王永娟
- 作品数：215 被引量：351H指数：9
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 一种响应面法优化三七茎叶皂苷提取液的除杂方法
- 本发明公开了一种响应面法优化三七茎叶皂苷提取液的除杂方法，包括：1:2.5浓度的三七茎叶皂苷提取原液制备；1%浓度的壳聚糖溶液制备；将所述皂苷提取原液稀释成质量浓度为1:6的提取液，在50℃下加入0.8mL/g的所述壳聚...
- 秦枫朱善元吴双陈玉勇郭长明王安平吴植王永娟洪伟鸣徐海
- 文献传递
- 一种猪冷冻精液的保藏方法
- 本发明涉及家畜人工授精技术领域，涉及一种猪冷冻精液的保藏方法。所述保藏方法包括：将猪精液在预处理剂混合进行预处理，得到预处理精液；在0‑3℃下，将所述预处理精液与稀释剂混合进行稀释，得到稀释精液；将所述稀释精液进行程序冷...
- 郝福星武彩红王永娟刘莉邱树磊艾建强关伟伟周春炎陈晨
- 文献传递
- 山羊UBA52基因多态性及其与繁殖性能的关系被引量：1
- 2012年
- 根据牛UBA52基因序列,设计3对引物(U1～U3),分别扩增随机选取的济宁青山羊和辽宁绒山羊样本,PCR产物克隆测序,序列比对结果显示仅在U3的扩增产物中发现G63A和T181C突变。设计引物U4,利用PCR-RFLP技术分别在性早熟、高繁殖力品种(济宁青山羊、南江黄羊、马头山羊)和性晚熟、低繁殖力品种(辽宁绒山羊、内蒙古绒山羊、太行山羊)中检测上述位点的多态性,并分析2个突变位点对山羊性早熟和高繁殖力的影响。对于G63A位点,在济宁青山羊和南江黄羊中检测到GG、GA和AA3种基因型,在马头山羊、辽宁绒山羊、内蒙古绒山羊、太行山羊中只检测到GG和GA基因型;该突变位点不同基因型分布在性早熟品种和性晚熟品种间存在一定的差异;济宁青山羊GG、GA和AA基因型频率分别为0.53、0.44和0.03,AA型和GA型母羊平均产羔数分别比GG型多0.85只(P<0.05)和0.49只(P<0.05),AA型与GA型之间差异不显著(P>0.05)。对于T181C位点,在南江黄羊和内蒙古绒山羊中检测到CC、CT和TT 3种基因型,在济宁青山羊、马头山羊、辽宁绒山羊、太行山羊中只检测到CC和CT两种基因型;该突变位点不同基因型分布在性早熟品种和性晚熟品种间没有明显差异;济宁青山羊CC和CT基因型频率分别为0.91和0.09,两种基因型个体间产羔数差异不显著(P>0.05)。本研究结果初步表明,UBA52基因63位点与山羊的性早熟可能存在一定关联,A等位基因可能是提高山羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。
- 王永娟储明星曹贵玲王金玉狄冉方丽
- 关键词：山羊性早熟产羔数PCR-RFLP
- 一种节粮型黄麻羽优质鸡的培育方法
- 本发明涉及一种鸡的育种方法，尤其涉及一种节粮型羽色黄麻相间的优质鸡培育方法。该方法是以麻羽鸡作为配套系第一父本；黄羽高产优质鸡作为配套系第一母本；配套系第一父本公鸡与配套系第一母本母鸡杂交，子一代中选取选择麻羽、整齐度高...
- 俞亚波顾云飞王金玉顾玉萍施会强王永娟邱聪
- 文献传递
- 牛气管抗菌肽在毕赤酵母中的表达与鉴定被引量：4
- 2011年
- 为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽(bTAP)的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建表达载体pPIC9K-bTAP。用SalⅠ酶切线性化pPIC9K-bTAP质粒后电转化毕赤酵母GS115,经G418筛选阳性克隆,并用甲醇诱导其表达。SDS-PAGE分析结果表明表达的重组蛋白质分子量正确,抑菌试验结果表明表达的重组蛋白质bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果。
- 王安平李哲峰朱善元王永娟吴双黄文强左伟勇洪伟鸣孙怀昌
- 关键词：毕赤酵母抗菌活性
- 禽腺联病毒VP3基因的原核表达及多抗的制备
- 2013年
- 根据已发表的禽腺联病毒(AAAV)基因组序列设计了1对引物,经PCR扩增出VP3基因,将其克隆入原核表达载体pET-30a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下VP3蛋白获得了正确表达,SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白的分子质量正确。将目的蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备了针对重组蛋白VP3的多抗血清,Western-blot结果显示,制备的抗血清能够与AAAV VP抗原发生特异反应。结果表明,VP3基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的多抗血清可以用于VP基因的表达检测。
- 王安平朱善元王永娟吴双左伟勇洪伟鸣
- 关键词：VP基因原核表达
- 双酯型乌头碱完全抗原的制备与鉴定
- 2014年
- 为制备双酯型乌头碱(DAC)的完全抗原,通过活化酯法将小分子的DAC偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA),合成免疫原DAC-BSA、检测原DAC-OVA,采用紫外扫描光谱法、BCA试剂盒法、酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果。结果表明,免疫原和检测原均偶联成功;按100μg/只的剂量每2周免疫一次小鼠,共免疫5次,最后一次免疫4d后,眼眶静脉采血,测定多抗血清的效价均达到1∶25 600,且第2组小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为30ng/mL,最低检出限为1ng/mL,与其他药物的交叉反应率均小于1%,具有很好的特异性。成功合成了DAC人工抗原,并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清。
- 陆辉李晶左伟勇王健王永娟
- 关键词：乌头碱
- vp2基因特异miRNA对鸡传染性法氏囊病毒复制的抑制
- 为探索vp2 基因特异miRNA 对鸡传染性法氏囊病毒复制的抑制作用，笔者在前期研究基础上，将两个有效的vp2 基因特异miRNA 表达框分别克隆入含neo 基因的pTarget 载体中获得miRNA 单表达或双表达载体...
- 王永娟朱善元左伟勇王安平吴双孙怀昌
- 关键词：IBDVVP2MIRNA
- 鸡输卵管表达的重组人溶菌酶的鉴定被引量：2
- 2006年
- 用直接结晶法从重组载体注射鸡蛋清中提取重组人溶菌酶（rhLYZ），并对其理化及生物学特性进行了鉴定。结果显示，rhLYZ能被hLYZ特异抗体识别；纯化的rhLYZ和天然hLYZ的热稳定性无显著差异，二者在pH3．0～11．0范围内均具有活性，pH为7．0时活性最强。采用最小抑菌浓度法测定了含rhLYZ蛋清和纯化rhLYZ对12种常见细菌的溶菌活性，二者对除有鞭毛伤寒杆菌和鳖嗜水气单胞菌以外的参试茵均有不同程度的抑制作用。表明，表达在重组栽体注射鸡蛋清中的rhLYZ具有与天然hLYZ十分相似的分子质量、热稳定性、pH活性范围和溶菌谱。
- 朱秋菊孙怀昌赵敏苏王永娟李国才
- 禽腺联病毒Rep78、Rep52基因的原核表达及多抗制备被引量：1
- 2013年
- 为制备禽腺联病毒Rep蛋白多抗血清,根据已发表的禽腺联病毒基因组序列设计2对引物,扩增出Rep78、Rep52基因,分别将其克隆入原核表达载体pET-30a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下,2种蛋白均获得了高效表达,SDS-PAGE显示2种重组蛋白分子量均正确。将重组蛋白切胶免疫ICR小鼠,分别制备了针对2种蛋白的多抗血清,Western blot实验显示制备的抗血清能够与Rep78和Rep52抗原发生特异反应。以上结果说明,Rep78和Rep52蛋白在大肠杆菌中获得成功表达,且制备的多抗血清可用于Rep基因的表达检测。
- 朱善元王安平吴双王永娟左伟勇洪伟鸣
- 关键词：原核表达抗血清
