祝骥
- 作品数：22 被引量：142H指数：6
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市重大科技攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 绿色荧光蛋白基因在脂肪细胞分化研究中的应用被引量：2
- 2005年
- 目的建立人脂肪细胞分化的绿色荧光蛋白活体检测动态模型,为进一步进行脂肪细胞分化及其相关基因表达研究奠定基础。方法用PCR法从培养的人前脂肪细胞总DNA中扩增出过氧化物体酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因启动子,将该启动子插入真核细胞表达载体pEGFP-1后转染3T3成纤维细胞及人前脂肪细胞,并诱导脂肪细胞分化。结果在胰岛素、地塞米松及3-异丁基-1-甲基黄嘌呤诱导下,人前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞时表达绿色荧光蛋白基因,而3T3细胞则不能诱导为脂肪细胞及表达绿色荧光蛋白基因。结论脂肪组织特异表达的PPARγ2基因启动子与绿色荧光蛋白基因构成的重组基因转化人前脂肪细胞后,能够用来动态活体检测脂肪细胞分化状态。这一模型的建立为脂肪细胞分化调控的分子机制研究提供一个更加方便的检测途径。
- 祝骥马文丽毛向明李凌吴清华郑文岭
- 关键词：脂肪细胞分化绿色荧光蛋白基因
- HIV基因芯片的初步研究被引量：6
- 2002年
- 目的建立HIV基因检测芯片的分析技术。方法分离HIV1U26942基因限制性显示片段作探针,应用PixSys 5500点样仪将探针打印在氨基包被的玻片上制作基因芯片。然后与随机引物荧光标记的HIV样品进行杂交,以分析限制性显示基因片段的杂交动力学。经杂交后清洗和干燥,扫描芯片进行检测。结果对基因检测芯片的制作与检测的实验条件进行了初步研究并筛选了12个限制性显示基因探针。结论建立的检测芯片的实验方法可行且较特异。
- 李凌马文丽毛向明祝骥郑文岭
- 关键词：基因芯片HIV感染
- 人前脂肪细胞的培养及分化研究被引量：5
- 2007年
- 目的建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型。方法取中国人腹部皮下脂肪组织,经胶原酶消化后在含胎牛血清的DMEM-F12培养基中培养出梭形细胞,以胰岛素、地塞米松及吡咯列酮诱导该梭形细胞向脂肪细胞分化。结果经油红O脂肪染色可见梭形细胞内脂滴的积累。人前脂肪细胞经诱导并继续培养后在旋涡状生长汇合的细胞中心形成一个高密度的细胞岛,该细胞岛由部分可以贴壁的细胞和悬浮的已分化的脂肪细胞组成。结论成熟脂肪组织中存在着具有能分化为脂肪细胞的前脂肪细胞,经适当诱导可定向分化为脂肪细胞。
- 方振伟祝骥毛向明岳枫熊静波
- 关键词：前脂肪细胞脂肪细胞分化
- DNA芯片技术与基因表达研究被引量：23
- 2000年
- 随着基因组计划的顺利实施 ,大量的生物信息被解析 ,基因表达及基因功能的研究将成为生命科学研究的热点 .DNA芯片技术是近年来出现的分子生物学与微电子技术相结合的最新 DNA分析检测技术 .该技术将在生命科学与信息科学之间架起一道桥梁 ,因而成为后基因组时代基因功能分析的最重要的技术之一 .目前 DNA芯片技术已在基因表达等研究中得到广泛的应用 .
- 祝骥马文丽姚汝华
- 关键词：DNA芯片基因表达生物信息学基因组计划
- 苦丁茶愈伤组织的诱导与褐变抑制被引量：8
- 2000年
- 以叶片为材料，对苦丁茶愈伤组织的诱导，继代培养及褐变调控的研究表明：（１）苦丁茶愈伤组织的诱导及继代培养均以 ＭＳ附加 ＢＡ２．０ ｍｇ Ｌ－１和 ＮＡＡ ４．０ ｍｇ Ｌ－１的培养基效果最好；（２）０．１％的植酸可明显促进愈伤组织生长、抑制褐变，而硫代硫酸钠效果最差；（３）连续培养４０—５０ ｄ愈伤组织增长倍数达到最大值；（４）继代２７次以后愈伤组织生长速度开始下降．这些条件为下一步细胞培养生产苦丁茶甙等生物活性物质提供了基础．
- 祝骥姚汝华黄毓文梁承邺
- 关键词：苦丁茶愈伤组织诱导褐变抑制试管苗
- 应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针被引量：22
- 2002年
- 利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质粒 .以质粒为模板扩增靶片段并进行序列分析 .每个亚型得到了十几个 10 0～ 10 0 0bp的HIV基因片段 .研究表明 ,RD
- 李凌马文丽祝骥朱利娜宋艳斌吴清华郭秋野郑文岭
- 关键词：HIVDNA芯片
- 人肥胖基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的克隆中国人的肥胖基因,并在大肠杆菌中高效表达人瘦素蛋白。方法用RT-PCR从培养的中国人脂肪细胞提取的总RNA中扩增出肥胖基因,与TA载体连接后进行核酸序列测定,并将该基因定向克隆至高效表达质粒pBV220,在大肠杆菌中表达。结果克隆出中国人肥胖基因,其cDNA序列与文献报道的一致,构建了重组质粒pBV220-OB,并成功地实现了人肥胖基因在大肠杆菌中的表达。结论人肥胖基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达,为进一步研究该基因在肥胖症及其相关疾病中的作用,以及在脂肪代谢与脂肪细胞分化中的调控机制奠定基础。
- 祝骥马文丽毛向明李凌宋艳斌郑文岭
- 关键词：肥胖症肥胖基因反转录PCR基因表达
- 利用基因芯片技术筛选HIV-1F亚型基因限制性显示探针被引量：6
- 2002年
- 为筛选限制性显示技术制备的HIV 1F亚型基因探针 ,应用基因芯片打印仪将其有序地打印在玻片上制备基因芯片 .在随机引物延伸的过程中进行HIV样品的荧光标记 ,然后与芯片进行杂交 .杂交后清洗玻片并干燥 ,对芯片进行扫描 ,分析各探针的杂交信号 .从中筛选了 14个基因片段作为芯片下一步研究的探针 .实验证明 。
- 李凌马文丽祝骥石嵘郑文岭
- 关键词：基因芯片技术
- As_2O_3处理前后K562细胞基因表达变化的基因芯片检测被引量：5
- 2002年
- 目的应用基因芯片研究三氧化二砷（As2O3）处理前后K562细胞基因表达的变化。方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA。cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因片段的胎盘库芯片杂交。结果杂交结果经扫描和软件分析,发现了11个差异表达的基因片段,其中有3个基因片段与细胞凋亡密切相关。结论 我们构建的胎盘库基因芯片可以成功地用于研究药物作用前后基因表达的变化。
- 冯春琼马文丽李凌宋艳斌石嵘吴清华郭秋野祝骥郑文岭
- 关键词：基因表达基因芯片基因芯片三氧化二砷K562细胞凋亡
- 红白血病K562细胞基因表达谱芯片制作的初步研究
- 以人红白血病K562细胞为材料,用诱导分化药物羟基脲诱导其向终未分化.分离k562细胞分化前后总RNA并逆转录cDNA.用限制性显示PCR(RD-PCR)技术,将K562细胞的cDNA用限制性内切酶Sau3A1进行酶切,...
- 祝骥马文丽李凌郭秋野吴清华宋艳斌姚汝华郑文岭
- 文献传递
