潘熙萍
- 作品数:7 被引量:41H指数:4
- 供职机构:杭州师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金:浙江省科技厅公益技术研究农业项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 芜菁花叶病毒的分离鉴定及其多克隆抗体的制备与应用被引量:3
- 2013年
- 从呈花叶症状的芥菜病株上分离到毒源,经CP基因克隆、序列分析以及电镜观察鉴定为芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)。利用提纯的病毒免疫新西兰大白兔,获得TuMV多克隆抗体,其效价为1∶40 000,多抗仅对TuMV起特异性反应。以1∶10 000稀释度为TuMV多抗最适工作浓度,建立TuMV间接酶联免疫吸附测定法(ID-ELISA),该方法检测到提纯病毒的绝对量约1.765 ng。说明本试验所建立的TuMV ID-ELISA检测方法可有效运用于TuMV的检测。
- 潘熙萍林芳郑思文韩洁梅方丹施曼玲
- 关键词:芜菁花叶病毒CP基因多克隆抗体间接ELISA
- 除草剂麦草畏和草甘膦免疫检测方法的建立
- 随着现代农业技术的发展,除草剂在我国的使用面积越来越广,其在农产品上残留危害也日益严重,对食品安全构成严重的威胁。除草剂的残留不仅对人类健康,而且也对生态环境产生巨大影响。因此建立一种简单、快速、灵敏的除草剂残留检测方法...
- 潘熙萍
- 关键词:麦草畏草甘膦单克隆抗体多克隆抗体间接竞争ELISA
- 草甘膦残留检测技术的研究进展被引量:2
- 2011年
- 文章对近年草甘膦残留检测技术包括高效液相色谱、高效液相色谱-质谱联用、气相色谱、气相色谱-质谱联用、化学分析、分子印迹-化学发光分析和免疫分析等的研究进展做一综述,并阐述了各检测技术的原理、优缺点及应用,为草甘膦残留检测研究提供参考.
- 潘熙萍楼佳俊张高精朱晨晨戴建辉施曼玲
- 关键词:草甘膦
- 草甘膦残留的酶联免疫分析方法的建立被引量:20
- 2012年
- 通过碳化二亚胺法将草甘膦(Glyphosate,GLY)分别与卵清蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原和包被原。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测表明,草甘膦与牛血清白蛋白和卵清蛋白的偶联比分别为11∶1和9∶1。合成的免疫原作用新西兰大白兔制备出草甘膦多克隆抗体,ELISA检测抗体溶液效价为1∶1×107,该抗体不与草甘膦的结构类似物增甘膦和双甘膦起交叉反应。以此抗体建立了草甘膦间接竞争ELISA检测方法(ciELISA),其线性范围为0.78~100μg/mL,线性回归方程为y=15.851 0 lnx+7.780 5,R2=0.993 8。草甘膦的检测限为IC10=1.15μg/mL,IC50=14.35μg/mL。在添加回收试验中,草甘膦添加值5和10μg/g时,玉米粉中的草甘膦回收率为104.12%和81.37%,小麦粉中的回收率则分别为118.94%和为109.39%。结果表明,采用所制备的多克隆抗体而建立的草甘膦ciELISA方法可有效地应用于玉米粉和小麦粉中草甘膦的残留检测。
- 潘熙萍楼佳俊张高精张丽莎施曼玲
- 关键词:多克隆抗体
- 纤维素分解菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量:4
- 2010年
- 对从土壤中分离到的4株纤维素分解细菌菌1、菌2、菌3、菌4进行生物学特征研究。4种菌株都能分解稻草和滤纸,其中菌1对稻草和滤纸的分解能力最强,分解效率分别为35.11%和26.15%。4种菌株在NaNO3、(NH4)2SO4作为氮源时生长缓慢且酶活力低,而在蛋白胨作为氮源时酶活力则达到较高水平。菌1、菌2、菌3、菌4产生纤维素酶的最适温度分别为28、20、28、40℃。4株纤维分解菌产生纤维素酶的最适pH值为6~7。菌1与荧光假单胞菌(Pseudonomas fluorescens)16S rDNA核苷酸同源率为99.2%。根据形态学、生理生化检测以及16S rDNA核苷酸序列分析结果,鉴定菌1是荧光假单胞菌。
- 张花美龚志伟潘熙萍施曼玲
- 关键词:纤维素分解菌荧光假单胞菌RDNA生物学特性
- 双酚A残留酶联免疫分析方法的研究及应用被引量:7
- 2014年
- 为了建立双酚A残留的酶联免疫分析方法,采用碳化二亚胺法将半抗原双酚酸(BHPVA)分别与卵清蛋白(OVA)和牛血清蛋白(BSA)偶联,制备免疫原BHPVA-OVA和包被原BHPVA-BSA。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测表明BHPVA与BSA和OVA的偶联比分别为12∶1和16∶1。BHPVA-OVA免疫新西兰大白兔获得抗双酚A的多克隆抗体,抗体ELISA效价为1∶1×107。基于该抗体建立双酚A间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法,其检测的线性范围为0.02-100ng·mL-1,线性回归方程y=9.0326 ln x+39.105,R2=0.9975,双酚A的检测限为IC10=0.04ng·mL-1。采用所建立的ciELISA方法均检测出8种塑料食品袋中的双酚A残留,迁移析出量分别从4.9到31mg·L-1,批内和批间变异系数均小于12.48%,说明本试验所建立ciELISA法可有效地用于塑料食品袋中的双酚A迁移量的测定,不仅具有高度的灵敏性,而且具有较好的稳定性。
- 张丽莎吕型超陈涵倩邓杰潘熙萍施曼玲
- 关键词:双酚A多克隆抗体塑料食品袋
- 抗麦草畏多克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立被引量:4
- 2012年
- 为建立麦草畏的免疫分析方法,采用碳化二亚胺法将麦草畏(DIC)与卵清蛋白(OVA)和牛血清蛋白(BSA)偶联,分别合成免疫原与包被原;用合成的免疫原免疫新西兰大白兔获得抗麦草畏多克隆抗体,该抗体效价为1∶1.28×105,且该抗体与麦草畏的结构类似物2,3,5-三氯苯甲酸、2,3,6-三氯苯甲酸、2-氨基-3,5-二氯苯甲酸的交叉反应率均小于0.1%。以包被原1∶8 000和多抗溶液1∶80 000的稀释倍数为工作浓度,建立麦草畏间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法,此方法检测麦草畏的线性范围为1~100ng.mL-1,线性回归方程为y=8.684 4ln x+15.001,R2=0.994 4,最低检测限为IC20=1.779ng.mL-1;玉米粉和面粉空白样品的麦草畏添加回收实验表明,麦草畏添加值为5~30μg.kg-1时,玉米粉中的麦草畏回收率为53.08%~92.37%,面粉的回收率则分别为66.5%~94.63%。
- 张花美李因来潘熙萍蒋爱兰余榛榛施曼玲
- 关键词:麦草畏多克隆抗体