熊科
- 作品数:60 被引量:74H指数:5
- 供职机构:北京工商大学更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程理学更多>>
- 基于宏基因策略的新颖木聚糖酶基因cbxynA克隆及其重组酶酶学性质被引量:1
- 2019年
- 研究构建了库容量约为1.3×10^4个克隆子且外源片段的总长为30Mb的土壤宏基因组文库。基于功能策略,从文库中筛选到分解木聚糖底物的阳性克隆子。该克隆经序列分析发现一个822bp的潜在的编码木聚糖酶基因(cbxynA)的开放阅读框,其编码的氨基酸序列与来自古细菌属编码的木聚糖酶的相似度最高仅为45%,说明该序列为一条未知的新序列。cbxynA在大肠杆菌中的重组表达产物的分子质量为29ku,与预测结果一致。对其原核表达条件进行优化,结果表明:质粒在培养5h后加入0.7mmol/LIPTG,23℃下诱导25h后表达,木聚糖酶活力为52U/mL,较初始值提高4.3倍。而重组酶(CBXYNA)最适pH和最适温度分别为5.2和55℃。金属离子Na^+、K^+、Li^+、Ca^2+能提高该酶的酶活,而另外一些金属离子如Mg^2+、Mn^2+、Zn^2+、Fe^3+、Al^3+、Cu^2+能抑制其活性。该酶以水溶性玉米芯木聚糖、燕麦木聚糖、水不溶性木聚糖为底物时,其相对酶活力分别为162%,139%,74%。
- 熊科崔晓亭王小艺赵峙尧柳佳芸裴鹏刚邓蕾熊苏玥
- 关键词:土壤微生物宏基因组文库木聚糖酶酶学性质
- 一种源于黑曲霉菌的高产特异性功能低聚肽的酶及其工程菌
- 本发明属于基因工程领域,提供了一种源于黑曲霉菌M00988的高产特异性功能低聚肽的酶及其工程菌。本发明通过基因改造获得能够高产低F值寡肽的羧肽酶及生产该酶的工程菌。通过对特殊位点的改造,提高了羧肽酶切除芳香族氨基酸的效率...
- 熊科柳佳芸邓蕾裴鹏钢
- 文献传递
- 一种山药淀粉基可食用膜及其制备方法
- 本发明涉及一种山药淀粉基可食用膜及其制备方法,属于食品包装领域。本发明的山药淀粉基可食用膜,含有特定比例的改性山药淀粉、普鲁兰多糖、明胶、甘油和CMC。与本发明之前的山药淀粉膜相比,本发明的山药淀粉基可食用膜,抗拉强度、...
- 李秀婷朱运平滕超熊科
- 文献传递
- 蛋白酶水解底物特异性机制研究进展被引量:10
- 2019年
- 蛋白酶酶解底物位点的专一性,对酶解产物的组成与比例都有较大影响,直接影响最终产物的价值。酶法水解蛋白质存在水解效率低、特异性成分产率低以及后期纯化成本高等问题,使得特异性的酶解方式难以实现大规模工业化应用。解决这一问题则亟需探究蛋白酶特异性水解机理,得到酶解产物的分子机制。基于此,文章围绕蛋白酶的水解特异性,综述了目前与特异性相关的底物基团性质、结合部位氨基酸性质与空间位置,以及酶分子表面电荷等方面的相关机制,以期为今后蛋白酶的特异性酶解体系研究与应用提供参考。
- 熊科邓蕾柳佳芸裴鹏钢
- 关键词:蛋白酶特异性表面电荷
- 链霉菌L10608产木聚糖酶纯化及特异水解底物生成益生元型产物研究被引量:3
- 2017年
- 研究对前期筛选的一株产木聚糖酶菌株L10608进行鉴定,判定其为链霉菌。并对该菌株所产木聚糖酶进行纯化得到电泳级纯度木聚糖酶L10608-Xyn11。该酶蛋白质分子量为24 k Da。探究L10608菌株所产木聚糖酶以商品玉米芯木聚糖、商品燕麦木聚糖、自制水不溶性玉米芯木聚糖为底物时的水解特性,结果表明该菌所产木聚糖酶对木三糖有很强的水解作用,以自制水不溶性玉米芯木聚糖为底物水解时效果最为明显,底物中木三糖的含量下降了1.521 mg/m L,产物中木二糖增加了1.635 mg/m L,木糖仅增加了0.180 mg/m L。菌株L10608的酶解产物中低聚木糖的产量远高于木糖,且高产低聚木糖中的主要有效成分木二糖,其水解特异性表明该菌有潜力作为益生元型低聚木糖的生产菌株。
- 熊科熊苏玥崔晓亭侯洁鲍艺佳孙佳月李秀婷
- 关键词:木聚糖酶
- 肽酶体系生成高F值寡肽机制的探讨被引量:3
- 2020年
- 高F值寡肽是一种由高支链氨基酸含量与低芳香族氨基酸含量组成的小肽体系。因为它独特的氨基酸组成,使其具有独特的生理功能。本文概述了高F值寡肽的生产现状及通过酶法生成高F值寡肽的机制。针对目前酶法生产高F值寡肽制品存在的问题,就内、外肽酶等肽酶体系实现高效生成高F值寡肽的机制进行了探讨。
- 柳佳芸高思宇朱运平滕超郦金龙李秀婷熊科
- 关键词:高F值寡肽酶解制备内肽酶
- 氧化电解水清除黄曲霉毒素B_1生成产物及其安全性评价
- 2014年
- 真菌毒素是引发食品安全问题的重要污染原因。黄曲霉毒素B1(AFB1)因污染范围广,对人和各种生物毒性极强而引起广泛关注。本文利用酸性氧化电解水清除AFB1,对生成产物进行辨识和安全性评价。揭示电酸性氧化电解水清除AFB1的机制。试验结果表明:经高分辨质谱分析,酸性氧化电解水清除AFB1生成的主要产物相对分子质量为364,化学式为C17H13Cl O7。结合NMR分析,确认未知产物为8-氯-9-羟基-Aflatoxin B1(8-Cl-9-OH-AFB1)。它是具有两亲性质的有机分子。该产物的安全性研究结果表明:产物无致突变性,其半数致死剂量浓度IC50值约为150 mmol/L,对细胞无毒害作用。本文明确了酸性水清除AFB1的应用安全性,为清除AFB1污染提供了1种安全有效,具有较好应用前景的新途径。
- 熊科王晓玲李秀婷孙宝国刘海杰
- 关键词:黄曲霉毒素B1致突变性细胞毒性
- 基于核酸适配体的侧流层析技术同步检测赭曲霉毒素A和黄曲霉毒素B1被引量:6
- 2021年
- 目的建立基于适配体互补链同时检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OT_(A))和黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB_(1))2种真菌毒素的荧光试纸条。方法通过优化2种适配体的浓度以及缓冲体系的pH值,提高同步检测OT_(A)和AFB_(1)的灵敏度和准确性。结果OT_(A)和AFB_(1)的T线(T_(O)和T_(A))和C线荧光强度比值与对应真菌毒素的浓度对数具有良好的线性关系,线性范围为0.5~50 ng/mL,相关系数r^(2)分别为0.9887和0.9910,检出限低至0.51和0.38 ng/mL。通过对花生和葡萄干进行加标回收和实际样品检测,试纸条检测的OT_(A)和AFB_(1)的回收率分别为82.06%~109.69%和83.34%~110.06%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.89%~8.17%,检测结果与高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-mass spectrum/mass spectrometry,HPLC-MS/MS)一致。结论该生物传感器可在20 min内实现花生和葡萄干等样品中OT_(A)和AFB_(1)的同步快速检测,并具有成本低、检测速度快和易于操作等优点,可为多种真菌毒素的同步快检提供技术支撑。
- 王宇龙王荷赵志磊熊科陈爱亮王蒙
- 关键词:赭曲霉毒素A黄曲霉毒素B1适配体
- 纳米球形聚电解质刷固定化酶合成及性质表征研究
- 2019年
- 为研究用光乳液聚合法合成以聚苯乙烯为核、接枝丙烯酸为单体的纳米球形聚电解质刷,采用透射电子显微镜、傅里叶红外光谱、核磁共振氢谱及激光粒度仪对微球结构进行表征,并以球刷为载体,对碱性蛋白酶进行固定化研究。结果表明:制备的纳米球形聚电解质刷载体平均粒径为80 nm左右,尺寸均一,分散性良好。碱性蛋白酶优化固定化条件为缓冲液pH值9.0、固定化时间6 h、酶液添加量1.2 mg/mL。固定化酶与游离酶比较,最适pH值由游离酶的11.0变化为9.0,最适反应温度由游离酶的45℃提高到60℃,且热稳定性、酸碱稳定性均较游离酶有所提高。经纳米球形电解质刷固定化的碱性蛋白酶,酶的应用范围扩大,更有利于工业化生产。
- 熊科高思宇柳佳芸邓蕾裴鹏钢李秀婷
- 关键词:碱性蛋白酶固定化酶
- 吡咯伯克霍尔德氏菌的应用及其产脂肪酶的方法
- 本发明涉及吡咯伯克霍尔德氏菌的应用及其产脂肪酶的方法,属于环境微生物应用领域。本发明的咯伯克霍尔德氏菌B1213的用途为产脂肪酶;咯伯克霍尔德氏菌B1213培养液,优化后的脂肪酶活为180‑250U/mL;所述咯伯克霍尔...
- 郦金龙李秀婷朱运平滕超熊科申卫家
- 文献传递