杜改亮
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：西北大学生命科学学院陕西省生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 拟南芥HyPRP蛋白AZI1在大肠杆菌中的表达及其抗真菌活性分析被引量：1
- 2015年
- AZI1(AZELAIC ACID INDUCED 1)基因位于拟南芥4号染色体上,编码产物是脂质转移蛋白(lipid transfer protein,LTP)家族的一个成员。该基因在系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中具有重要功能,名称来自它可以被壬二酸(azelaic acid,Az A)诱导。已有的研究结果显示,在拟南芥中由Az A和甘油-3-磷酸(glycerol-3-phosphate,G3P)诱导的SAR反应需要AZI1和DIR1,这两个脂质转移蛋白有助于G3P的积累。为了确定AZI1蛋白是否具有抗真菌活性,本工作构建了原核表达载体p ET28a-AZI1,利用大肠杆菌BL21(DE3)受体细胞制备了没有信号肽的AZI1重组蛋白。Western免疫印迹分析发现通过半乳糖苷类似物IPTG诱导表达的AZI1重组蛋白主要以包涵体的形式存在。体外抑菌实验以及激光共聚焦显微观察结果表明,用镍离子亲和层析树脂纯化的AZI1重组蛋白对灰霉菌、赤霉菌、棉花枯萎病菌和酿酒酵母细胞的生长/分裂均具有抑制作用。
- 王晓燕杜改亮韩瑶瑶刘梦欣马燕勤冯欢徐子勤
- 关键词：拟南芥蛋白纯化系统获得抗性
- 拟南芥抵抗丁香假单胞杆菌过程中AZI1基因功能研究被引量：3
- 2013年
- AZI1属于脂转移蛋白家族,它在拟南芥抵抗病原菌侵染过程中可能起着传递信号物质的作用。该实验以过表达和T-DNA插入突变体及野生型拟南芥植株为材料,通过RNA印迹、蛋白质免疫印迹和原位免疫组织化学方法,研究了拟南芥壬二酸诱导基因AZI1对丁香假单胞杆菌的抗性功能。结果表明:(1)AZI1基因可以被丁香假单胞杆菌、H2O2和乙烯利诱导,它可能参与水杨酸和乙烯介导的抗菌途径。(2)蛋白质免疫印迹实验结果显示,丁香假单胞杆菌侵染叶片的叶柄渗出液中存在AZI1蛋白及其同源物EARLI1,并能够与其他蛋白质形成复合体,说明AZI1有可能通过维管组织移动到个体的其他部位,与信号分子的转移有关。(3)AZI1及其同源物EARLI1主要在花序茎的木质化部位表达,过表达AZI1基因能够促进木质素的合成,提高拟南芥对丁香假单胞杆菌的抗性。
- 高航杜改亮麻力徐子勤
- 关键词：拟南芥DAB台盼蓝
- 拟南芥HyPRP蛋白AZI1在转基因烟草中的亚细胞定位及其对真菌病原体的抗性
- 拟南芥AZI1(At4g12470)基因编码的蛋白质属于HyPRP家族EARLI1亚家族,由N端的信号肽、中间的富含脯氨酸结构域(PRD)以及C端的8半胱氨酸结构域(8CM)构成。由于包含8CM结构域,AZI1也被认为是...
- 杜改亮
- 关键词：亚细胞定位抗性分析抑菌实验
- 文献传递
- 拟南芥HyPRP蛋白AZI1在转基因烟草中的亚细胞定位及其对灰葡萄孢的抗性被引量：2
- 2012年
- 通过农杆菌转化法得到了整合有拟南芥AZI1基因的烟草植株,进一步利用转基因烟草分析了AZI1蛋白的亚细胞定位及其对真菌病原体的抗性特征。在上下游引物5'端分别引入NcoI和SpeI酶切位点,采用高保真耐热DNA聚合酶Pfu从拟南芥Col-0生态型基因组DNA扩增AZI1基因的编码序列,用NcoI和SpeI对扩增片段和pCAMBIA1302质粒载体进行双酶切,通过T4DNA连接酶构建产生AZI1-GFP融合表达载体。用包含融合表达载体的农杆菌细胞转化烟草叶片,经潮霉素选择获得了完整的再生植株,并收取了T0代种子。激光共聚焦显微观察发现,AZI1蛋白主要定位于细胞表面。病原体侵染结果显示,AZI1基因能够明显提高烟草对灰葡萄孢的抗性。说明AZI1蛋白通过分泌途径被定位到细胞表面后,能够抑制真菌病原体对植物组织的侵染过程。
- 杜改亮高航徐子勤
- 关键词：亚细胞定位灰葡萄孢
