毕建男
- 作品数：16 被引量：41H指数：2
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK102纤维素酶基因及其表达条件被引量：1
- 2013年
- 【目的】生物质的利用是当前生物技术研究的一个热点。本小组分离到一株高效降解纤维素球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK102,本文拟探索研究此菌的纤维素酶表达系统并寻找影响酶基因表达的关键因素。【方法】通过对NK102测序,本文界定了球毛壳菌NK102的主要纤维素酶编码基因,使用数字基因表达谱升级版(RNA-Seq)的方法得到纤维素酶基因的表达差异,然后观察了营养、物理条件下纤维素酶基因表达和酶活性变化的情况。【结果】发现随着培养时间的延长,纤维素酶基因整体上表达量升高。在所选基因中,外切葡聚糖酶、纤维二糖脱氢酶和内切葡聚糖酶基因(cbh1,cdh和egl1)的表达量最高。糖代谢的负调控因子ACE I和CreA的随时间表达量均降低,而Hap2/3/5复合体的表达量反而升高。之后检测了不同碳源培养基对纤维素酶基因表达量和酶活性的影响,发现葡萄糖为强阻遏因子,纤维二糖为其诱导物,而山梨醇没有影响。特别是,我们发现光照也影响纤维素酶基因的表达,黑暗条件明显抑制酶基因的表达。【结论】转录组学的方法可以初步探索纤维素酶表达的规律,酶基因的表达受到营养、物理条件的影响。本研究为揭示球毛壳菌降解纤维素分子机理和阐释生物质糖代谢途径提供了有用参考。
- 胡阳毕建男郝晓冉陈煌潘皎朱旭东
- 关键词：纤维素酶
- HPLO法筛选10-Deacetyl BaccatinⅢ产生菌及其萃取方法的选择
- 本文建立了HPLC筛选10-Deacetyl Baccatin Ⅲ产生菌的方法。并考察了三种不同萃取系统对发酵液中10- Deacetyl BaccatinⅢ回收的影响。
- 牛学良毕建男郝晓冉吕宪禹朱旭东
- 关键词：HPLC法发酵液菌株筛选
- 文献传递
- 纤维素降解球毛壳菌NK-102的高效遗传转化方法
- 2011年
- 【目的】在球毛壳菌(Chaetomium globosum)NK-102中,建立菌株特异性转化体系。【方法】构建新的抗性标记pUCATPH-Pgap,转化效率优于pUCATPH和pCM768。建立了PEG-原生质体和根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导的两种转化方法。【结果】原生质体转化效率为30-50个转化子/10μg DNA,抗性标记pUCATPH-Pgap效率最高。EHA105介导转化率达到3.2×102转化子/107孢子。Southern blot证明DNA随机整合于基因组中,转化子抗性稳定。【结论】两种转化体系的建立为筛选高效利用纤维素的球毛壳菌突变株奠定了基础。
- 郝晓冉纪元陈煌毕建男潘皎朱旭东
- 关键词：球毛壳菌纤维素根癌农杆菌
- 发酵液中紫杉醇的高效液相色谱分离条件的优化
- 紫杉醇是一类高效抗肿瘤药物，为了满足日益增长的癌症患者需求，真菌发酵法生产紫杉醇已经引起科学界广泛关注，本文对紫杉醇的色谱分离条件进行了优化，具有重要意义。
- 毕建男牛学良郝晓冉陈煌潘皎吕宪禹朱旭东
- 关键词：紫杉醇高效液相色谱发酵液
- 文献传递
- 一株产紫杉醇的腐生真菌及应用该菌株生产紫杉醇的方法
- 一株能产紫杉醇的腐生真菌拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora NK17(菌种保藏号CGMCC2694)，属于生物工程技术领域。本发明的菌株是第一次在拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)中发...
- 朱旭东毕建男潘皎纪元严冰
- 文献传递
- 一种高效的固相萃取－HPLC方法分离纯化真菌产紫杉醇
- 本发明涉及用一种高效的固相萃取－HPLC方法分离纯化真菌产紫杉醇，其包括应用固相萃取原理，改良性地建立了利用碱性氧化铝固相萃取结合高效液相色谱分离纯化真菌产紫杉醇的新方法，并且取得了138％的回收率，纯度达到了92％，R...
- 朱旭东吕宪禹潘皎苗会娟毕建男
- 文献传递
- 一株柏树内生真菌产生抗肿瘤药物紫杉醇被引量：11
- 2007年
- 报道了一株从柏树中分离到的产抗癌药物紫杉醇的菌株,样品采自江苏,是第一例柏树内生菌产紫杉醇的报道,表明产紫杉醇真菌的多样性.简化和改进了提取紫杉醇的方法,可以快速得到一定量的紫杉醇满足TLC 分析的需要,该方法提高了处理样品的速度,节省了时间和试剂消耗等,适用于大量样品的初筛.
- 严冰毕建男纪元王文婕赵阳朱旭东
- 关键词：紫杉醇薄层层析高效液相色谱
- 一株产紫杉醇的腐生真菌及应用该菌株生产紫杉醇的方法
- 一株能产紫杉醇的腐生真菌拟盘多毛孢Pestalotiopsis microspora NK17(菌种保藏号CGMCC2694)，属于生物工程技术领域。本发明的菌株是第一次在拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)中发...
- 朱旭东毕建男潘皎纪元严冰
- 文献传递
- 一种提高真菌产紫杉醇产率的双液相发酵方法
- 本发明涉及一种利用双液相发酵提高真菌产紫杉醇的方法。其包括在培养基中培养产紫杉醇真菌拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)NK17，当菌体生长达到平台期，加入有机溶剂继续培养，以使在所述菌株细胞...
- 朱旭东毕建男潘皎严冰刘志鹏
- 文献传递
- CH8培养液中球毛壳甲素的检测和分离
- 当今世界癌症是威胁人类健康的最大敌人，对于抗癌药物的研究对于人类健康有着重要的意义。球毛壳甲素是Sekita等于1983年新发现的抗癌化合物，为细胞分裂抑制剂，影响细胞中的收缩蛋白并能阻止细胞骨架中球肌动蛋白的盐诱导聚合...
- 陈煌郝晓冉牛学良毕建男吕宪禹朱旭东
- 关键词：高效液相色谱分离纯化
- 文献传递
