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大鼠CuZn-SOD cDNA的克隆及高效表达被引量：4: 2001年; 采用 PCR技术 ,扩增大鼠 Cu Zn-SOD c DNA,双酶切后与表达载体 p BV2 2 0连接 ,构建出表达质粒 p BV-RCS,并转化大肠杆菌 DH5α,经金属离子和 42℃诱导 ,p BV-RCS得到高表达 ,经 SDS-PAGE及薄层扫描测定表达蛋白占菌体总蛋白的 49% ,是目前国内外 SOD高表达菌株之一[1 ,2 ] .表达蛋白以包涵体形式存在于菌体内 ,经超声波破壁后 ,再经透析复性和稀释复性 ,表达蛋白具有特异性 SOD酶活性 (1 2 98U/m L); 牛淑敏洪伟刘方朱颂华王树荣刘克明何锦姝; 关键词：超氧化物歧化酶基因克隆表达质粒超氧自由基

野油菜黄单胞菌8004胞外酶及多糖合成正负调控基因在X.c.NK01菌中功能初探被引量：3: 1997年; 利用野油菜黄单胞菌（Xanthomonascompestris）8004正、负调控胞外酶及多糖合成的基因片断分别经三亲本接合方法导入黄单胞菌NK01抗性突变株中，测定接合于四种胞外酶活力和多糖合成能力，确定该正、负调控基因对NK01的作用．结果表明，负调控基因作用明显，使NK01胞外多糖及胞外酶产量显著降低，正调控基因未见明显的胞外酶及多糖合成的增强作用．本文并对正、负调控基因的作用方式作了初步探讨．; 牛淑敏于松涛王玉香王金华王树荣宋诚林心贻陈平赵大健; 关键词：野油菜黄单胞菌调控基因胞外酶胞外多糖

人胎盘催乳素在大肠杆菌中的表达: 2000年; 用 PCR方法扩增人胎盘催乳素 ( h PL) c DNA得到 597bp的片段 ,在其两端加上了合适的酶切位点及起始、终止密码子 ,将其与高效表达载体 p BV2 2 0重组连接 ,转入大肠杆菌 DH5α,得到稳定遗传的重组质粒转化子p BV-h PL.p BV-h PL菌株经热诱导后 ,有 2 2 k D的蛋白表达 ,表达量占菌体总蛋白的 1 2 .94 % ,h PL表达蛋白以包涵体形式存在 ,复性处理后。; 牛淑敏林心怡李红日黄铁石王玉香王树荣赵大健; 关键词：人胎盘催乳素大肠杆菌基因表达 CDNA PCR

拮抗菌BS—98分泌抗菌蛋白的条件及其发酵液特性被引量：29: 1996年; 由本室分离得到一株强烈抑制芦笋茎枯病等植物病原真菌的拮抗菌ＢＳ—９８菌株（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）。用环柱法检测该菌株的抗菌活性表明，该菌株除抑制芦笋茎枯病菌ＰｈｏｍａａｓｐａｒａｇｉＳａｃｃ外，对小麦赤霉病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ），棉花枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆｓｐ．ｖａｓｉｎｆｅｃｔｕｍ）、棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｍａｌｂｏ—ａｔｒｕｍ）、黄瓜灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）、立枯丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ）等植物病原真菌以及黄瓜角斑病菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅＰＶ．ｌａｃｈｒｙｍａｎｓ）等植物病原细菌均表现出很强的拮抗作用。选用ＢＰＹ液体培养基（起始ｐＨ８．０），３０℃振荡培养４８ｈ后，可用（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀法从发酵液中分离出较多抑制病原真菌生长的蛋白。该发酵液中所含抗菌物在常温下对碱稳定，在酸性环境中具有良好的热稳定性。; 胡剑林心怡张九一王树荣王岳五; 关键词：拮抗菌芦笋茎枯病菌植物病原

四环素产生菌质粒DNA的分离检测及遗传学分析: 1995年; 用７％蔗糖的ＹＥＭＥ液体培养基培养四环素产生菌金色链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ）９１－０６，以链霉菌遗传操作法［８］为基础，从该菌体中分离到质粒ｐＳＡ３１４，分子量约为２８．５ｋｂ（１８．８ＭＤ）．该质粒经酶切分析表明，具有２个ＢａｍＨＩ位点和１个ＥｃｏＲＩ位点。用　啶橙处理获得无质粒株，其在孢子形成和菌落形态方面出现明显差异。; 孙文风谢栋王树荣王岳五; 关键词：四环素金色链霉菌质粒

β－淀粉酶基因在黄单胞菌中的克隆及表达被引量：10: 1996年; 广泛寄主范围载体ｐＫＴ２１０可在辅助质粒ｐＲＫ２０１３的协助下转移进入黄单胞菌（革兰氏阴性）中并能稳定存在；来源于枯草杆菌的β－淀粉酶基因与载体ｐＫＴ２１０形成重组质粒ｐＹＬ１，并以其转化大肠杆菌；通过三亲本接合将ｐＹＬ１引入带有利福平抗性的黄单胞菌ＮＫ０１－Ｒ中，通过抗性选择接合子，并测定接合子的淀粉酶水解能力及产胶能力．本文获得一株黄原胶产量比出发菌株提高２０％，且淀粉酶水解能力显著提高的工程菌株．; 杨建华李时岩孟淑芳牛淑敏王树荣王金华朱峰宋诚; 关键词：黄单胞菌重组质粒 Β-淀粉酶基因表达

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王树荣