沈雁 作品数:80 被引量:382 H指数:10 供职机构: 暨南大学第四附属医院 更多>> 发文基金: 广州市医药卫生科技项目 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 电子电信 更多>>
Ⅱ型胶原的研制及其在软骨细胞培养中的应用 被引量:6 2001年 目的 :建立一套完善的提取、纯化、检测Ⅱ型胶原的生产系统 ,并以此产品应用在软骨细胞培养上。方法 :选取猪透明软骨 ,经盐酸胍、胃蛋白酶等多步抽提 ,以及DEAE纤维素的柱层析 ,制备出Ⅱ型胶原作为软骨细胞培养的基质。结果 :通过SDS PAGE电泳、氨基酸成份分析证实所制备的Ⅱ型胶原比Sigma(90 0 7 34 5 )的产品纯度高 ,以此Ⅱ型胶原为基质培养软骨细胞 ,原代至第 6代增殖快 ,6代以后的细胞呈成纤维状的去分化现象。结论 :自行研制的Ⅱ型胶原为高纯度的Ⅱ型胶原 ,应用在软骨细胞培养上 ,能使细胞增殖快 。 叶春婷 李斯明 邹海燕 唐毅 彭燕豪 沈雁 钟灿灿关键词:软骨 细胞培养 表皮干细胞仿生膜对毛囊细胞修复创面的影响 被引量:1 2015年 目的 选择新生1d大鼠表皮干细胞(ESCs)接种在胶原修饰几丁质膜(C-CBM),构建具有生物活性的覆盖物,评估其修复效果及应用前景.方法 将16只裸鼠随机分4组(n=4):Ⅰ型胶原组(A组)、几丁质膜组(B组)、几丁质膜+ ESCs组(C组)和Ⅰ型胶原修饰几丁质膜+ESCs组(D组),制备裸鼠背部全层皮肤缺损模型,术后定期取材,组织包埋切片,苏木素-伊红(HE)染色,免疫组织化学检测CD34和CD200表达,观察创面早期滤泡性毛囊增生情况.结果 6周创面愈合皮肤以D组修复较好,肉眼观察创面较厚、红润,有皮纹;A组和B组的修复则较薄、呈淡紫色,易出血;C组愈合较慢;并发现表皮巢形成有规律地增多,D组>C组>B组>A组;D组CD34和CD200在手术后3d开始有毛囊干细胞增生,CD34表达延续到第4周,CD200表达延续到第6周,而C组CD34出现在第4周后,CD200出现在7d,D组是C组的2倍,A组和B组新生毛囊干细胞较少.结论 ESCs在C-CBM上生长良好,细胞可利用胶原的天然材料的黏附性,充分扩展,并参与创面修复,这些结果显示仿生膜有可能成为诱导性生物材料. 粱蓉 沈雁 戴丽冰 李孝建 刘志河 熊喜峰关键词:表皮干细胞 几丁质 仿生膜 人髌腱干细胞的分离培养与鉴定 被引量:6 2014年 [目的]研究从人的髌腱组织中分离出肌腱干细胞,并进行体外培养扩增鉴定。[方法]通过胶原酶消化法和低密度接种培养法从人的髌腱组织中分离出肌腱干细胞。通过三期分化鉴定,分离出的肌腱干细胞具有向骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞方向分化的能力。通过流式细胞术,鉴定分离出细胞的干细胞表面标记因子的表达。通过免疫组织化学检测其肌腱细胞和软骨细胞相关蛋白的表达。[结果]从人的髌腱组织中成功分离出肌腱干细胞,大约有1.2%-1.4%分离出的细胞形成单细胞克隆。分离出的细胞表达CD44+,CD105+,CD29+,CD45-,和CD14-,并具有向不同细胞分化的能力;另外,肌腱干细胞不仅表达肌腱细胞相关蛋白,如Ⅰ型胶原和tenascin C,也同时会表达软骨细胞相关的蛋白,如Sox 9和Ⅱ型胶原,但其并不表达糖氨多糖。[结论]成功分离鉴定人髌腱干细胞,虽然与间充质干细胞有相同的干细胞特性,是不同于其他间充质干细胞的一种特殊的间充质干细胞。肌腱干细胞的成功分离鉴定有利于以后干细胞相关的肌腱组织修复的研究,并有助于更好的理解肌腱干细胞在肌腱相关疾病和修复的作用。 秦胜男 王文 傅世铨 陈鸿辉 董飞 李爱国 沈雁 程玉姗 陈启明关键词:髌腱 聚乙烯醇编织构建组织工程前交叉韧带的初步研究 目的:探讨体外编织构建组织工程前交叉韧带支架材料的可行性.
方法:用组织块和胶原酶消化培养法在体外分离培养人前交叉韧带细胞,并将其在体外扩增后种植于编织构建的聚乙烯醇韧带支架材料上进行观察.
结果:该... 白利明 陈鸿辉 邹海燕 叶春婷 沈雁 戴丽冰 梁佩红关键词:聚乙烯醇 前交叉韧带 文献传递 草木犀流浸液片剂减轻浅Ⅱ度供皮区创面水肿疼痛和出血的临床研究 被引量:3 2014年 目的探讨草木犀流浸液片剂(草木犀)用于减轻浅Ⅱ度供皮区创面水肿、渗出、疼痛的疗效。方法选择60例烧伤患者,随机分为治疗组、对照组,各30例,两组创面形成方式相同,供皮区不用任何抗感染及促创面愈合药物。治疗组移植术前1 d开始口服草木犀,每次4片,每日3次,连服7 d,对照组不服用草木犀,于移植术后2、3、6 d对两组患者的供皮区水肿、渗出、疼痛情况评分,并进行比较。结果治疗组在术后2、3、6 d的创面水肿、渗出、疼痛评分及总分均明显低于对照组(P均<0.05),且评分随时间延长下降(P均<0.01),处理因素与时间均无交互作用(P均>0.05)。治疗组患者服药期间未见药物所致的不良反应。结论草木犀能有效减轻浅Ⅱ度供皮区创面水肿、渗出和疼痛症状,服用安全。 梁蓉 沈雁 戴丽冰 刘大钺关键词:草木犀 水肿 疼痛 渗出 内源性一氧化氮在人前交叉韧带H( ACL)细胞增殖的表达水平 2005年 目的检测人前交叉韧带(HACL)细胞生长增殖过程中内源性一氧化氮(NO)表达水平。方法分离和培养HACL细胞,用脂多糖(LPS)作诱导培养HACL细胞表达iNOS,用L-硝基精氨酸(LN-MMA)作为内源性NO的阻断剂,间接测定加入单用和联用LPS和LN-MMA后的内源性NO的变化。结果LPS可促进HACL产生内源性NO,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),LN-MMA可抑制HACL产生内源性NO,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),两者联用与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论在LPS的诱导下HACL细胞的生长增殖过程中有内源性NO参与,LN-MMA可抑制HACL细胞产生内源性NO,NO使HACL的增殖减慢。 梁伟国 沈雁 陈鸿辉 唐毅 钟灿灿关键词:一氧化氮 甘露醇对新西兰兔严重烧伤早期血清TNF-α和IL-6的影响及其脏器功能的保护机制 被引量:8 2013年 目的探讨甘露醇补液疗法对严重烧伤新西兰兔组织器官的保护作用及其保护机制。方法将12只新西兰兔构建30%TBSA深度烧伤模型后,随机分为对照组和甘露醇组,烧伤后1 h开始补液治疗,分别于烧伤前、烧伤后1、4、8、24、48 h收集血清及48 h总尿液,用夹心酶联免疫吸附法测定血清、尿中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;生化法测定ALT、AST、GGT、CK、CK-MB、BUN和Cr含量。结果烧伤后1 h两组兔血清TNF-α和IL-6开始升高,伴随ALT、AST、GGT、CK、CK-MB、BUN和Cr升高;与对照组相比,甘露醇组兔48 h尿液TNF-α和IL-6总排泄量较高(P<0.05),血清TNF-α和IL-6水平则较低(P<0.05),ALT、AST、GGT、CK、CK-MB、BUN和Cr含量也较低(P<0.05)。结论甘露醇补液疗法可降低烧伤早期血中炎症介质TNF-α和IL-6的含量,减轻心、肝、肾的功能损害。 梁蓉 荣新洲 张涛 沈雁 戴丽冰 黄粤关键词:烧伤 甘露醇 白细胞介素-6 BMP-2对人退变椎间盘髓核细胞影响的实验研究 目的 探讨BMP-2对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响,观察正常髓核细胞高表达而退变髓核细胞表达阴性的生长刺激因子对退变髓核细胞的影响.方法 分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,取第2代髓核细胞,随机将退变椎间盘髓核细胞分... 叶冬平 梁伟国 戴丽冰 沈雁关键词:骨形态发生蛋白-2 正交试验设计建立多因素的海藻酸钠复合载体立体培养软骨细胞体系 被引量:1 2008年 目的通过正交试验设计研究四种主要因素对软骨细胞增殖的影响,探讨海藻酸钠胶体复合载体体外培养软骨细胞增殖的最佳配比培养体系,为组织工程种子细胞的研究提供实验依据。方法建立单层贴壁和海藻酸钠复合载体立体培养细胞模型,采用正交试验4因素2-wav和4因素3-way设计,用XTT方法检测软骨细胞在一定浓度的复合因子包括碱性成纤维细胞生长因子、透明质酸钠、纤维连接蛋白、壳聚糖的完全培养基中的增殖情况;采用倒置、相差、激光共聚焦显微镜的形态学观察;采用LDH检测复合材料对细胞的毒性反应,确定体外培养体系方案。结果正交试验设计能确定各因素的有效浓度及配比方案,其中碱性成纤维细胞生长因子与透明质酸有共协同作用,在DMEM/Ham's F12复合培养基的海藻酸钠载体支架中培养软骨细胞能快速增殖,细胞数48h就增殖3倍多,Safranine O GAG染色显示传至9代仍然产生大量蛋白聚糖基质;LDH检测未见毒副作用;该复合载体具有良好的成形性和组织相容性。结论在DMEM/Ham's F12复合培养基的海藻酸钠载体中培养能快速增殖并有利于维持软骨细胞表型及功能的表达。 梁伟国 沈雁 关广雄 杨小红 戴丽冰 梁佩红 谭见容 李超霞关键词:软骨细胞 正交试验 MTT法测定鸦胆子对人瘢痕成纤维细胞生长的影响 被引量:6 2001年 沈雁 李叶扬 唐毅 钟灿灿 邹海燕 李斯明关键词:瘢痕 成纤维细胞生长 鸦胆子 MTT法