王昌庆
- 作品数：21 被引量：20H指数：3
- 供职机构：吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- RNAi靶向NP、L基因抑制鹅源副黏病毒在CEF中的复制
- 前言:本试验将已构建好的针对GPMV NP及L基因的表达shRNA的载体:NP14、NP18、L60、L145转染CEF细胞后接种GPMV,观察RNAi在CEF中对GPMV的抑制作用。接毒后36 h RealTime R...
- 刘美李少丽王昌庆吴昊邱蜜蜜尹仁福丛彦龙丁壮
- 文献传递
- 拯救NA-1株GPMV微型基因组的构建及鉴定
- 前言:本研究用反向遗传操作技术拯救NA-1株GPMV,用pVAX-1载体作骨架,构建了包含病毒两个末端及.HdvRz序列的微型基因组。材料与方法:首先用.PCR方法将CMV启动子
- 李少丽王昌庆丛彦龙丁壮孙玉章
- 文献传递
- NA-1株鹅源新城疫病毒全长cDNA的获得
- 前言本研究采用"分段克隆法"利用病毒cDNA本身含有的酶切位点,将NA-1株鹅源新城疫病毒的结构基因分六段进行扩增与连接,并与本实验室RACE方法得到的在病毒转录和复制过程中起重要调控作用的3’端前导序列和5’尾随序列连...
- 李少丽王昌庆丁壮丛彦龙尹仁福
- 文献传递
- 鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆的构建及鉴定被引量：4
- 2009年
- 应用cRACE法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA 5′末端。参照Peter等的方法设计引物,扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA的3′末端。根据GenBank上发表的鹅源副黏病毒序列设计6对引物,应用RT-PCR方法分6段扩增此病毒结构基因序列,并将其连接完成后与连接有鹅源副黏病毒NA-1株末端序列的转录载体连接,构建得到全长cDNA克隆。鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆成功构建,为下一步病毒的拯救奠定坚实的基础。
- 王昌庆丛彦龙李少丽丁壮尹仁福吴昊刘美邱蜜蜜母连志
- 关键词：鹅源副黏病毒RACE全长CDNA拯救
- “拯救”NA-1株鹅源副黏病毒微型基因组的构建被引量：3
- 2009年
- 根据GenBank上已发表的NA-1株GPMV全序列设计并合成2对特异性引物,克隆得到GPMV的Leader及Tralier序列,与T7启动子、丁肝病毒核酶序列及T7终止子重叠PCR连接后,将连接产物克隆至改造的pVAX-1载体中,并用增强型绿色荧光蛋白基因代替GPMV的整个编码区,只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控序列,酶切、测序及荧光鉴定后,与pCI-NP、pCI-P及pCI-L等3个辅助质粒共转染可表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系,结果绿色荧光蛋白得到表达,表明成功构建了"拯救"病毒的微型基因组。
- 李少丽丛彦龙王昌庆丁壮尹仁福孙玉章母连志
- 关键词：病毒拯救
- 检测鹅源新城疫病毒实时荧光定量PCR方法的建立
- 前言鹅源新城疫是现代化集约化养鹅业的主要疫病之一。经流行病学和临床病理学诊断发现,各种日龄的鹅均具有易感性,发病率为19%～100%,平均为27.67%,死亡率为8%～100%,平均为18.19%,其中15日龄的雏鹅的发...
- 尹仁福刘新鑫丁壮刘美王昌庆李少丽吴昊邱蜜蜜
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- 利用RNAi技术靶向新城疫病毒P基因抑制其在鸡胚成纤维细胞上的复制被引量：3
- 2009年
- 构建了针对新城疫病毒NDV NA-1株P基因的RNAi质粒;转染质粒36 h后接种NDV,通过对病毒滴度测定、实时荧光定量PCR和细胞病变结果分析,表明其能抑制NDV在CEF中的复制和增殖。本试验为进一步研究NDV复制机理和抗病毒治疗提供了技术基础。
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- 关键词：新城疫病毒RNA干扰鸡胚成纤维细胞
- 应用巢式PCR检测猪戊型肝炎病毒核酸及其序列分析
- 根据GENBANK注册的AJ272108等序列,参考Meng等的文献,利用Oligo6应用软件设计内外两对引物,采用RT-PCR技术对本实验室分离的猪戊型肝炎病毒进行探索性扩增,并对测定的序列进行分析,结果用套式引物扩增...
- 邱蜜蜜丛彦龙李志杰刘美尹仁福吴昊李少丽王昌庆丁壮
- 关键词：猪戊型肝炎病毒巢式PCR
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- 鹅源新城疫病毒NA-1株基因组末端序列的扩增
- 前言本研究将本实验室分离、鉴定并纯化的NA-1株鹅源副粘病毒进行了基因组RNA的提取,采用RACE技术得到了末端序列。cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNAends,RACE)技术由...
- 王昌庆李少丽丁壮丛彦龙吴昊刘美邱蜜蜜尹仁福
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- 拯救NA-1株鹅源新城疫病毒转录载体的构建
- 前言本研究用反向遗传操作技术拯救NA-1株鹅源副粘病毒,用PVAX-1载体作骨架,构建了包含病毒两个末端序列及丁肝病毒核酶的的转录载体。1材料与方法PVAX-1载体购自Ivitrogen公司,BamHI、Hin- dII...
- 李少丽王昌庆丁壮丛彦龙尹仁福
- 文献传递
