王啸林
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 适配子介导siRNA靶向递送系统的研究进展被引量：8
- 2012年
- RNA干扰技术(RNAi)作为一种新型的基因治疗技术已应用到许多疾病的体外研究中,但靶向递送技术仍是目前制约小干扰RNA(siRNA)药物成功进入临床的关键技术问题。寡核苷酸适配子具有高亲和性、高靶向性,成为递送siRNA的重要手段。本文综述了siRNA体内递送的主要障碍,以及近年来适配子介导的siRNA靶向递送系统的最新研究进展。
- 王啸林王清清宋海峰
- 关键词：SIRNA适配子靶向药物递送
- 前列腺表面膜抗原适配子-阳离子脂质体-双小干扰RNA复合物治疗前列腺癌的体外分析被引量：3
- 2016年
- 目的制备基于前列腺表面膜抗原(prostate surface membrane antigen,PSMA)适配子靶向前列腺癌的双小干扰RNA(small interference RNAs,siRNA)的新型阳离子脂质体,并分析该适配子-脂质体-双siRNA复合物对前列腺癌细胞的靶向性及抑制增殖作用。方法采用逆向蒸发法制备阳离子脂质体-双siRNA[Polo样激酶1(Polo-Like Kinase 1,PLK1)和B7H3(B7-homolog 3)基因]复合物,并对阳离子脂质体、鱼精蛋白与总si RNA比例进行优化。脂质体包裹双siRNA后,通过特异反应插入PSMA适配子A10。对PSMA适配子介导的双siRNA靶向入胞递送系统进行粒径和Zeta电位评价;以LNCap细胞为模型,Western blot法检测脂质体-双功能si RNA对靶基因的沉默效应;基于竞争结合的流式法检测递送系统对靶细胞的亲和性;增殖活性试验检测递送系统体外对前列腺癌细胞的抑制作用。结果阳离子脂质体与总siRNA的最佳比例为300∶1,鱼精蛋白与总siRNA的最佳比例为1.7∶1。A10-脂质体-双siRNA递送系统可以与细胞表面PSMA抗原结合,具有较高的细胞亲和性;对LNcap细胞中PLK1和B7H3基因可以高效沉默;对肿瘤细胞增殖的抑制作用大于单独沉默PLK1或B7H3基因,双沉默siRNA递送系统在抑制肿瘤细胞生长方面具有协同效应。结论制备的PSMA适配子-脂质体-双siRNA递送系统具有前列腺癌细胞靶向性,且在抑癌方面可以发挥协同作用,提示了该双功能siRNA基因治疗药物系统的潜在应用性。
- 付洁王啸林刘玉杰张晶王芳向慎思高新王清清宋海峰
- 关键词：小干扰RNA适配子PLK1前列腺癌
- 阳离子脂质体-小干扰RNA复合物的处方优化及其治疗前列腺癌的体外研究被引量：3
- 2014年
- 目的研究小干扰RNA(siRNA)的新型阳离子脂质体的制备,考察此脂质体-小干扰RNA复合物对LNCap细胞中靶mRNA的沉默效应。方法采用逆向蒸发法制备新型阳离子脂质体,并加入鱼精蛋白和小牛胸腺DNA以增加其对小干扰RNA的压缩,评价其理化性质;以LNCap细胞为模型,以lipofectamine 2000作为阳性对照,用RT-PCR方法研究脂质体-小干扰RNA复合物对前列腺癌细胞中靶基因Plk-1的沉默效应。结果制备的脂质体(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化铵胆固醇的最佳比例为3∶1,粒径为(117±4.3)nm,Zeta电位为(47±3.6)mV;新型阳离子脂质体小干扰RNA复合物的入胞效率显著提高,荧光显微镜显示LNCap细胞内小干扰RNA含量明显升高。结论本实验所制备的阳离子脂质体具有较高转染效率,脂质体-小干扰RNA复合物的沉默效果显著。此新型阳离子脂质体有望成为小干扰RNA等基因治疗药物的高效传递系统。
- 王啸林葛华王清清李淼高新付洁宋海峰
- 关键词：阳离子脂质体小干扰RNALNCAP前列腺癌
- 寡核苷酸药物定量分析方法的研究进展被引量：1
- 2011年
- 寡核苷酸作为治疗药物在抗肿瘤、病毒治疗、免疫调节等方面有着良好的应用前景。寡核苷酸药物的药代动力学的研究和质量控制均要求具备相应的定量分析方法。本文综述了近年来在寡核苷酸药物药代动力学评价及生产质量控制中常用的几种定量分析方法,主要包括质谱法、毛细管电泳法、定量PCR法以及杂交技术相关的方法,阐述了各方法的特点、应用前景及其最新研究进展。
- 李娜方珍文王啸林王清清宋海峰
- 关键词：寡核苷酸质谱法毛细管电泳法定量PCR法杂交技术
- 新型“适配子—脂质体”siRNA靶向入胞递送系统的构建及其应用于前列腺癌治疗的实验研究
- 前列腺癌是目前男性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,近年来其发病率逐年上升也严重影响男性健康。早期诊断和手术切除是目前治疗前列腺癌较为有效的方法,但是手术切除治疗效果有限。随着近年来生物化学与分子生物学的快速发展,如何在分子...
- 王啸林
- 关键词：脂质体SIRNA适配子PSMA
- 文献传递
