程娜
- 作品数：15 被引量：36H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所更多>>
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- 华支睾吸虫富甘氨酸2a类抗原Cs4重组蛋白的免疫学特性与定位
- 目的：对华支睾吸虫富甘氨酸2a(GRA2a)类抗原Cs4重组蛋白(rCs4)进行免疫学特性分析,并对GRA2a类抗原进行组织定位.方法：使用蛋白质印迹法分析rCs4与华支睾吸虫病患者混合血清的免疫反应性,并分析GRA2a...
- 许学年CHENG NaXU Xue-nian程娜ZHANG Hong-man张鸿满ZHOU Yan周岩TAN Yu-guang谭裕光BAO Yi-fang包意芳ZHANG Lu-juan张陆娟XU Bin徐斌JIANG He江河黎学铭LI Xue-mingFENG Zheng冯正
- 关键词：华支睾吸虫病免疫学诊断重组蛋白
- 田鼠巴贝虫Bm186抗原及其应用
- 本发明提供了一种分离的基因，其基因序列如SEQ ID NO：3所示。本发明还提供了一种田鼠巴贝虫Bm 186抗原蛋白，由上述的分离的基因所编码，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。本发明还提供了一种抗体，它特异性的...
- 许学年周岩程娜卢艳徐斌陈韶红胡薇
- 文献传递
- 片形吸虫病诊断抗原的研究进展被引量：5
- 2015年
- 片形吸虫病（fascioliasis）是由片形吸虫（Fasciola spp．），包括肝片形吸虫和大片形吸虫感染引起的人畜共患寄生虫病。牛羊等经济动物的感染可引起产奶、产肉量降低，劳作能力下降，造成巨大的经济损失 人体片形吸虫病可导致感染者严重的肝、胆病理损伤。片形吸虫病的临床表现和影像学诊断与其它肝胆疾病类似，极易被误诊。目前粪便虫卵病原学检测是最常用的片形吸虫病诊断方法，但存在漏诊、需要专业的镜检人员操作等问题。免疫学诊断技术因具有较高的特异性、敏感性且操作简单易行，近年来已成为片形吸虫病最常用的辅助诊断手段。该文主要综述了片形吸虫病免疫诊断抗原的研究进展。
- 王月祺周岩程娜许学年
- 关键词：片形吸虫病片形吸虫抗原抗体
- 片形吸虫病研究进展被引量：16
- 2013年
- 片形吸虫病(fascioliasis)是由片形吸虫(Fasciola spp.)感染引起的人兽共患病,可导致感染者肝、胆病理损伤;牲畜感染引起产奶、产肉量降低,造成经济损失,是影响中国公共卫生和畜牧业经济发展的重要问题。由于其症状与其他肝胆疾病类似,常被误诊。片形吸虫对三氯苯达唑耐药性的出现成为片形吸虫病防治的重大隐患,寻找敏感特异的诊断方法和有效的药物、疫苗成为片形吸虫病防治的重点。本文综述了片形吸虫病流行概况、诊断、药物治疗与耐药性。
- 刘倩程娜周岩许学年
- 关键词：片形吸虫病三氯苯达唑耐药性疫苗
- 片形吸虫分类鉴定的研究进展被引量：1
- 2019年
- 片形吸虫是牛羊及其他哺乳动物胆管内常见寄生虫,主要有肝片形吸虫和巨片形吸虫,两者形态相似,对其鉴定一直是研究的热点之一。近年来现代生物学技术已广泛运用于寄生虫的分类学研究,本文拟阐述染色体分析、蛋白质多态性以及分子遗传学技术用于片形吸虫种类鉴定的研究进展,揭示片形吸虫的种内差异,种间差异和亲缘关系。
- 唐梦婷周岩程娜许学年
- 关键词：片形吸虫
- 巨片形吸虫病快速诊断胶体金免疫层析试条的研制与评价被引量：2
- 2016年
- 目的建立快速、简便诊断巨片形吸虫病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取巨片形吸虫总RNA,通过RT-PCR获得FgCL1-YN基因片段,并克隆入pET28a(+)表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白(r FgCL1-YN);将r FgCL1-YN和羊抗鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜的适宜位置作为检测带和质控带,以胶体金标记抗人IgG4抗体的鼠单抗作为检测试剂,制备检测特异性IgG4型抗体的免疫层析试条。用该试条检测巨片形吸虫病患者(30份)、日本血吸虫病患者(15份)以及健康人(32份)血清,评价其诊断价值,同时用ELISA法进行平行检测作为对照。结果试条检测法的敏感性为100%(30/30),特异性为97.9%(46/47),总体符合率为98.7%(76/77)。ELISA法检测的敏感性、特异性和总体符合率分别100%(30/30)、100%(47/47)和100%(77/77)。试条法与ELISA法的敏感性、特异性和总体符合率,经四格表确切概率法检验,P值分别为1、0.5和0.5,全部大于0.05。显示,试条法与ELISA法检测巨片形吸虫病患者血清的结果高度一致。另外,试条法的检测时间为10min,血清用量低于10μL,且具较高的敏感度。结论以r FgCL1-YN建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测巨片形吸虫病具有较高的诊断价值。
- 周岩许学年程娜刘榆华孔令颖姚恺龄石峰张建国Peter Chun罗家军
- 关键词：免疫层析试条ELISA
- 华支睾吸虫富甘氨酸2a类抗原Cs4重组蛋白的免疫学特性与定位
- 2011年
- 目的对华支睾吸虫富甘氨酸2a（glycine rich antigen 2a，GRA2a）类抗原Cs4重组蛋白（rCs4）进行免疫学特性分析，并对GRA2a类抗原进行组织定位。方法使用蛋白质印迹（Western印迹）分析rCs4与华支睾吸虫病患者混合血清的免疫反应性，并分析GRA2a类抗原的分泌性。应用ELISA法检测rCs4免疫小鼠血清中抗rCs4特异性IgG水平，并动态检测华支睾吸虫感染兔0～44周的血清中抗rCs4特异性IgG水平。通过免疫荧光实验（immunofluorescence assay，IFA）对华支睾吸虫GRA2a类抗原进行组织定位。结果纯化的rCs4可被华支睾吸虫病患者混合血清识别。rCs4单抗（mAbCs4—31）与华支睾吸虫排泄分泌抗原和可溶性抗原在相对分子质量（Mr）26000与55000之间分别有13、15个反应条带，均呈阶梯状分布。ELISA检测rCs4免疫小鼠抗rcs4和ESA的IgG效价均达1：64000，感染兔的抗rCs4特异性抗体平均水平自感染第4周开始上升，于第6周达到高峰，此后逐步递减，至第20周已呈较低水平。IFA检测发现GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫的表皮。结论Cs4蛋白是华支睾吸虫在感染早期的分泌型蛋白，具较好的抗原性。GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫表皮。
- 程娜许学年张鸿满周岩谭裕光包意芳张陆娟徐斌江河黎学铭冯正
- 关键词：华支睾吸虫分泌蛋白
- 华支睾吸虫特异性富甘氨酸2a类抗原基因的克隆、表达和免疫学诊断价值评价被引量：5
- 2011年
- 目的采取免疫学方法筛选华支睾吸虫成虫cDNA表达文库,寻找新的抗原基因。方法使用华支睾吸虫病人混合血清以及华支睾吸虫排泄分泌抗原的免疫小鼠血清,分别免疫学筛选华支睾吸虫成虫λZAP cDNA表达文库;将阳性噬菌体克隆、测序以及核苷酸序列比对分析;将目的基因的编码区克隆至原核表达质粒pET28a(+)中,采用制备不带N端融合标签的天然蛋白的策略表达融合蛋白,使用组氨酸标签亲和纯化柱(Ni-NTA树脂)纯化融合蛋白;采用间接ELISA法,检测血清中的特异性抗体,共检测35例华支睾吸虫虫卵粪检阳性血清,36例正常人血清,15例日本血吸虫、15例卫氏并殖吸虫和13例猪囊尾蚴病人血清,评价重组蛋白的免疫学诊断价值。结果发现华支睾吸虫特异性富甘氨酸2a(GRA2a)类抗原基因家族,将其中的Cs4抗原基因植入重组表达质粒pET28a(+)的NcoI位点,成功实现融合蛋白的表达,并进一步纯化得到可溶性重组蛋白。采用间接ELISA法检测血清中的特异性抗体,该ELISA法的敏感性为80.0%,特异性为97.2%,总符合率为88.7%;日本血吸虫、卫氏并殖吸虫和猪囊尾蚴病人血清的假阳性率分别为6.7%、6.7%和7.7%。经核苷酸序列同源性比较,华支睾吸虫GRA2a类抗原是迄今为止尚未进行功能研究的华支睾吸虫特异性抗原。结论发现华支睾吸虫GRA2a类抗原基因家族;成功构建重组表达质粒,并表达、纯化出可溶性重组蛋白;该抗原具有较高的免疫学诊断价值。
- 许学年周岩张鸿满包意芳徐斌欧阳颐程娜黎学铭冯正
- 关键词：华支睾吸虫免疫学筛选原核表达ELISA
- 田鼠巴贝虫Bm186抗原及其应用
- 本发明提供了一种分离的基因，其基因序列如SEQ ID NO：3所示。本发明还提供了一种田鼠巴贝虫Bm 186抗原蛋白，由上述的分离的基因所编码，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。本发明还提供了一种抗体，它特异性的...
- 许学年周岩程娜卢艳徐斌陈韶红胡薇
- 文献传递
- 巨片形吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的克隆、表达和免疫学诊断价值评价被引量：4
- 2015年
- 目的免疫筛选巨片形吸虫成虫c DNA表达文库,并克隆和重组表达巨片形吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx),初步评价其免疫诊断价值。方法用巨片形吸虫病患者的混合血清免疫学筛选巨片形吸虫成虫λZAP c DNA表达文库,取阳性噬菌体进行克隆、测序及序列比对分析。将TPx基因全长片段和N段截短片段分别克隆至原核表达质粒p ET28a(+)中,用组氨酸标签亲和纯化柱(Ni-NTA树脂)纯化2种重组蛋白r Fg TPx和r Fg TPx_nt(N端截短型)。以间接ELISA法,检测27例巨片形吸虫病患者治疗前后的血清,15例日本血吸虫病和15例华支睾吸虫病的患者血清,32位健康人血清,评价重组蛋白的免疫诊断价值。结果克隆的巨片形吸虫TPx基因,经原核表达、纯化并复性,获得其可溶性重组蛋白r Fg TPx和r Fg TPx_nt,相对分子质量(Mr)分别为30 000和26 000。以重组蛋白r Fg TPx_nt为检测抗原的ELISA检测的敏感性为66.7%(18/27),特异性为96.8%(60/62),总符合率为87.6%(78/89),与日本血吸虫病和华支睾吸虫病患者血清的交叉反应率分别为0和1/15。巨片形吸虫病患者治疗前后血清的A450值分别为0.233±0.088和0.129±0.072,差异有统计学意义(t=4.27,P<0.01)。结论筛选并克隆了巨片形吸虫TPx抗原基因,实现原核表达,并证明该重组蛋白作为人体巨片形吸虫病的免疫诊断抗原具有较好的诊断意义,亦有可能具有早期诊断和疗效考核价值。
- 王月祺周岩程娜陈木新艾琳刘榆华张建国罗家军许学年
- 关键词：免疫学筛选原核表达ELISA
