林天龙
- 作品数：190 被引量：1,069H指数：22
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 应用单抗鉴别高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究
- 应用两个针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的单抗(McAb)对PRRSV美洲株、欧洲株和高致病性PRRSV毒株进行间接免疫荧光(IFA)鉴别诊断,并与商品化的PRRSV RT-PCR鉴别试剂盒进行了比较....
- 陈仕龙黄梅清林天龙江斌庄向生陈少莺
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒间接免疫荧光鉴别方法的建立被引量：13
- 2009年
- 应用2株针对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的单克隆抗体(McAb-A61,McAb-C65)建立了对PRRSV美洲株、欧洲株和高致病性毒株进行鉴别的间接免疫荧光试验(IFA)方法,并与商品化的PRRSV RT-PCR鉴别试剂盒进行比较。结果显示,McAb-C65与PRRSV美洲株和高致病性PRRSV毒株均呈阳性反应;McAb-A61与PRRSV美洲株呈阳性反应,但不与高致病性PRRSV毒株发生反应;2株单抗都不与欧洲株反应;IFA与RT-PCR的符合率为100%。表明,建立的PRRS间接免疫荧光鉴别诊断方法可为临床高致病性PRRS的确诊提供可靠的验证手段。
- 陈仕龙黄梅清林天龙江斌庄向生陈少莺
- 关键词：单克隆抗体间接免疫荧光试验
- 优球蛋白法纯化欧鳗免疫球蛋白被引量：3
- 2009年
- 采用优球蛋白法与饱和硫酸铵分步盐析法纯化欧洲鳗鲡血清免疫球蛋白(Ig),利用SDS-PAGE分析其纯度。试验结果显示:优球蛋白法纯化的欧鳗血清免疫球蛋白出现清晰2条带,纯度高于饱和硫酸铵分步纯化法;ELISA分析优球蛋白法纯化的欧鳗血清效价高于饱和硫酸铵纯化结果;Western-blot结果亦显示纯化的优球蛋白具有抗体免疫学活性。
- 王希龙龚晖杨金先林天龙
- 关键词：免疫球蛋白纯化
- 鉴别伪狂犬病病毒强、弱毒株单克隆抗体的制备被引量：2
- 2005年
- 用纯化的猪伪狂犬病病毒闽A株(PRV-FA)免疫Balb/c鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得11株能稳定分泌伪狂犬病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中6株仅与强毒FA反应,而不与弱毒FB、Bartha及gE缺失疫苗株发生反应。特异性鉴定结果表明,各株单抗均不与猪瘟病毒、猪流感病毒、猪呼吸繁殖障碍综合症病毒、猪细小病毒等发生交叉反应。
- 程晓霞陈少莺胡奇林俞伏松朱小丽陈仕龙林锋强欧阳岁东车勇良林天龙程由铨
- 关键词：伪狂犬病病毒强弱毒株单克隆抗体
- 斑点叉尾(鱼回)血清免疫球蛋白纯化及其结构分析被引量：12
- 2005年
- 通过饱和硫酸铵分步盐析结合柱层析纯化温和气单胞菌免疫的斑点叉尾(鱼回)血清免疫球蛋白(Ig),结果表明,斑点叉尾(鱼回)血清Ig主要分布在35%-55%的硫酸铵沉淀区间;而在Sepharose-4B凝胶柱和DEAE-52阴离子交换柱层析纯化的Ig均出现在第1个蛋白质峰。SDS-PAGE分析表明,纯化后的血清Ig纯度提高。通过变性还原、变性非还原和非变性非还原3种条件下的免疫印迹(Western blot)试验对血清Ig的结构进行初步分析,发现SDS变性还原条件下血清Ig重链分子量为72 kD,轻链有3条.其分子量分别为21 kD、23.5 kD和26 kD;在变性非还原条件下血清Ig则出现多种结构形式,主要条带的分子量分别为760 kD、525 kD、330 kD和230 kD;而在非变性非还原条件下Ig仅出现一种结构形式,分子量约为870 kD。
- 伊光辉林天龙熊邦喜刘晓东杨金先
- 关键词：斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白纯化
- 功能性卵黄粉与环境友好型饲料创制及产业化关键技术
- 宋铁英郭庆俞伏松潘瑞珍杨金先陈曦陈强陈婉如曾丽莉林天龙
- 所属科学领域及主要技术内容：肠道病原引起的腹泻是猪场养殖的顽疾，近年来有全球化蔓延的趋势，所导致的抗生素滥用，致使病原抗药、产品药残超标，已严重影响了食品安全和环境生态。该成果为解决这一问题，历经12年，通过所级、院级、...
- 关键词：
- 关键词：猪饲料
- 表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建被引量：5
- 2007年
- 以PRRSV FJ-1a株为模板，采用RT—PCR法分别扩增出GP2a／GP2b-3，GP3，GP4、GP5和M蛋白基因片段，双酶切后插入穿梭质粒pDC316。利用AdMax^TM法，将5个重组穿梭质粒分别与腺病毒辅助质粒共转染293细胞，得到重组腺病毒Ad—GP2a／GP2b-3、Ad—GP3、Ad—GP4、Ad—GP5和Ad-M。重组腺病毒滴度为10^7.7～10^9.0 TCID50·mL^-1，而以Ad—GP5滴度最低，仅为10^7.7 TCID50·mL^-1。PCR检测第3、6、9代重组腺病毒稳定性，确证重组病毒均能稳定携带目的基因。对目的基因转录的RT—PCR鉴定结果显示，重组腺病毒分别感染293细胞后能转录产生目的基因mRNA。表达PRRSV主要囊膜蛋白基因重组腺病毒的获得，为进一步研制PRRSV基因工程疫苗，解析主要囊膜蛋白功能奠定基础。
- 陈振海林天龙俞伏松宋铁英龚晖方勤美杨金先
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重组腺病毒囊膜蛋白
- 欧洲鳗黏膜免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析被引量：2
- 2008年
- 应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了8个分泌抗欧洲鳗（Anguilla anguilla）黏膜免疫球蛋白的单克隆抗体细胞株，并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。结果显示，8株单抗中IgM有2株，IgG，和IgG2。各有3株；所有单抗均与欧洲鳗黏膜免疫球蛋白呈ELISA反应阳性，腹水抗体滴度为在10^4～10^6之间。进一步实验证实，这些单抗与供试的10种水产动物常见病原菌均无交叉反应；其中3株单抗与欧洲鳗血清IgM有不同程度的交叉反应；4株单抗与黏膜免疫球蛋白有交叉反应，其中2株单抗交叉反应较弱。以上结果提示，欧洲鳗黏膜免疫球蛋白和血清IgM之间既有各自独特的抗原决定簇，又有共同抗原位点，证实欧洲鳗黏膜抗体在抗原性方面有别于血清IgM。成功制备的这8株单抗可用于鳗黏膜免疫球蛋白的检测及其结构和功能分析，为欧洲鳗黏膜免疫的进一步研究提供工具。[中国水产科学，2008，15（3）：511-515]
- 杨金先陈强林娟娟朱春华刘晓东林天龙
- 关键词：欧洲鳗鲡单克隆抗体特性分析
- 番鸭细小病毒和鹅细小病毒生化及基因组特性的比较被引量：28
- 2001年
- 番鸭细小病毒莆田株 ( MPV-P)和鹅细小病毒莆田株 ( GPV-P)分别感染的番鸭胚尿囊液经氯仿处理、PEG沉淀和 Sepharose 4 B柱纯化。纯化样品在电镜下观察 ,均见到实心和空心 2种病毒粒子。病毒粒子呈圆形 ,立体对称 ,无囊膜 ,直径为 2 0～ 2 4 nm。经 SDS-PAGE分析 ,MPV和 GPV均呈现 3条结构蛋白带。 MPV结构蛋白的相对分子质量约为 VP1890 0 0、VP2 780 0 0和 VP3 6 1 0 0 0 ,其中 VP3 为主要结构蛋白。GPV的相对分子质量与 MPV有微小差别。 MPV和 GPV核酸均为单链 DNA,长度约为 5 1 0 0 0 bp。分别以 MPV核酸和GPV核酸为模板 ,加到无引物的 DNA聚合酶 大片段合成体系中 ,合成产物经 1 %琼脂糖凝胶电泳 ,均可见长度约为 5 6 0 0 bp的双链 DNA带 ,证明 MPV和 GPV核酸的 3′末端具有发夹结构。对这 2种病毒核酸及经 Klenow合成的双链核酸进行限制性内切酶分析 ,两者的酶切结果明显不同 ,表明 MPV和 GPV核酸在一级结构上存在明显差异。以上结果证明 ,MPV和 GPV不但在致病性上有显著差异 。
- 程由铨胡奇林陈少莺李怡英林天龙
- 关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒基因特性
- RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究被引量：6
- 2007年
- 根据已发表的CSFV序列合成1对引物，以猪瘟病毒（CSFV）兔化弱毒株为模板，建立并优化了检测CSFV的RT—PCR方法，并与直接荧光抗体试验（DFA）进行比较，检测了15份临床疑似病料。结果如下：应用RT—PCR对CSFV兔化弱毒株RNA进行扩增，获得与预期大小相符长为509bp的特异性目的片段，敏感性达到10Pg的CSFV—RNA，对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病毒（PRV）和猪2型圆环病毒（PCV2）进行同条件扩增均为阴性，RT—PCR产物测序结果与文献报道的CSFV不同毒株的核苷酸序列同源性达到95％～99％；15份临床疑似病料应用RT—PCR的检出率为66．7％，而应用免疫荧光试验的检出率为60．0％，二者的总符合率为80％。表明RT—PCR方法比DFA更敏感，两种方法均可用于猪瘟的快速诊断。
- 俞伏松车勇良江斌吴胜会林琳陈少莺林天龙
- 关键词：猪瘟病毒
