李清州
- 作品数：29 被引量：105H指数：6
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 纳米颗粒疫苗研究进展被引量：5
- 2014年
- 纳米颗粒指小于100-1000nm的微粒，纳米颗粒疫苗不但能提高抗原的稳定性和免疫原性，而且能够靶向性递呈抗原和缓慢释放，增强机体产生免疫应答。综述了近年来纳米颗粒在疫苗发展过程中的应用，介绍了不同纳米颗粒作为运输系统或免疫佐剂与免疫细胞之间的相互作用。
- 李鹏郭军庆李清州刘肖王选年王川庆张改平
- 关键词：疫苗佐剂
- 河南省猪肉及其制品生产的现状、问题与对策被引量：3
- 2013年
- 分析了河南省猪肉及其制品的生产现状与问题,指出了其生产区域布局优势,并提出了河南省猪肉及其制品产业快速发展的措施与对策。
- 李清州宋淑敏吴泽玉郑国清
- 一例猪链球菌病的诊治被引量：1
- 2007年
- 河南某猪场饲养的800多头猪于2006年8月10日出现高热、跛行和神经症状，其中断奶仔猪较严重。在300多头2月龄仔猪中，每天死亡10头左右，初始怀疑为猪瘟，使用猪瘟疫苗进行治疗，5天后不见减轻。至8月25日共有200多头猪发病，死亡100多头，发病率70．5％，死亡率35．6％。
- 宋海涛杜艳芬赵光辉李清州
- 关键词：猪链球菌病诊治断奶仔猪猪瘟疫苗神经症状高热
- 一例波尔山羊喘气病的诊治
- 2007年
- 宋海涛韩天河杜艳芬李清州冯丽丽赵光辉
- 关键词：波尔山羊喘气病败血性传染病诊治流行病学调查发病症状
- 鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小。构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%。从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。
- 张改平朱礼倩杨艳艳赵绪永乔松林张红王丽李清州王选年
- 关键词：鸡胚成纤维细胞CDNA表达文库
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展被引量：4
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病原,对PRRSV细胞受体的研究将有助于揭示PRRSV的感染途径、复制过程、致病机理和疫病预防及控制等一系列问题,细胞受体的研究已经成为目前PRRSV研究中的重要领域。论文从硫酸乙酰肝素受体、唾液酸黏附素受体、CD163分子、波形蛋白等方面综述了PRRSV细胞受体研究进展。
- 李清州达龙珠鲍登克陈海燕杨春英刘毓霞乔松林
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒硫酸乙酰肝素波形蛋白
- T2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备被引量：6
- 2013年
- 合成并鉴定T 2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T 2毒素多克隆抗血清。采用琥珀酸酐法将T 2毒素活化为T 2HS,T 2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T 2 BSA和检测抗原T 2OVA,经鉴定后,分别按30、50μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324ng/mL,且具有良好的特异性。成功合成了T 2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T 2毒素单克隆抗体的制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。
- 王坤李清州胡骁飞李文君孙亚宁王方雨职爱民邓瑞广张改平
- 关键词：T2毒素人工抗原ELISA
- 猪瘟兔化弱毒株E^(rns)基因在大肠埃希氏菌中的表达、纯化
- 2009年
- 将猪瘟兔化弱毒株Erns基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,经SDS-PAGE和Western-Blot检测,结果表明,融合表达蛋白的分子量约为55kD,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45%。表达蛋白与兔抗CSFV多抗发生特异性反应,具有良好的反应原性。利用GST亲和层析柱对Erns融合蛋白进行了纯化。
- 王丽杨艳艳张红李清州李学伍张改平
- 关键词：猪瘟兔化弱毒原核表达纯化猪瘟
- 口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定被引量：1
- 2012年
- 为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端T细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET-28a中,构建原核表达质粒pET28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-bolt鉴定,结果显示,在16kD处有一条明显的蛋白表达条带。对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50%为可溶性蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白。研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。
- 卢清侠王世红金前跃李清州郝慧芳张改平
- 关键词：口蹄疫原核表达疫苗佐剂
- H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化被引量：9
- 2008年
- 利用PCR方法从含禽流感病毒HA基因的质粒T-HA上扩增HA基因,再将其克隆到原核表达载体pET28a中,用E.coliBL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定。Western-blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为60kD,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清特异性反应,具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV血凝素抗体具有良好的灵敏性。
- 李清州郝惠芳王丽赵绪永朱礼倩张丽萍邓瑞广张改平
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型原核表达
