王东艳
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 灯盏花素干预体外培养大鼠脑皮质神经元的存活与生长被引量：2
- 2014年
- 背景:神经生长因子在维持中枢神经系统神经细胞的存活、分化,促进其生长、发育,维持其功能方面具有不可替代的作用。目的:观察灯盏花素对SD大鼠大脑皮质体外培养神经元生长的影响,并初步探讨其机制。方法:取新生SD大鼠胚胎,取其大脑皮质后,对神经元进行原代培养,随机分为3组,其中灯盏花素组加入10 g/L灯盏花素,对照组加入等量生理盐水,正常组不作任何处理,各组又分为24 h、48 h亚组。对24孔板中各组细胞各时间点采集图像,之后采用RT-PCR技术检测神经生长因子、酪氨酸激酶A mRNA的表达变化。对96孔板中各组细胞不同时间点采用MTT检测神经元生长活力。结果与结论:正常组和对照组在各时间点细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力无明显差异(P>0.05),但正常组及对照组均有随时间点延长,3个指标均上调(P<0.05),灯盏花素组细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力均较正常组及对照组升高(P<0.05)。神经生长因子及TrkA mRNA的表达在正常组和对照组在各时间点无明显差异(P>0.05),灯盏花素组各时间点较正常组和对照组上调(P<0.05)。提示灯盏花素促进SD大鼠脑源性神经元的存活、生长,其机制可能是通过上调神经生长因子及其受体TrkA的表达发挥作用。
- 李俊彦王东艳杨金伟赵楠李力燕程敬茹茹金郭建辉刘俊
- 关键词：灯盏花素神经元神经生长因子酪氨酸激酶国家自然科学基金
- 一种新生SD大鼠皮质源性神经元的培养方法被引量：4
- 2016年
- 背景:神经元的体外原代培养在研究神经系统的发育、再生、信号转导机制、神经药理学以及基因表达方面具有极其重要的地位。目的:建立一种操作更加简单且能够得到较高纯度新生SD大鼠皮质神经元原代培养的方法。方法:取1 d新生SD大鼠皮质。传统方法实验组:取整个皮质;改良方法实验组:取SD大鼠表面2.0-3.0 mm处皮质。木瓜蛋白酶消化后离心,制备成单细胞悬液,以1×105/孔的浓度接种至含神经元培养液的24孔培养板进行原代培养。培养3 d时采用免疫细胞化学染色方法,使用神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2双标记法鉴定所培养的细胞;采用倒置相差显微镜观察6,24,48,72 h及5,7 d细胞数和突起长度并记录。结果与结论:1所培养的细胞可表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2,因此所培养细胞为神经元,可用于之后实验;2实验组培养至第3天时神经元的纯度已达到峰值92%,而普通实验组神经元的纯度为51%;32组细胞培养至6 h均已贴壁且长处小突起,培养至第3天时,细胞已初步形成神经网络,培养至5 d时神经网络密集;4研究所用方法简便能够稳定的培养出纯度较高的神经元,可以用于SD大鼠皮质源性神经元的相关实验研究。
- 王东艳杨金伟程敬茹马微李兴统郭建辉李力燕
- 关键词：神经元皮质神经元SD大鼠
- 七叶皂苷对大鼠体外培养神经元的影响及其与NGF信号系统的关系被引量：1
- 2014年
- 为了探讨七叶皂苷对SD大鼠大脑皮质体外培养神经元生长的影响及其与神经生长因子(NGF)信号通路的关系.取新生SD大鼠胚胎的大脑皮质,在24或96孔板中进行原代培养神经元,随机分为正常组(A组)、对照组(B组)、七叶皂苷组(C组),其中C组在细胞长至80%融合度时加入10 mg/mL七叶皂苷(采用生理盐水稀释),B组加入等量生理盐水,A组不作任何处理,各组又分为24 h、48 h亚组.对24孔板中各组细胞各时间点均采集图像,之后采用逆转录-聚合酶链式反应(Reverse Transcription polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术检测NGF、TrkA mRNA的表达变化.对96孔板中各组细胞各时间点采用MTT检测神经元生长活力.结果显示A组和B组在各时间点细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力无明显差异(P>0.05),但A组及B组均有随时间点延长,三个指标上调的时间点(P<0.05),C组细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力均较A组及B组升高(P<0.05).NGF及TrkA mRNA的表达在A组和B组在各时间点无明显差异(P>0.05),C组各时间点较A组和B组上调(P<0.05),但随时间的延长,各组组内比较无统计学意义(P>0.05).表明七叶皂苷可促进SD大鼠脑源性神经元的存活、生长,其机制可能是通过上调NGF及其受体TrkA的表达来实现.
- 李俊彦罗涛杨金伟王东艳茹金李力燕刘俊
- 关键词：七叶皂苷神经元神经生长因子酪氨酸激酶A
- 灯盏花素对大鼠神经元的影响及其与BDNF信号通路的关系被引量：3
- 2014年
- 探讨灯盏花素对SD大鼠大脑皮质体外培养神经元生长的影响及其与脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路的关系。结果示灯盏花素组在细胞数、胞体面积、突起长度及细胞活力方面均较对照组及正常组升高(P<0.05)。BDNF及TrkB mRNA的表达在灯盏花素组也较对照组和正常组升高(P<0.05)。灯盏花素促进SD大鼠脑源性神经元的存活、生长,其机制可能是通过上调BDNF及其受体TrkB的表达。
- 李俊彦程敬茹杨金伟李力燕王东艳罗涛郭建辉刘俊
- 关键词：灯盏花素神经元脑源性神经营养因子
