林肖惠
- 作品数：9 被引量：99H指数：5
- 供职机构：国家食品安全风险评估中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家质检公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 超高效液相色谱-串联质谱法测定面粉、玉米及其制品中的伏马菌素研究被引量：9
- 2012年
- 目的建立面粉、玉米及其制品中3种伏马菌素的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。方法样品用乙腈-水(50∶50,V/V)溶液提取,经MultiSep 211净化柱富集净化后,用甲醇-甲酸(99∶1,V/V)溶液洗脱,洗脱液用UPLC-MS/MS进行测定。UPLC-MS/MS检测伏马菌素的条件为梯度洗脱,流动相为0.2%甲酸水和乙腈;质谱采集模式为电喷雾正离子多反应监测模式。结果 UPLC-MS/MS检测方法对3种伏马菌素的检出限均为0.2μg/kg,最低定量限为0.6μg/kg。不同加标水平的3种伏马菌素平均回收率为69.44%～114.69%。用所建方法对2011年甘肃及天津生产的39份玉米及30份面粉样品进行了分析,结果以伏马菌素B1的检出率最高,污染水平最为严重。结论 UPLC-MS/MS法具有操作简单、灵敏度高、重现性好等特点,可用于面粉、玉米及其制品中伏马菌素的检测。
- 马皎洁胡骁邵兵林肖惠于红霞李凤琴
- 关键词：伏马菌素面粉玉米超高效液相色谱-串联质谱
- 食品中重要B族黄曲霉毒素生物可及性体外消化模型的构建被引量：1
- 2012年
- 目的构建黄曲霉毒素B1（AFB1）和B2（AFB2）生物可及性体外消化模型并进行验证。方法体外条件下，模拟胃肠道生理消化过程，研究消化时间（长、中、短）、进食状态（禁食、介于禁食及半饱食、半饱食、介于半饱食及饱食、饱食状态）、人工消化液体积（高、中、低）、人工消化液pH值（高、中、低）、同时进食的多种食物成分等因素对AFB1和AFB2在口腔、胃和小肠中的生物可及性的影响，确定其生物可及性体外消化模型最优技术参数，并用真菌毒素吸附剂和样品对模型进行验证。结果经过优化，AFB1从食物基质中释放到唾液、胃液、十二指肠液和胆汁中浓度达最高的最佳消化时间分别是6min、1．5h和2．5h；胃液、十二指肠液的最佳pH值分别是1．1和7．5；唾液、胃液、十二指肠液、胆汁的最佳体积分别是7、13、12和6ml；AFB，从食物基质中释放到唾液、胃液、十二指肠液和胆汁中浓度达最高的最佳消化时间分别是6min、2．5h和2．5h；胃液、十二指肠液的最佳pH值分别是1．1和7．8；唾液、胃液、十二指肠液、胆汁的最佳体积分别是5、12、13和6ml；AFB。和AFB：的生物可及性均在禁食状态下最高，分别为83．1％和89．3％，并随着胃内容物的增加而降低，但当胃内容物达到半饱食状态时，即使增加胃内容物量，生物可及性的变化不大，半饱食到饱食状态AFB．的生物可及性由72．8％下降到71．5％，AFB：由78．3％下降到76．9％。叶绿素和活性炭分别是降低AFB．和AFB，的生物可及性最强的吸附剂，生物可极性分别降低到0．8％和1．3％。结论构建的体外消化模型稳定、重复性好，完全可以满足对食品中B族黄曲霉毒素生物可及性的研究。
- 林肖惠胡骁李凤琴
- 关键词：黄曲霉毒素类食品
- 交链孢毒素在Caco-2细胞中的转运与吸收被引量：1
- 2015年
- 目的利用构建的结肠腺癌细胞系（Caco-2）细胞模型,探讨交链孢毒素经Caco-2细胞模型的跨膜转运与吸收特征。方法将Caco-2细胞接种于Transwell培养板的聚碳酯膜上培养21 d,用跨上皮细胞电阻（TEER）、碱性磷酸酶（ALP）活性、荧光素表观渗透系数（Papp）和细胞形态学等指标评价所构建的Caco-2细胞模型。通过测定细胞单层顶侧和基底膜侧交链孢毒素的含量,研究不同浓度和转运时间交链孢酚（AOH）、交链孢酚单甲醚（AME）、交链孢菌酮酸（Te A）溶液的转运与吸收。结果培养至第21天的Caco-2细胞其TEER超过（300±15）Ω·cm2,且细胞顶侧和基底膜侧ALP活性差异有统计学意义（P〈0.01）。透射电镜下可见清晰的微绒毛和细胞间的紧密连接。AOH、AME和Te A的Papp范围为（1~10）×10-5cm/s,不同浓度和转运时间的毒素吸收率范围为1.5%~63.0%。结论建立的模型形成了完整且紧密的细胞单层。AOH和AM E的Papp大小与毒素浓度和转运时间有关,AOH、AME和Te A为易于吸收或中等易吸收的毒素。
- 赵凯韩春卉林肖惠江涛杨大进宋敬东李凤琴
- 关键词：CACO-2细胞转运
- 我国部分地区2010年产谷物及其制品中多组分真菌毒素污染状况研究被引量：56
- 2011年
- 目的了解我国部分地区2010年产谷物及其制品中多组分真菌毒素污染状况。方法 2010年在安徽、云南、福建、甘肃、广西、海南、黑龙江、湖北、湖南、江西、山西和上海12个省(市/自治区)采集玉米及其制品、小麦粉、大米和花生共计650份样品,用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法检测14种真菌毒素。结果玉米制品和小麦粉样品中污染的真菌毒素主要是B类单端孢霉烯族化合物和玉米赤霉烯酮(ZEN)。215份玉米样品中有84.65%检出脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),其中7份样品中的DON污染水平超过我国规定的1 000μg/kg限量标准,超标1.08～2.51倍(平均1.77倍);69.30%(149/215)的玉米样品ZEN阳性,其中23份样品中的ZEN水平超过我国规定的60μg/kg限量标准,超标1.06～19.19倍,平均4.32倍。53.02%的玉米样品还受到黄曲霉毒素的污染,其中有12份样品中AFB1含量超过了我国规定的20μg/kg限量标准,尤以云南、广西样品受污染较重。125份小麦粉样品中,仅有1份来自湖北的样品其DON污染水平(1 016.80μg/kg)超过我国规定的1 000μg/kg限量标准。40.41%的花生样品不同程度地受到黄曲霉毒素的污染,其中有5份样品中的AFB1水平超过20μg/kg的国家限量标准;大米受真菌毒素的污染较轻。结论我国玉米制品和小麦粉受多种真菌毒素污染,且以B类单端孢霉烯族化合物和ZEN为主;玉米和花生不同程度地受到黄曲霉毒素的污染。
- 马皎洁邵兵林肖惠于红霞李凤琴
- 关键词：谷物制品真菌毒素食品安全食品污染物
- 沙门菌MALDI-TOF-MS标准菌库的建立及应用研究被引量：14
- 2014年
- 目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)构建标准沙门菌株数据库。方法利用MALDI-TOF-MS对21株标准沙门菌进行质谱数据采集,建立标准菌株数据库。相关菌株质谱数据通过菌株在相同培养环境不同培养时间下所得质谱数据进行优化。通过血清型鉴定方法筛选出200株野生沙门菌,并利用自建数据库和现有数据库对200株野生沙门菌进行MALDI-TOF-MS检测,对自建数据库进行评价。结果 Bruker原有数据库、自建数据库及合并数据库对200株野生沙门菌鉴定,阳性率分别为87.5%、97.0%、97.5%。21株标准沙门菌株数据库按亲缘关系远近可分为3大类。主成分分析发现不同菌种之间质谱数据有一定的差异,个别菌种在不同培养条件下培养,质谱数据变化不明显。结论本研究建立的标准菌库对野生沙门菌的鉴定准确性高,适用于实际检测。研究结果丰富了已有的数据库,同时也为其他细菌菌库的建立提供了很好的借鉴。
- 胡骁林肖惠佟巍张丽张国辉赵化冰
- 关键词：沙门菌
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇生物可及性体外消化模型的构建及验证被引量：2
- 2012年
- 目的构建脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）生物可及性体外消化模型并验证,并对影响模型的主要因素进行优化。方法模拟胃肠道生理消化过程,研究消化时间、禁食和进食状态、消化液体积、消化液pH值、同时进食的多种食物成分等对DON在口腔、胃和小肠中生物可及性的影响,确定DON生物可及性体外消化模型最优技术参数,并对模型进行验证。结果经过优化,食品中DON释放到唾液、胃液、十二指肠液和胆汁中浓度达最高的最佳条件为：口腔、胃和十二指肠中的消化时间分别为6min、1.5h和1.5h;消化液pH分别为6.5、0.9、7.5和8.0;消化液体积分别为6、13、11ml和6ml;禁食和进食等各种状态下DON生物可及性范围为81.28%～99.58%,DON的生物可及性随胃内容物的增加而降低;食品基质类别（玉米和小麦粉）对DON生物可及性无影响;同时进食的其他食物成分可降低谷物中DON的生物可及性。结论构建的DON体外消化模型稳定性高、重复性好,完全可以满足对食品中DON生物可及性的研究。
- 林肖惠邵兵李凤琴
- 关键词：食品安全
- 体外消化模型在真菌毒素生物可及性研究中的应用及研究进展被引量：2
- 2011年
- 在人类健康风险评估中,经口摄入是人类暴露于许多污染物的主要途径。模拟污染物经口腔、胃和小肠消化过程的体外消化模型已成为探究污染物生物可及性、肠转运和代谢的热点,并成为评估食品、土壤等基质中重金属、有机污染物、真菌毒素风险的重要技术手段。模拟机体进食、禁食条件创建体外消化模型并验证,探讨真菌毒素在体内的生物可及性及影响因素,对发展准确、灵敏、方便的膳食暴露真菌毒素风险评估工具意义非凡。本文就真菌毒素生物可及性研究的最新进展进行综述。
- 林肖惠李凤琴
- 关键词：真菌毒素
- 禾谷镰刀菌产毒影响因子预测微生物学筛选被引量：10
- 2013年
- 目的对可能影响禾谷镰刀菌产毒的关键因子进行筛选,为不同自然条件下预测禾谷镰刀菌的产毒情况和粮食防霉提供实验手段。方法以禾谷镰刀菌为材料,以玉米、小麦和大米为基质,对影响禾谷镰刀菌产毒的重要因素变量(温度、通气量、水分含量、pH值、光照、培养基量、基质成分、培养时间等)进行筛选,构建L18-Hunter和Plackett-Burman模型(PB模型)。结果 L18-Hunter模型的实验结果表明,3株禾谷镰刀菌受试菌株中仅菌株3.4522产3-A-DON、15-A-DON以及毒素总量的模型拟合结果有统计学意义,回归方程系数效应检验结果显示,水分含量和培养时间是影响禾谷镰刀菌3.4522产3-A-DON、15-A-DON及毒素总量的关键因子;PB模型实验结果表明,就脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及毒素总量的绝对值以及DON、玉米赤霉烯酮(ZEN)、DON及其衍生物、B类单端孢霉烯族化合物及毒素总量浓度的对数值而言,该模型显著(P值分别为0.034 5、0.014 8、0.002 2、0.0029、0.006 8、0.006 7和0.000 6),模型R2分别为0.812 4、0.861 6、0.928 7、0.921 6、0.894 5、0.895 1和0.954 3,回归方程系数显著性检验结果显示,培养时间、温度和培养基初始pH值是影响禾谷镰刀菌3.452 2产毒的关键因子。结论培养时间、一定范围内(20%～50%)的水分含量、温度和培养基初始pH值是影响禾谷镰刀菌产毒的关键因子。
- 徐得月王伟陈西平林肖惠李玉伟李凤琴
- 关键词：预测微生物学禾谷镰刀菌产毒
- Caco-2细胞模型的建立及其在真菌毒素吸收率研究中的应用被引量：5
- 2014年
- 目的构建Caco-2单层细胞转运5种毒素的吸收率模型并验证。方法以Caco-2细胞系为工具，以脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、AFB2、黄曲霉毒素G1（AFG1）和AFG2为研究对象，通过对转运介质溶液中毒素的初始浓度、温度、pH值、抑制剂存在与否等实验条件的优化，构建Caco-2细胞转运DON和4种黄曲霉毒素的生理模型并进行验证。结果DON、AFB1、AFB2、AFG1及AFG2透过Caco-2单层细胞的量和表观渗透系数（Papp）随着体系溶液中pH的升高有下降趋势。AFB，在pH7．4—7．5溶液中的Papp值最高，AFB2、AFG1、AFG2及DON在pH7．0～7．1溶液中的Papp值最高。随着体系温度的升高，DON、AFB1、AFB2、AFG3及AFG2的透膜能力均有所增加。无论体系中AFB1、AFG1及AFG2浓度低或高，均在60min时透过率达到平台期并维持稳定；而AFB，及DON从高浓度到低浓度均在120min时透过率达到平台期并维持稳定。结论所建5种毒素Caco-2单层细胞模型灵敏、稳定、可靠、有效。
- 林肖惠胡骁李凤琴
- 关键词：CACO-2细胞模型脱氧雪腐镰刀菌烯醇黄曲霉毒素吸收率
