杜惠杨
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 低氧对人肺腺癌细胞株A549细胞周期及HIF-1α、p27表达的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨低氧诱导人肺腺癌细胞株A549发生G0/G1期细胞周期阻滞的分子机制。方法将培养的细胞分为对照组、低氧24 h组及低氧48 h组。流式细胞仪检测细胞周期分布及p27蛋白表达,免疫细胞化学与原位杂交技术检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达及p27mRNA转录水平。结果①低氧24 h组与48 h组G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.05);②HIF-1α蛋白在对照组有少量表达,随着低氧时间的延长,其表达增加(P<0.01);p27mRNA转录水平及p27蛋白表达均随低氧时间的延长而增高(均P<0.01);③低氧组HIF-1α表达与p27蛋白表达存在显著正相关(r=0.958,P<0.01);低氧组p27蛋白表达与G0/G1期阻滞呈显著正相关(r=0.867,P<0.01);低氧组HIF-1α表达与p27 mRNA转录呈显著正相关(r=0.695,P<0.01)。结论低氧能使人肺腺癌细胞株A549发生G0/G1期阻滞,HIF-1α对p27转录和表达的调控在其中可能起重要作用。
- 陈琴付燕飚杜惠杨宋雪芳
- 关键词：低氧P27基因缺氧诱导因子-1Α细胞周期阻滞
- myocardin在低氧诱导肺血管内皮向平滑肌样细胞转分化中的作用被引量：5
- 2006年
- 目的探讨低氧条件下肺动脉内皮细胞(PAEC)向平滑肌样细胞的转分化及myocardin在其转分化过程中的作用。方法经免疫磁珠法(用血小板内皮细胞黏附分子1做免疫分选标记)纯化分离的原代肺动脉内皮细胞,用:RNA干扰(RNAi)技术构建psimyocardin RNA表达载体抑制myocardin基因的表达。细胞分为常氧组(含21％O2,5％CO2和74％N2)、低氧组(含1％O2,5％CO2, 94％N2)、常氧+myocardin抑制组和低氧+myocardin抑制组,分别培养1 d、4 d和7 d。用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测myocardin mRNA的表达;免疫荧光检测平滑肌特异性标志物α-平滑肌(α-SM)肌动蛋白的表达,结合形态学鉴定平滑肌样细胞的转分化。结果(1)免疫荧光检测PAEC中α-SM-肌动蛋白阳性率在低氧4 d组(0．96‰±0．08‰)明显低于7 d组(2．07‰±0．06‰,P< 0．01),阳性细胞呈梭形或多角形,而常氧组和低氧1 d组均未见α-SM-肌动蛋白的阳性表达;(2)RT- PCR显示myocardin mRNA的表达在低氧4 d组(0．14±0．01)明显低于低氧7 d组(0．23±0．03, P<0．01),常氧组和低氧1 d组均未检测出其表达。(3)RNAi沉默myocardin基因表达后,其mRNA水平明显低于对应的低氧4 d组(0．03±0．02)和低氧7 d组(0．05±0．01,P<0．01);平滑肌样细胞的转分化率也明显降低(0．19‰±0．07‰,0．21‰±0．04‰,P<0．01)。以上每组重复3次。结论PAEC中存在少数细胞具有转分化为平滑肌样细胞的潜能,低氧可明显促进其转分化,myocardin在此转分化过程中起重要作用。
- 何惠华黄磊卢玮朱朋成葛晓娜杜惠杨敖启林
- 关键词：内皮低氧MYOCARDIN
