王玉卿
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省“13115”科技创新工程西北农林科技大学唐仲英育种基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 华山新麦草低分子量麦谷蛋白和α-醇溶蛋白基因的原核表达及进化分析
- 华山新麦草(Psathyrostachys huashanica Keng. 2n=14,NsNs)是仅分布在秦岭山脉华山段的中国特有农作物野生近缘种,具有抗寒、耐旱、耐瘠薄、抗病、品质优良等优异性状。本研究采用同源克隆...
- 王玉卿
- 关键词：华山新麦草LMW-GS原核表达进化分析
- 文献传递
- 滨麦低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因的分离与序列分析被引量：2
- 2011年
- 采用PCR方法,从滨麦(Leymus mollis)基因组中分离出8条LMW-GS基因序列。核苷酸序列分析表明,序列GQ169791在起始密码子上游包含318 bp的启动子序列,该序列包含-300元件、GCN4 motif、种子贮藏蛋白盒等基因特异表达的顺式或反式作用调控元件。推导的氨基酸序列分析表明,8条序列的编码区依次有信号肽,N-末端区,中部重复区和C-末端Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区等典型LMW-GS多肽一级结构特征;序列HQ416909、HQ416914和HQ416915具有单一完整的开放阅读框(ORF);序列GQ169791、HQ416910、HQ416911、HQ416912和HQ416913在中部重复区和C-末端区出现了4个或5个提前终止密码子,推断其为假基因。8条序列都含有8个或9个半胱氨酸残基(C),N-末端区起始氨基酸序列为METSRIPG-或METTRIPG-,推断其为LMW-m型LMW-GS基因。系统进化分析表明,8条序列与华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)LMW-GS基因(HM475146,GQ223386)和野大麦(Hordeum brevisubulatum)的B-hordein基因(AY695368)具有相对较近的同源关系。该研究为挖掘利用滨麦LMW-GS的基因提供了理论依据,对小麦品质改良具有一定参考价值。
- 赵继新周博庞玉辉王玉卿武军陈新宏程雪妮刘淑会傅杰
- 华山新麦草籽粒硬度吲哚蛋白基因的分离与序列分析被引量：2
- 2011年
- 采用AS-PCR技术,从华山新麦草基因组DNA中分离获得了其籽粒硬度吲哚蛋白Pin a(HM 448475)和Pin b(HM448476)的基因序列。DNA序列分析显示,这2条序列相似性仅为69.25%,它们与小麦、山羊草、黑麦、燕麦和大麦亲缘种属植物等的Pin a和Pin b基因序列具有93%以上的一致性;推导的氨基酸序列分析显示,序列HM 448475(Pin a)和HM 448476(Pin b)都具有籽粒硬度吲哚蛋白基因的19个氨基酸残基组成的信号肽,与脂类易于结合的色氨酸结构域WRWWKWWK(Pin a)或WPTKWWK(Pin b),以及位置固定的10个半胱氨酸残基等典型结构特征,同时,这2条序列与小麦、山羊草等亲缘植物的Pin a和Pin b基因氨基酸相比,分别有15个和8个主要位点的差异;系统进化树分析显示,序列(HM 448475)可能为Pin a基因家族中的一个新类型,而序列(HM 448476)与智利大麦的Hordoindoline b基因具有相对较近的亲缘关系。研究表明,华山新麦草含有与麦类作物差异较大的控制籽粒硬度的等位基因。该研究对保护利用华山新麦草、丰富小麦籽粒硬度基因资源具有一定的理论意义和应用价值。
- 赵继新阎新王玉卿武军陈新宏程雪妮刘淑会杨群慧
- 关键词：华山新麦草籽粒硬度基因分离
- 华山新麦草α-醇溶蛋白基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2011年
- 【目的】克隆华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)的α-醇溶蛋白基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】采用同源克隆法从华山新麦草基因组DNA中分离克隆出α-醇溶蛋白基因并进行序列分析,将克隆的华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5克隆到表达载体pET-28a(+)上,获得重组质粒pET28a-Gli-Ns转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。【结果】从华山新麦草基因组DNA中克隆了4个α-醇溶蛋白基因:Gli-Ns-2(FJ713595)、Gli-Ns-3(GQ139525)、Gli-Ns-4(GQ139526)和Gli-Ns-5(GQ139527)。序列分析表明,4条序列具有α-醇溶蛋白的典型结构特征,含有8个或9个半胱氨酸残基,序列FJ713595为假基因。利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核系统中特异性表达。Western-blot证实融合蛋白可成功表达。【结论】克隆了4个华山新麦草的α-醇溶蛋白基因序列,基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核表达系统中成功表达,为小麦品质改良提供了新的候选基因。
- 王玉卿赵继新庞玉辉降彦苗陈新宏武军刘淑会
- 关键词：华山新麦草基因克隆原核表达
