翁丹卉
- 作品数：47 被引量：150H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划海外青年学者合作研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 无精子症及少弱精子症2436例患者的细胞遗传学病因分析被引量：16
- 2017年
- 目的:探讨无精子症、少弱精子症患者外周血染色体核型与男性精液异常的关系,为不育症的诊断和治疗提供临床理论依据。方法:对2010年至2015年在华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科门诊就诊的无精子症及少弱精子症患者进行外周血染色体核型分析(G显带)。结果:2436例患者中染色体核型异常者340例(13.96%),其中性染色体异常208例(61.18%),以克氏综合征最常见;常染色体异常132例(38.82%),以常染色体多态性、易位最为常见。1014例无精子症患者染色体核型异常179例(17.65%),主要表现为性染色体数目异常(81例,45.25%);1422例少弱精子症患者染色体核型异常161例(11.32%),主要表现为性染色体(69例,42.86%)、常染色体(84例,52.17%)结构异常。无精子症与少弱精子症患者染色体异常的构成类型不同,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:无精子症或少弱精子症的形成与染色体异常的类型密切相关,细胞遗传学分析对于明确不育症病因及指导进一步治疗有重要意义。
- 朱彤吴媛媛陈素华乔福元翁丹卉李宇琪
- 关键词：不育症染色体核型分析无精子症少弱精子症
- 人乳头瘤病毒16型E2蛋白在人肝癌细胞HpG2中诱导凋亡的研究
- 2011年
- 目的 通过真核表达载体介导人乳头瘤病毒（HPV）16型E2基因在HpG2细胞中的表达,探讨E2蛋白的促凋亡作用是否为非HPV病毒依赖性.方法 利用pcDNA3.1V5 His构建HPV16型E2基因的真核表达载体并转染HpG2细胞,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western b1ot检测转染后E2基因mRNA和蛋白的变化,AnnexinV-FTTC/PI双染后利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测转染后细胞的凋亡.结果 转染携带HPV16型E2质粒后,HpG2细胞可表达E2蛋白.流式细胞仪检测结果显示,转染后细胞凋亡率（21.25±5.05）%与转染空载体细胞（10.91±2.70）%和未转染细胞（7.35±0.79）%比较差异有统计学意义（P＜0.05）.激光共聚焦显微镜结果显示,转染后细胞凋亡明显增多.结论 E2蛋白可以明显诱导HPV感染无关的HepG2细胞凋亡,其凋亡作用不依赖HPV病毒.
- 栗妍王薇翁丹卉汪雯雯陶涛王世宣
- 关键词：乳头瘤病毒E2蛋白脱噬作用
- 人卵巢癌多细胞球体的P-gp蛋白表达与p27蛋白表达的相关性研究被引量：4
- 2006年
- 目的:检测人卵巢癌多细胞球体中p27和P-gp的表达。观察P27反义寡核苷酸(p27-ASON)抑制p27表达前后人卵巢癌多细胞球体多药耐药P-糖蛋白(P-gp)的表达,探讨P-gp蛋白表达与p27蛋白表达的相关性及p27反义寡核苷酸对卵巢癌细胞多药耐药的逆转作用。方法:以单层细胞为对照,以三维培养方法获得的人卵巢癌A2780、CAOV3多细胞球体(MCS)为模型,通过脂质体将p27-ASON转染入两卵巢癌细胞株,采用流式细胞仪(FACS)、蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测p27、P-gp蛋白水平的表达;激光共聚焦显微镜(Confocal)检测p27、P-gp蛋白的亚细胞分布。结果:FACS、Westernblot、Confocal检测提示单层细胞低表达p27,低表达P-gp,而在MCS中p27和P-gp表达明显升高。p27-ASON转染后培养的MCS,p27表达明显下调,同时P-gp表达下调。结论:卵巢癌多细胞球体中P-gp和p27的表达呈相关性,多药耐药性可能和p27的表达上调有关,p27-ASON可下调多细胞球体中P-gp的表达,从而可一定程度的逆转卵巢癌多药耐药性。
- 邢辉李静杨晓葵高庆蕾翁丹卉卢运萍马丁
- 关键词：卵巢癌P27P-GP反义寡核苷酸
- 糖原合酶激酶-3β磷酸化抑制紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨增加糖原合酶激酶-3β(GSK3β)的p-GSK3β对紫杉醇诱导的卵巢癌细胞凋亡的作用。方法:运用GSK3β特异性抑制剂氯化锂(LiCl)增加GSK3β的磷酸化水平,应用流式细胞仪和Hochest33342染色检测细胞凋亡和细胞周期,蛋白质印迹法检测GSK3β及GSK3β磷酸化水平。结果:蛋白质印迹法显示,抑制剂LiCl作用后,GSK3β磷酸化明显增加。流式结果显示,90nmol/L紫杉醇作用于OV2008细胞24h,通过亚G1峰检测其凋亡率为(29.75±1.54)%,而应用LiCl抑制剂预孵育的细胞,凋亡率为(15.23±0.95)%,差异有统计学意义,t=46.378,P=0.002。Hochest33342染色证实LiCl作用后可明显抑制紫杉醇诱导的细胞凋亡形态学改变。流式结果周期分析显示,90nmol/L紫杉醇作用于OV2008细胞24h,与正常对照相比G2M(22.83±2.40)%,可见细胞呈现明显的G2M期阻滞G2M(69.68±1.48)%,而LiCl抑制剂的应用,可增强紫杉醇诱导的G2M期阻滞G2M(88.49±0.86)%,差异有统计学意义,t=20.407,P=0.003。结论:GSK3β磷酸化增加可抑制紫杉醇诱导的卵巢癌细胞的凋亡并增强其周期阻滞。
- 宋晓红翁丹卉邢辉卢运萍马丁王世宣
- 关键词：糖原合酶激酶-3Β紫杉醇细胞凋亡流式细胞术
- 真核表达survivin基因对曲古菌素A诱导卵巢癌细胞凋亡作用的影响
- 2008年
- 目的探讨survivin基因对曲古菌素A(TSA)诱导卵巢癌细胞凋亡作用的影响。方法(1)将本实验室已构建成功的survivin正义全长真核表达质粒(pcDNA3.1-survivin),经脂质体包裹转染人卵巢癌细胞A2780,以转染pcDNA3.1空载体的A2780细胞为对照。(2)RT-PCR和Western blot方法分别检测survivin mRNA和蛋白质的表达。(3)MTT比色法和流式细胞仪(FACS)分别检测TSA对两组细胞存活率和凋亡率的影响。(4)Western blot检测TSA作用下A2780细胞中survivin蛋白的表达变化。结果(1)RT-PCR和Western blot检测提示转染pcDNA3.1-survivin组中survivin mRNA和蛋白质表达明显高于空载体组。(2)MTT比色法和FACS检测提示转染pcDNA3.1-survivin组细胞存活率明显高于空载体组,细胞凋亡率明显低于空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3.1-survivin转染后的A2780细胞对TSA的敏感性明显降低。(3)Western blot检测提示survivin的表达水平随着TSA作用时间的延长而下降。结论曲古菌素A诱导卵巢癌细胞的凋亡作用可能与survivin基因表达有关。
- 马晓黎邢辉吴鹏翁丹卉卢运萍马丁
- 关键词：SURVIVIN基因卵巢肿瘤曲古菌素A
- 妇科手术患者子宫内膜异位症发病因素分析被引量：9
- 2012年
- 目的:探讨子宫内膜异位症在妇科手术患者中发病的相关危险因素。方法:选择99例行妇科手术证实为非内异症的良性疾病患者为对照组,选择95例子宫内膜异位症患者为病例组,对两组进行回顾性病例对照分析,对17个相关因素进行单因素、多因素非条件Logistic回归分析。结果:孕次、产次、人流次数、体重指数、职业、血型、避孕措施及原发性痛经为与子宫内膜异位症的发病相关的单因素(P<0.05),最终职业(OR=2.52,95%CI:1.28～4.94)、血型(OR=2.46,95%CI:1.13～5.36)、妊娠次数(OR=0.78,95%CI:0.65～0.93)、剖宫产史(OR=2.39,95%CI:1.07～5.38)、原发性痛经(OR=3.49,95%CI:1.81～6.73)5个因素进入多因素回归模型(P<0.05)。结论:从事脑力劳动、A型血、剖宫产史及原发性痛经为经手术证实子宫内膜异位症的主要危险因素,而妊娠次数多为保护因素。
- 丁婷栗妍汪雯雯王薇翁丹卉李伟马丁王世宣
- 关键词：子宫内膜异位症妇科手术非条件LOGISTIC回归分析
- 三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用被引量：6
- 2008年
- 背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并不理想。本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用。方法:构建外源基因DsRed全长载体转染HEK293细胞。针对报告基因DsRed设计4个干扰载体,一个含有3段shRNA,另外3个分别含有此3段中1段shRNA。转染293/DsRed,荧光显微镜观察基因DsRed。应用实时定量PCR(Real-timePCR)和流式细胞仪(FACS)检测4个载体对DsRed基因在mRNA及蛋白水平干扰效应。结果:4个载体对靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有干扰效应,且含有3段shRNA载体对DsRed基因干扰效率为(89±16)%,显著高于3个只含有1段shRNA载体[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差异有显著性(P<0.05)。结论:三位点shRNA干扰载体可以提高对靶基因的干扰效率。
- 翁艳洁翁丹卉夏曦宋晓红卢运萍王世宣马丁王常玉
- 关键词：RNA干扰外源基因DSRED短发卡状RNA
- RNAi文库在肿瘤研究中的应用被引量：2
- 2008年
- RNAi文库技术早期应用于低等真核生物研究中,随着RNAi技术在哺乳动物研究中的广泛应用,RNAi文库已作为研究功能性基因组的有效方法应用于哺乳动物的研究中。RNAi文库有两种类型,一种由合成寡核苷酸组成,一种由质粒载体构成。其筛选方法也有两种:高通量筛选和选择性筛选。短发卡RNA(shRNA)能在细胞内转变成具有siRNA性质的短双链RNA,且各种shRNA真核表达载体能稳定整合入细胞基因组产生持续的基因沉默效应。应用shRNA文库结合适当的筛选方法将是寻找肿瘤信号通路中的新组分,将为寻找肿瘤药物治疗新靶点提供有效的途径。
- 翁丹卉王世宣马丁
- 关键词：RNA干扰肿瘤
- Oct4在晚期浆液性卵巢癌中的表达及意义被引量：3
- 2013年
- 目的:卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤,肿瘤干细胞理论认为卵巢癌中存在肿瘤干细胞,并且肿瘤干细胞是肿瘤复发、转移、耐药的罪魁祸首。Oct4是细胞干细胞特性的重要标志之一。本文旨在探讨Oct4蛋白在晚期浆液性卵巢癌的表达情况,并分析其表达水平与患者临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组化法检测101例晚期浆液性卵巢癌中Oct4蛋白的表达情况,并结合临床资料分析Oct4蛋白的表达水平在晚期浆液性卵巢癌患者中的意义。结果:晚期浆液性卵巢癌患者中Oct4阳性表达率为87.1%(88/101),其表达水平和患者的年龄、病理分化程度、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关性(P>0.05),但是其高表达与化疗耐药明显相关(P=0.023)。结论:我们的研究证明Oct4在晚期浆液性卵巢癌中有较高表达,并且Oct4的表达与卵巢癌化疗后复发有关;理论上支持在晚期浆液性卵巢癌中可能存在肿瘤干细胞,且比例较高,肿瘤干细胞的比率和卵巢癌化疗耐药相关。Oct4可能是晚期浆液性卵巢癌治疗的新靶点。
- 孙朝阳李娜丁冬何杨陈刚翁丹卉
- 关键词：OCT4卵巢癌耐药
- 卵巢癌细胞上皮间质转化及侵袭转移过程中microRNA-9的调控作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨microRNA-9(miR-9)参与调控卵巢癌细胞EMT过程,以及影响卵巢癌细胞侵袭及转移的分子机制。方法使用TargetScan及PicTar数据库,预测可能靶向E-cadherin 3’UTR区的miRNA,双荧光素酶报告体系进行验证;上调候选miR后,用qRT-PCR和Western blot检测E-cadherin的表达变化;细胞免疫荧光观察E-cadherin、?-Catenin和Vimentin的表达;划痕实验、Transwell实验,观察卵巢癌细胞运动和侵袭能力的改变。结果 TargetScan、PicTar预测发现miR-9是唯一可与CDH1结合的miRNA。双荧光素酶报告系统验证预测结果正确。在SKOV-3中上调miR-9后,E-cadherin的表达受到显著抑制;细胞形态向间质细胞样转变,发生EMT分子水平的特征性改变;体外实验表明,卵巢癌细胞的运动和侵袭能力得到明显促进。结论 miR-9可以通过靶向调控E-cadherin表达,促进卵巢癌细胞的EMT进程,对卵巢癌细胞的运动和侵袭能力产生重要影响。
- 孙朝阳李娜周波杨宗元卢运萍翁丹卉
- 关键词：E-钙粘蛋白卵巢癌
