李洁琼
- 作品数：4 被引量：37H指数：1
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- 粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶基因的克隆及表达
- 乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase， ACC)是脂肪酸合成代谢中的关键酶，它催化乙酰辅酶A生成丙二酰单酰辅酶A，后者是脂肪酸合成中二碳单位的供体，因此乙酰辅酶A羧化酶也成为脂肪酸合成代谢中的限...
- 李洁琼
- 关键词：粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶气相色谱分析脂肪酸含量
- 粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶基因及其克隆、功能验证方法和应用
- 本发明公开了一种粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶基因以及该基因编码的蛋白质、该基因的克隆方法和功能验证方法。本发明粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID ...
- 郑世学张吉斌喻子牛李洁琼王利兵
- 文献传递
- 粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因的克隆及CT功能域基因的原核表达
- 2011年
- 利用简并PCR结合染色体步移法首次克隆获得粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因的全长序列信息。序列分析表明,该基因包含2个内含子,分别位于42～147 bp和315～677 bp处,编码区域总长为6 801bp,推导的氨基酸序列进行二级结构分析具备乙酰辅酶A羧化酶典型的3个功能域:生物素羧化酶(BC)、生物素羧基载体蛋白(BCCP)和羧基转移酶(CT)。克隆该基因的CT功能域基因,连接到原核表达载体pET-28a上,在Escherichia coli BL21(DE3)中成功表达,利用Ni-NTA树脂柱纯化获得CT的可溶性重组蛋白,浓度为1.8mg/mL,为研究ACC的功能和针对CT作用的除草剂机理研究提供了有价值的材料。
- 李洁琼王利兵刘阳郑世学喻子牛
- 关键词：粘红酵母克隆原核表达
- 乙酰辅酶A羧化酶：脂肪酸代谢的关键酶及其基因克隆研究进展被引量：36
- 2011年
- 乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACC)在脂肪酸合成和分解代谢中发挥着重要作用.系统介绍了该酶的结构与分类、生物学作用与应用、抑制剂的类型与作用机理以及基因克隆4个方面的进展.ACC在大多数原核生物中为多亚基型酶,而在大多数真核生物中为多功能型单亚基酶,在天蓝色链霉菌和古菌勤奋金属球菌中为另外两种特殊类型;但都具备3个关键的功能域,即生物素羧化酶(BC)、生物素羧基载体蛋白(BCCP)和羧基转移酶(CT).CT功能域作为潜在的靶标广泛应用于植物除草剂的筛选和哺乳动物肥胖、糖尿病等代谢疾病的药物设计中.ACC基因也成为转基因油料作物和生物柴油研究中重要的靶标基因.研究表明,植物质体中的β-CT亚基是多亚基型ACC的限制因子,而BCCP是脂肪酸合成的负调控因子.油脂的合成代谢十分复杂,且存在反馈抑制机制,因此克隆和表达ACC基因可以提高宿主中ACC的活性,但不一定能显著促进脂肪酸的积累.
- 李洁琼郑世学喻子牛张吉斌
- 关键词：乙酰辅酶A羧化酶脂肪酸代谢功能域抑制剂基因克隆
