王迎晨
- 作品数：21 被引量：84H指数：7
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学文化科学生物学更多>>
- 人呼吸道腺病毒通用特异检测试剂的研究及应用被引量：1
- 2008年
- 目的建立一种特异性强、灵敏度高、操作简便的呼吸道腺病毒检测方法，为临床呼吸道腺病毒通用特异诊断试剂的研发奠定实验基础。方法用生物信息学软件DNAMAN5．2．2、GeneRunner3．05、BLAST对GenBank中已收录的10个型别人呼吸道腺病毒核酸全序列进行比对分析，找m高度保守序列，设计5对腺病毒通用特异引物，同时确保PCR产物具有型别特异性。用NP-40裂解法制备模板，对引物的有效性、特异性及灵敏忡进行验证．并应用于64例急性呼吸道感染患儿咽拭子标本的检测，阳性标本的PCR产物直接测序鉴定血清型．将阳性标本接种HeLa细胞，光镜下观察细胞病变，电镜下观察病毒形态。结果BLAST结果表明，5对引物与其他病毒、细菌及人类基因组等无高度同源性，是腺病毒特异性引物。用5对引物扩增人3型腺病毒DNA，均出现阳性目的条带，但不能检测呼吸道合胞病毒和柯萨奇病毒，验证了引物的有效性和腺病毒特异性。模板稀释、病毒稀释均可检测到10。梯度，说明引物具有较高的灵敏性，同时验证了NP-40裂解法的稳定性。64例临床咽拭子标本巾检测出2例阳性标本，阳性率为3．13％（2／64）。阳性标本接种HeLa细胞，光镜下可见细胞变圆、聚集成葡萄串状、脱落等腺病毒所致细胞病变，电镜下可见细胞核内有典型的品格状排列的腺病毒颗粒。PCR产物测序结果表明，2株病毒均为B组腺病毒。结论成功设计了腺病毒通用的、特异的，同时扩增产物又具有腺病毒型别特异性的引物。用该引物建立的PCR方法检测呼吸道标本中的腺病毒DNA具有灵敏和特异的特点，适用于临床常规诊断腺病毒感染。
- 陈晶曲章义魏凤香张鸿彦王鹏王迎晨姜海英
- 关键词：聚合酶链反应
- 人3型腺病毒六邻体蛋白同源建模及其进化轨迹分析被引量：9
- 2009年
- 用同源建模方法构建了人3型腺病毒六邻体完整的空间结构,对此结构模型的合理性进行检验,并通过基于多重序列比对的进化轨迹分析发现,不同型别的人腺病毒六邻体型特异性序列主要存在于六邻体的塔区上,结合二级结构分析,预测位于六邻体塔区表面的几个环区是型特异性中和表位的所在区域.
- 袁晓辉曲章义吴晓敏王迎晨魏凤香张鸿彦刘蕾杨志伟
- 关键词：同源建模中和表位
- 新型别人腺病毒的研究进展被引量：4
- 2019年
- 人腺病毒是一种能引起人类多种疾病的DNA病毒,迄今为止发现了包括A^G等7个种、80多个型别.本文对腺病毒的结构、分类标准进行了介绍,同时对新型别人腺病毒及其分型鉴定方法、产生机制进行综述.对人腺病毒多方面的了解有助于更好的探究其进化机制、组织嗜性及致病性,加强对腺病毒感染的预防和治疗.
- 张哲曲章义王迎晨董妥路冰曲丽欣李烨高雅李发龙
- 关键词：人腺病毒型别基因重组感染性疾病
- 通用引物PCR研究进展被引量：3
- 2008年
- 通用引物PCR是应用与不同序列的保守区互补的通用引物,来进行PCR扩增,它能够高通量地对相关微生物或其亚型进行检测与鉴定分型,是一种简便、快速、灵敏、特异的鉴定分型方法,目前广泛应用于病毒、细菌、支原体及真菌等微生物的检测与鉴定。
- 袁晓辉曲章义王迎晨陈晶曲章义（审校）
- 关键词：聚合酶链反应DNA引物保守序列蛋白质亚型临床实验室技术
- 全球历年人感染H5N1型禽流感病毒分子进化分析
- 目的：研究人感染H5N1型流感病毒的演化规律,为今后对该病毒的研究奠定理论基础,并为防控工作提供参考。
方法：从公开的流感病毒数据库中提取了189株H5N1型流感病毒的1047条核酸编码序列,在序列比对的基础上...
- 王迎晨
- 关键词：禽流感病毒流行性感冒
- α-蒎烯抗腺病毒作用机制研究被引量：5
- 2020年
- 目的研究抗腺病毒药物α-蒎烯对病毒抑制的作用及相关机制。方法采用细胞病变抑制实验和噻唑蓝(MTT)比色法观察单体α-蒎烯对人腺病毒3型的抑制作用。同时利用原子力显微镜观察病毒与药物直接作用后病毒形态学的改变;用激光共聚焦显微镜检测药物在吸附阶段对病毒的作用效果。结果MTT结果显示α-蒎烯对病毒的抑制作用主要表现在对病毒的直接灭活作用和对细胞的保护作用,从而阻挡病毒进入细胞。结论α-蒎烯具有抗腺病毒作用,为研发天然、高效、低毒的抗腺病毒的药物提供了科学依据。
- 魏凤香商蕾高虹王迎晨曲章义
- 关键词：Α-蒎烯腺病毒抗病毒作用
- PBL教学法在卫生微生物学教学中的应用研究被引量：7
- 2015年
- 在卫生微生物学教学过程中应用PBL教学法,探讨一种适合中国卫生微生物学理论教学的新方法。在理论学习时,教师采用PBL教学模式,能够显著提高学生的学习成绩,对学生的学习兴趣、学习能力、实践能力等方面有一定的帮助,是PBL在卫生微生物学教学领域发展中一次有益的尝试。
- 高虹贾莉邱晓惠商蕾王迎晨曲章义
- 关键词：PBL卫生微生物学
- 人感染甲型H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白同源建模与分子进化分析被引量：1
- 2013年
- 血凝素是流感病毒主要的中和抗原,也是流感病毒分型依据之一。为研究人感染甲型H7N9亚型禽流感病毒血凝素的结构特征和进化历史,从GenBank和GISAID数据库获取人感染甲型H7N9亚型禽流感病毒的血凝素序列数据,用BLAST检索和分层抽样方法分别选取参比序列,进行多重序列比对,构建基于血凝素氨基酸序列的进化树。选取A/Shanghai/02/2013株为代表序列,用同源建模方法构建血凝素蛋白质三维结构模型,分别计算序列比对结果中各氨基酸残基同分类指标的互信息并投射到构建三维结构模型,观察代表性残基的分布趋势。结果表明各新发毒株的血凝素高度相似,且同我国浙江地区分离到毒株最为接近,新发毒株的代表性氨基酸残基主要分布在血凝素的头部表面。
- 李萍艳王迎晨袁晓辉田文静
- 关键词：流行性感冒病毒血凝素同源建模分子进化
- 人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白的克隆表达和纯化被引量：4
- 2017年
- 目的克隆、表达人腺病毒六邻体蛋白基底区片段,为后续研究六邻体蛋白的抗原性及蛋白结构,进而研发腺病毒的基因工程疫苗及诊断试剂奠定基础。方法以3型人腺病毒核酸为模板,用PCR法扩增六邻体基底区片段,将该片段定向克隆至p QE32质粒,在大肠杆菌表达系统中表达带有组氨酸标签的重组蛋白片段,利用镍亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果构建出重组表达质粒,通过测序验证了克隆结果的正确性;在大肠杆菌表达体系中获得了高效表达。结论成功表达并获得了纯化的人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白片段。
- 崔奇董妥王迎晨李宇齐彬彬Vladimir I.ZlobinYuri P.DzhioevOleg N.Reva曲章义
- 关键词：腺病毒蛋白表达蛋白纯化
- 呼吸道感染人腺病毒的分离培养和型别鉴定被引量：8
- 2013年
- 目的从临床呼吸道感染样品中分离人腺病毒毒株并进行型别鉴定。方法将经免疫荧光检测确认为人腺病毒感染的痰标本经处理后接种宫颈癌HeLa细胞进行培养,用空斑试验进行病毒分离和纯化。从纯化后的毒株中提取DNA作为模板,用PCR法扩增腺病毒六邻体高变区基因,对扩增产物进行核酸序列测定,测序结果运用基本局部比对搜索工具以确定其型别。结果从临床样品中分离到一株人腺病毒毒株,其六邻体基因高变区序列同人3型腺病毒六邻体基因的同源性为100%。结论从哈尔滨地区呼吸道感染患者痰标本中分离到人3型腺病毒一株。
- 王瑞琨商蕾王迎晨金玉霞齐桂云黄冬娟曲章义
- 关键词：腺病毒呼吸道感染病毒培养PCR
