头状
  • 1篇乳头状瘤

机构

  • 4篇中国疾病预防...
  • 2篇北京协和医院
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇中国预防医学...

作者

  • 5篇李平川
  • 4篇曾毅
  • 4篇周玲
  • 2篇洪少林
  • 2篇张晓光
  • 2篇王家璧
  • 1篇许雪梅
  • 1篇刘跃华
  • 1篇司静懿
  • 1篇郭秀婵

传媒

  • 2篇病毒学报
  • 1篇中华实验和临...
  • 1篇临床皮肤科杂...

年份

  • 1篇2004
  • 3篇2003
  • 1篇2002
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
人乳头瘤病毒6型L1蛋白的表达及其免疫效果观察
目前,最为成功的HPV疫苗是病毒颗粒形式(VLP),由L1(或加I2、E6、E7等)在昆虫细胞中表达提纯后自发形成的,有较好的免疫原性.但其昂贵的生产工艺可能妨碍在发展中国家的应用,因此有必要摸索其他更为廉价的生产方式....
李平川
关键词:L1蛋白甲醇酵母DNA疫苗人乳头瘤病毒
文献传递
用甲醇酵母表达经基因优化的HPV 6型L1蛋白被引量:5
2003年
目的利用甲醇酵母系统Pichia pastoris高效表达HPV 6型L1蛋白。方法按照Pichiapastoris偏爱密码子合成L1全长基因,构建pPIC3.5K-HPV6-L1表达载体,转化KM71,经组氨酸缺陷的MD培养基和G418筛选,PCR确认L1基因整合,使用BMGY/BMMY培养/诱导目的基因的表达。结果筛选到3株阳性表达克隆,Western blot显示表达产物有部分糖基化现象,使用能识别完整VLP的单抗进行间接免疫荧光检测提示L1蛋白在Pichia细胞内以空间构象形式存在。通过离子交换和亲和层析两步纯化从1L发酵液中得到125μg纯的L1蛋白。结论通过基因优化在甲醇酵母中表达HPV6-L1蛋白,这将为结构与功能研究以及疫苗开发提供条件。
李平川张晓光周玲曾毅
关键词:乳头状瘤病毒HPV克隆尖锐湿疣
按酵母基因优化的HPV6型L1蛋白在大肠杆菌中高效表达被引量:3
2004年
Human papillomavirus 6(HPV6) causes a common sexually transmitted disease,the genital warts.L1-capsid protein is a highly promising preventive vaccine that has entered phase Ⅱ clinical trial.But the existing methodologies for producing L1-capsid protein in insect cells is expensive for use in developing countries.In order to get larger amount of L1 protein in E.coli economically,we rebuilt whole L1 gene with preferred codons for yeast P.pastoris,abolished A-T rich regions,subcloned the modified L1 gene (mL1) into pTXB1 and induced expression by IPTG.SDS-PAGE and Western blot showed that mL1-6×His fused proteins could be overexpressed in BL21(DE3).This success will facilitate the HPV vaccine development and structure-function study.
李平川张晓光周玲曾毅
关键词:人乳头瘤病毒6型L1蛋白酵母大肠杆菌
人乳头瘤病毒6型L1蛋白在原核表达体系中的表达被引量:2
2003年
目的:比较人乳头瘤病毒6型(HPV6)L1序列的变异,并筛选有代表性的分离标本进行重组HPV6L1蛋白的表达和抗原性检测。方法:根据不同临床特征选择主要致病型HPV6型8个分离标本,扩增L1基因,构建重组测序质粒。分析L1区的氨基酸序列变异状况,选择L1序列变异较大的临床分离标本,通过对HPV6L1基因的起始和终止端进行基因定点改造,连于表达载体质粒pET32a,在原核表达体系表达重组HPV6L1蛋白,并进行L1蛋白的抗原性检测。结果:HPV6型8个分离标本中有6个分离标本L1区的蛋白质一级结构中分别有1~3个氨基酸发生变异,原核表达重组L1蛋白可与HPV6L1抗体发生特异反应。说明HPV6L1序列的变异并未影响L1蛋白的抗原性。结论:本临床分离标本可提供发展HPV6L1蛋白和病毒样颗粒(VLP)疫苗的候选目的基因,并可通过原核表达体系表达重组HPVL1蛋白进行L1蛋白的免疫学分析,以及L1蛋白疫苗的研究。
王家璧洪少林刘跃华李平川周玲曾毅
关键词:尖锐湿疣人乳头瘤病毒原核表达抗原性
尖锐湿疣病变的人乳头瘤病毒6型L1序列多态性分析被引量:8
2002年
采用PCR方法从协和医院尖锐湿疣患者皮损中检测人乳头瘤病毒 (HPV) ,并通过限制性片断长度多态性分析分型发现 ,HPV6型为主要感染型别 ,其次是HPV11型。根据临床特征选择主要致病型HPV6 8个分离株 ,扩增L1晚期基因 ,构建重组测序质粒 ,双脱氧法测序并分析L1区的核苷酸和氨基酸序列变异状况。结果表明 ,HPV6L1基因序列发生碱基替换的区域主要有四个区 ,包括SR1(5 911~ 6 10 4 ) ,SR2 (6 2 17~ 6 2 73) ,SR3(6 5 4 0~6 6 6 1)和SR4 (70 6 2~ 72 5 0 )。少数的碱基替换导致错义突变 ,推导的蛋白质一级结构中有 0~ 3个氨基酸发生变异 。
洪少林王家璧李平川周玲司静懿许雪梅郭秀婵曾毅
关键词:人乳头瘤病毒6型聚合酶链式反应
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