林荣双
- 作品数:15 被引量:202H指数:8
- 供职机构:烟台大学生物化学系更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 花生成熟胚胚轴的植株再生和快繁被引量:13
- 2003年
- 利用正交试验筛选出了以花生成熟胚胚轴为外植体获得较高频率的不定芽分化和植株再生的条件 ,并在此基础上对花生试管苗的快速繁殖进行了研究。研究表明 ,4d龄实生苗的花生胚轴 ,接种于MS +NAA0 4mg L +TDZ0 2mg L诱导培养基上培养 2 8d后 ,转移到MS0 可获得丛生的再生苗。将丛生苗分离 ,接种到P1培养基 (MS +NAA0 4mg L +BAP0 5mg L) ,小苗长大。把较大的试管苗切成带叶节的茎段 ,接种于含不同浓度的TDZ和BAP的快繁培养基 ,结果表明 ,TDZ0 2mg L最适宜试管苗的快繁 ,繁殖系数可达 4 8 月。试管苗经IBA诱导生根后 ,移栽田间 ,开花结果。
- 林荣双梁丽琨王庆华肖显华
- 关键词:不定芽分化植株再生快繁
- TDZ促进花生外植体分化及基因转化被引量:4
- 2002年
- 以花生成熟胚的上胚轴和胚叶为外植体 ,通过农杆菌介导转化Bt和CpTI双基因 ,在共培养基和诱导培养基中加入TDZ诱导不定芽和体细胞胚 .实验证明 ,TDZ有明显促进花生外植体分化的作用 ,当诱导培养基组成为TDZ 0 .3mg/L +NAA 0 .4mg/L ,诱导时间为 2 8d ,分化培养基为MS时采用TDZ发胚培养基萌发的轴外植体分化率最高 ,可达73% ,GUS基因阳性率 3.5 % .当诱导培养基组成为TDZ 0 .2mg/L +NAA 0 .4mg/L ,诱导时间为 2 1d ,分化培养基为MS时水萌发种胚叶外植体分化率最高 ,达 5 6 % ,GUS基因阳性率 2 .5 % .
- 梁丽琨林荣双肖显华王庆华
- 关键词:TDZ花生基因转化不定芽体细胞胚细胞激动素
- 植物材料表面消毒方法的改进被引量:66
- 1999年
- 苹果枝条用0.1%HgCI2磁力搅拌消毒15-20min,无菌水磁力搅拌清洗5次,每次5min。污染率和杀死率在10%以下,成功率90%左右,且无褐化。
- 肖显华王顺珍林荣双郑秋生
- 关键词:植物材料
- 花生幼叶为外植体的植株再生系统的建立被引量:16
- 2003年
- 本文报道利用花生成熟胚幼叶为外植体获得高频植株再生的方法 ,为花生转基因提供有效的受体系统。通过诱导培养基TDZ、BA、NAA的浓度以及种子萌发时间、继代培养基种类五个因素不同水平的正交试验 ,筛选出了分化高频发生的最佳组合为 :MS培养基中应含有TDZ 1 .0 μmol/L、BA 0 .4μmol/L、NAA 5 .0 μmol/L ,种子萌发 4d,继代培养基为MS0 。本研究表明 ,五因素中诱导培养基TDZ浓度为诱导花生幼叶分化的主要影响因素 ,其次为继代培养基、种子萌发时间 ,而诱导培养基中BA和NAA的浓度作用较小。试管苗生根后移栽田间 。
- 林荣双梁丽琨肖显华王顺珍
- 关键词:花生幼叶外植体植株再生
- 花生(Arachis hypogea L.)体细胞胚胚性特异蛋白的研究被引量:8
- 1999年
- 花生萌发3d的胚叶在诱导培养基上出现高频率的体细胞胚发生.SDS-PAGE分析结果表明:在体细胞胚发生过程中,诱导第三天开始出现3条新的蛋白谱带,7d后出现2条新带,15d后又出现3条;而在非胚性组织中检测到抑制性的特异蛋白条带.
- 肖显华王庆华林荣双王顺珍
- 关键词:体细胞胚花生
- TDZ诱导花生幼叶的不定芽和体细胞胚发生的组织学观察被引量:44
- 2003年
- 花生实生苗幼叶接种于MS+TDZ 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L诱导培养基上经诱导培养,继而转移到无激素培养基MS可获得不定芽和体细胞胚。组织学观察表明,花生不定芽和体细胞胚均起源于愈伤组织表层,不定芽为多细胞起源,而体细胞胚起源于单个胚性原始细胞。体细胞胚的发育经历多细胞原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚等时期发育成小植株。
- 林荣双王庆华梁丽琨肖显华
- 关键词:幼叶组织学不定芽发生体细胞胚发生植物基因工程种质改良
- 自由基清除剂对花生子叶组织培养的影响被引量:3
- 1997年
- 加一定浓度的维生素C、维生素E、还原型谷胱甘肽(GSH)、甲酸钠培养花生子叶横切片,处理组愈伤组织和胚状体的形成早于对照组,其生长状况也明显好于对照组.SOD及POD活性明显升高,MDA含量下降.表明这些物质作为自由基清除剂能改善培养花生组织的生长状况,有利于愈伤组织的形成和生长.
- 肖显华郑秋生林荣双王顺珍
- 关键词:自由基清除剂子叶SODPOD
- 花生体细胞胚发生发育过程中淀粉代谢的动态变化被引量:4
- 2000年
- 将花生实生苗的幼对接种于MS固体诱导培养基上诱导体细胞胚发生 ,用PAS染色法观察了体细胞胚发生发育过程中的淀粉代谢的动态变化 .结果表明 ,在体细胞胚的发育过程中 ,淀粉表现出两次积累高峰 ,第一次在胚性细胞团中 ,淀粉粒大而密集 ;随着胚性细胞的分裂 ,淀粉逐渐被消耗 ,到多细胞原胚期胚体内淀粉趋于消失 .球形胚期 ,淀粉粒又开始积累 ,出现第二次积累高峰 ;到成熟胚期 。
- 林荣双王庆华梁丽琨郑秋生肖显华
- 关键词:花生体细胞胚发育淀粉代谢
- 添加物影响花生外植体再生及基因转化被引量:8
- 2002年
- 取花生上胚轴为外植体,在农杆菌介导的基因载化过程中,在共育时加入一定量的烟草或马铃薯提取物,在共培养基和分化培养基中分别加入0 179mM的还原型谷胱甘肽(GSH)和0 147mM的VC+0 035mM的VE,进行培养。结果表明,添加15%(W/V)的烟草或马铃薯提取物,胚轴生长状况明显好于对照组,分化率较对照组提高10%~23 5%。自由基清除剂能明显减轻外植体褐化现象,促进外植体再生。GUS检测阳性率最高可达10 2%。
- 梁丽琨林荣双肖显华王庆华
- 关键词:添加物花生外植体再生基因转化
- 花生成熟胚叶体细胞胚形成过程中的过氧化物酶同工酶研究被引量:5
- 1998年
- 以花生成熟胚的幼叶做外植体诱导体细胞胚发生.从外植体培养到子叶胚形成期间,可溶性蛋白浓度初期下降,以后相对稳定;过氧化物酶活性逐渐升高,过氧化物同工酶谱带由2条陆续增加到10条,球形胚形成以后同工酶谱带不再变化.
- 肖显华王顺珍林荣双郑秋生
- 关键词:花生成熟胚幼叶体细胞胚同工酶过氧化物酶