祁巧芬
- 作品数：6 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪瘟重组腺病毒及其在制备猪瘟基因工程疫苗中的用途
- 本发明公开了一株重组腺病毒rAdV－E2，其微生物保藏号是：CGMCC No.2429。本发明应用复制缺陷型腺病毒载体系统，构建了含有猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒rAdV－E2，并以家兔作为模型，评价了rAdV－E2的免...
- 仇华吉孙元祁巧芬梁冰冰李娜于墨阳王宇飞成丹朱庆虎涂长春
- 文献传递
- 共表达PRRSVGP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答被引量：6
- 2008年
- 为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS-E2中。为了增强免疫效果,在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位(PADRE),在CSFV E2基因后融合伪狂犬病病毒(PrV)UL49基因,获得了6种重组质粒。间接免疫荧光试验显示,PRRSV GP5和CSFV E2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达。将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测血清抗体水平,通过基于CSFE/WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫。结果显示,除pSFV1CS组外,从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体;各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖;部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组。结果表明,这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫,PrV UL49可以增强其细胞免疫应答。
- 孙建富赵和平李娜孙元夏照和周艳君王煜祁巧芬鲁承仇华吉
- 关键词：共表达
- 稳定表达T7 RNA聚合酶的ST细胞系的建立
- ST细胞系(猪睾丸细胞系)是猪瘟病毒等猪源病毒的敏感细胞系，常用于猪瘟病毒的分离培养和体外增殖。本研究旨在构建稳定表达T7 RNA聚合酶的猪睾丸细胞系(ST细胞系)，用于猪瘟病毒等的反向遗传操作。采用PCR方法，以BHK...
- 祁巧芬
- 关键词：猪瘟病毒体外增殖
- 文献传递
- 表达猪瘟病毒E2蛋白的重组腺病毒的构建及其在兔体内的免疫原性分析被引量：13
- 2008年
- 为了构建猪瘟重组腺病毒载体疫苗,通过细菌内同源重组法构建了含有猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒rAdV-E2。测定其一步生长曲线,同时用间接免疫荧光试验和Western blotting检测外源基因表达,然后用rAdV-E2免疫家兔,免疫后6周用猪瘟兔化弱毒疫苗株(C株)进行攻击,攻毒后3 d取其脾脏,用实时荧光定量RT-PCR检测C株病毒RNA。结果表明,该重组腺病毒传至第10代时,毒价可达1.0×1010 TCID50/mL;外源基因可在其中得到稳定表达;rAdV-E2接种兔免疫后2周产生猪瘟特异性抗体,免疫后5 w抗体达到峰值,攻毒后rAdV-E2接种兔和C株接种兔均未出现定型热反应,从其脾脏也未检测到C株病毒RNA,而野生型腺病毒接种兔均出现了定型热反应,并且从其脾脏检测大量C株病毒RNA,其含量达到了103拷贝/μL以上。由此表明,rAdV-E2可望开发为猪瘟候选疫苗。
- 孙元祁巧芬梁冰冰成丹李娜于墨洋王宇飞刘霓虹朱庆虎仇华吉
- 关键词：猪瘟病毒E2基因重组腺病毒免疫原性
- 稳定表达T7 RNA聚合酶的ST细胞系及其构建方法和应用
- 本发明公开了一株稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7，其微生物保藏号是：CGMCC No.2444。本发明将T7 RNA聚合酶基因插入到真核表达载体pIRES2－EGFP中，得到pIRES2－EGFP－T7，转染...
- 仇华吉祁巧芬孙元李娜
- 文献传递
- 表达猪瘟病毒E2蛋白的重组腺病毒的构建及其在兔体内的免疫原性分析
- 本研究旨在构建猪瘟重组腺病毒载体疫苗。通过细菌内同源重组法构建了含有猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒rAdV-E2,测定其一步生长曲线,同时用间接免疫荧光试验和Western blot检测外源基因表达,然后用rAdV-E2免...
- 孙元祁巧芬梁冰冰成丹李娜于墨洋王宇飞刘霓虹朱庆虎仇华吉
- 关键词：猪瘟病毒E2基因重组腺病毒免疫原性
- 文献传递
