王鑫
- 作品数：13 被引量：20H指数：3
- 供职机构：南华大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生建筑科学更多>>
- HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究HPV16 E6(human papillomavirus type16 E6)蛋白与hDaxx(human death domain associated protein)的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响,为探索HPV16 E6蛋白的致癌机制提供实验依据。方法:构建pGADT7-E6和pGBKT7-hDaxx重组载体,利用酵母双杂交系统检测HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用,并用Western印迹法检测二者在酵母菌中的表达。将E6与hDaxx的真核表达载体共转染HeLa细胞,用5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡,FCM法检测凋亡率。结果:E6蛋白与hDaxx在细胞内存在相互作用。共转染pcDNA3.1(-)/E6和pcDNA3.1(-)/hDaxx的HeLa细胞,随pcDNA3.1(-)/hDaxx转染量的增加凋亡率上升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HPV16 E6蛋白与hDaxx在细胞内相互作用,hDaxx过表达可提高表达E6蛋白的HeLa细胞对5-FU的敏感性,且这种关系存在剂量依赖性。E6蛋白可能通过和hDaxx的相互作用抑制细胞凋亡。
- 王鑫朱翠明刘安元尹卫国李金丽蔡恒玲万艳平
- 关键词：HELA细胞双杂交系统技术细胞凋亡
- 人乳头瘤病毒E6蛋白在细胞凋亡中的作用被引量：4
- 2006年
- 细胞凋亡是细胞体在内、外特定的生理或病理因素诱导下发生的程序性死亡。目前认为，细胞内的基因直接调控细胞凋亡的发生与发展，细胞外部因素通过信号转导而影响这些基因的表达或其表达产物的活化，间接控制细胞凋亡。病毒也可以通过影响凋亡信号转导通路中相关蛋白的活性及相关基因的表达而干扰正常的细胞周期和细胞凋亡。
- 王鑫万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒细胞凋亡相关蛋白信号转导通路程序性死亡病理因素
- YB-1调控EMT相关蛋白对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力影响的研究
- 目的：观察Y-盒结合蛋白-1（Y-box binding protein-1，YB-1）对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响，并初步探讨YB-1在胰腺癌细胞侵袭转移中与EMT相关蛋白（E-cadherin、Viment...
- 王鑫
- 关键词：胰腺癌细胞增殖细胞迁移细胞侵袭
- HBVpreS2真核载体的构建及其表达
- 2006年
- 目的扩增乙型肝炎病毒(HBV)前S2基因(preS2),并构建其真核表达载体,为研究HBV树突状细胞疫苗奠定实验基础。方法从慢性乙型肝炎患者血清中提取HBVDNA,用聚合酶链反应技术扩增全长preS2基因,将其克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,经PCR、酶切和DNA测序鉴定筛选阳性克隆,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-preS2,并将其转染巨噬细胞48h后,ELISA检测细胞裂解液中preS2的表达。结果从慢性乙型肝炎患者血清抽提的DNA中扩增得到约860bp大小的目的片段,preS2基因片段正确插入pcDNA3.1(+)载体,得到HBVpreS2真核表达载体pcDNA3.1(+)-pre2。结论成功地构建了含preS2基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-preS2,并能在巨噬细胞中表达目的蛋白HBVpreS2。
- 陈熙李金丽王鑫张明詹利生万艳平
- 新型冠状病毒Omicron变异株流行期儿童热性惊厥的临床特征及预后
- 2023年
- 目的评估新型冠状病毒Omicron变异株流行期儿童热性惊厥(FS)的临床特征及预后。方法回顾性分析2022年2月1日至2023年1月31日就诊于南华大学附属长沙中心医院儿科诊断为FS患儿的临床资料,比较Omicron变异株感染所致的FS患儿(观察组)与非Omicron变异株感染所致的FS患儿(对照组)的临床特征及预后。结果观察组131例,对照组341例;观察组12~<36月龄患儿比例低于对照组(P<0.05),≥60月龄患儿比例高于对照组(P<0.05)。观察组FS大多发生在发热24 h内(128/131,97.7%),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且大多为全面强直-阵挛发作(127/131,96.9%),大多病程中仅有1次惊厥发作(114/131,87.0%),符合单纯性FS的特征。观察组FS患儿临床症状主要表现为上呼吸道感染(108/131,82.5%),比例明显高于对照组(164/341,48.1%),而下呼吸道感染的发生率低于对照组(P<0.05)。电话或门诊随访369例患儿,观察组98例,2例出现复发,≥60月龄组未出现复发;对照组共随访271例,9例复发。结论感染新型冠状病毒Omicron变异株后致儿童FS的病例数激增,且晚发型FS患者比例明显增高,绝大部分表现为上呼吸道感染,惊厥多在发热24 h内出现,预后较好。
- 吴蕾江杰胡宇敏王鑫杨菡洁石家云
- 关键词：惊厥发热性儿童
- EPC项目合同风险管理研究
- 传统的施工承包模式在我国发展已久，有成熟的技术生产模式，但传统施工承包模式中建设环节分散，责任不明导致各参建方相互推诿扯皮事件常有发生，并且，不同建设主体利益的冲突导致业主协调难度增加。在此形势下，近年来，EPC总承包模...
- 王鑫
- 关键词：EPC项目合同风险管理总承包商
- 文献传递
- 人乳头瘤病毒16型E6蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：5
- 2006年
- 目的构建在哺乳动物细胞中表达的人乳头瘤病毒16型早期蛋白6真核表达载体pcD-NA3.1(-)/E6,为研究HPV16 E6蛋白在细胞永生化作用中的机制奠定实验基础。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增E6基因。将PCR产物纯化后与pUCm-T载体连接,经蓝白斑筛选、双酶切鉴定及序列分析后,亚克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中;阳性克隆经双酶切鉴定后转染RAW264.7巨噬细胞,Western blotting鉴定其在RAW264.7细胞中的表达。结果重组载体经酶切、PCR及测序证明插入片断序列正确无误,转染RAW264.7细胞后可在细胞中表达HPV16 E6蛋白。结论成功构建的HPV16 E6真核表达载体pcDNA3.1(-)/E6能在RAW264.7细胞中表达E6蛋白。
- 蒋永林王静王鑫余敏君万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒16型真核表达
- HPV18型E2蛋白高表达对巨噬细胞凋亡及其分泌功能的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:研究HPV18E2及其N端(TAD)、C端(DBD)与GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞(MΦ)凋亡及分泌活性的影响,为进一步研究E2蛋白在HPV18致癌机制中的作用奠定实验基础。方法:通过PCR从现有真核表达载体pEG-FP-C1/E2上分别扩增出TAD、DBD基因片段,并构建真核表达载体pEGFP-C1/TAD、pEGFP-C1/DBD。将3种真核表达载体及pEGFP-C1分别转染MΦ,用倒置荧光显微镜观察它们的表达与定位,并以抗GFP抗体为一抗作Westernblot检测它们的表达。通过3种融合蛋白在MФ内的瞬时高表达,在转染48h后分别检测各组细胞培养基中TNF-α和IL-1β的含量,并收集MΦ经染色以及流式细胞术(FCM)观察检测其凋亡。结果:GFP-E2融合蛋白主要表达于细胞核,细胞质内也有表达,而GFP-DBD融合蛋白仅表达于细胞核内,GFP-TAD仅表达于细胞质。GFP-E2、GFP-TAD融合蛋白在MΦ内高表达后MΦ凋亡率上升,细胞因子TNF-α和IL-1β分泌量增加,且GFP-TAD作用强于GFP-E2。而EGFP-DBD无此作用。结论:HPV18E2及其TAD与EGFP融合蛋白瞬时高表达可诱导MΦ凋亡并上调其分泌细胞因子TNF-α和IL-1β。
- 彭俊朱翠明余敏君曹清香王鑫万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒18型E2蛋白巨噬细胞
- hDaxx即时高表达增强HBVX蛋白对HepG2凋亡的抑制作用被引量：1
- 2008年
- [目的]研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与hDaxx的相互作用及对HepG2细胞凋亡的影响。[方法]构建pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBx酵母表达载体,利用酵母双杂交系统检测HBx与hDaxx的相互作用。将HBV X基因转染HepG2细胞,建立稳定表达HBx的HepG2X细胞株;pcDNA3.1-hDaxx转染HepG2X,5-Fu诱导凋亡,流式细胞术检测凋亡。[结果]共转pG-BKT7-hDaxx和pGADT7-HBx酵母质粒的酵母菌能在SD/-Trp-Leu-His(三缺)和SD/-Trp-Leu-His-Ade(四缺)的平板上生长,且Western blot检测到hDaxx和HBx在同一株酵母菌中的表达;稳定转染HBV X基因的HepG2细胞组凋亡率明显低于HepG2细胞组(P<0.01);且转染pcD-NA3.1-hDaxx后,细胞凋亡率进一步降低,与pcDNA3.1-hDaxx没有剂量依赖关系。[结论]HBx与hDaxx在酵母细胞内存在相互作用;hDaxx的即时高表达可增强HBx对5-Fu诱导的HepG2凋亡作用,HBx可能通过与hDaxx相互作用而抑制HepG2凋亡。
- 李金丽万艳平朱翠明王鑫尹卫国蔡恒玲
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白HDAXX凋亡
- HPV16 E6蛋白与hDaxx的相互作用及其对凋亡的影响
- 目的:应用酵母双杂交法检测人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6蛋白与hDaxx的相互作用，并初步探讨其相互作用对凋亡的影响，为进一步研究E6蛋白在HPV16致癌机制中的作用提供一定的实验依据。
方法:
...
- 王鑫
- 关键词：酵母双杂交重组质粒致癌机制
- 文献传递
