茆家定
- 作品数：54 被引量：194H指数：7
- 供职机构：皖南医学院弋矶山医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PTP1B基因对人胃癌细胞株的增殖和迁移能力的影响被引量：2
- 2015年
- 背景与目的:胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,术后易复发和转移。前期研究发现,蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)基因与胃癌肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期有关。本研究通过RNA干扰技术和基因克隆技术分别沉默和上调胃癌细胞中PTP1B基因的表达,观察PTP1B基因对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:将靶向沉默PTP1B基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列和克隆人的PTP1B cDNA基因序列分别转染MKN28和MKN45细胞,采用实时定量PCR(quantitative realtime PCR,qRT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测转染后细胞中PTP1B基因和蛋白的表达水平,使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、Transwell迁移试验和划痕试验分别观察PTP1B基因对细胞增殖和迁移能力的影响。结果:转染shRNA后,MKN28细胞中PTP1B mRNA和蛋白表达量与空白对照组、阴性对照组相比抑制显著(P<0.05)。CCK-8增殖活性实验显示,shRNA沉默PTP1B基因表达后能显著抑制胃癌MKN28细胞在48、72和96 h的增殖活性(P<0.05)。Transwell迁移试验和划痕实验显示,PTP1B表达下调后胃癌MKN28细胞的迁移能力受到显著抑制(P<0.05)。而提高PTP1B在MKN45细胞中表达后,细胞的增殖和迁移能力则显著提高(P<0.05)。结论:PTP1B基因是胃癌细胞增殖和迁移的重要调控因子。
- 汪进国吴佩武健茆家定
- 关键词：胃癌蛋白酪氨酸磷酸酶1B短发夹RNA细胞增殖细胞迁移
- 胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因ShRNA质粒表达载体的构建被引量：1
- 2006年
- 目的:构建针对胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因2条shRNA的质粒表达载体。方法:以Survivin基因为靶点,通过自行设计并构建包含两段短发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA),携带有各自的U6启动子和终止码、共同的绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,EGFP)基因和Neo基因的pGene-sil-1SurvivinshRNA载体,利用脂质体介导的方法转染人胰腺癌Bx-PC3细胞,RT-PCR观察其对Bx-PC3细胞Survivin基因表达的影响。结果:HE1质粒和HE2质粒的酶切鉴定正确,质粒转化菌液HE1、HE2进行测序分析均为插入正确的克隆质粒。胰腺癌Bx-PC3细胞转染成功,转染细胞后SurvivinmRNA的表达有明显抑制。结论:实验构建针对胰腺癌细胞Survivin基因2条shRNA的质粒表达载体成功。
- 黄鹤吴佩洪书剑茆家定芮景
- 关键词：SURVIVIN基因RNA干扰短发夹RNA腺癌细胞
- 大肠癌组织生长抑素、胃泌素表达与细胞凋亡及p53基因的相关性研究被引量：7
- 2004年
- 目的探讨大肠癌组织中胃泌素 (gastrin ,GAS)、生长抑素 (somatostatin ,SS)与大肠癌细胞凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)和凋亡调控基因 p5 3的相关性。 方法采用免疫组织化学SABC法和原位凋亡检测TUNEL法 ,检测 6 2例大肠癌组织中GAS、SS、p5 3及细胞凋亡的表达。 结果在大肠癌组织SS高表达组、中表达组的AI明显高于SS低表达组 (q高与低 =5 0 6 ,q中与低 =3 95 ,均P <0 0 1) ;而在GAS各表达组中的AI变化与此相反。p5 3阳性表达率在SS (GAS)低表达组、中表达组、高表达组三组间相比较存在着明显差别 (χ2 SS=10 16 9,χ2 GAS=7 833,均P <0 0 5 ) ,其中p5 3在GAS高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组 (χ2 高与低 =3 85 9,χ2 中与低 =4 796 ,均P <0 0 5 ) ;p5 3在SS高表达组的阳性表达率明显低于低表达组 (χ2 =6 710 ,P <0 0 5 ) ;而 p5 3在SS中表达组表达的阳性表达率低于低表达组 ,但差异无显著性 (χ2 =2 180 ,P >0 0 5 )。GAS/SS积分比值变化与AI呈负相关 ,与 p5 3呈正相关。 结论GAS、SS对大肠癌细胞凋亡的调控可能与 p5 3基因突变有关。
- 茆家定吴佩夏祥厚胡济群黄文斌徐国强
- 关键词：大肠癌生长抑素胃泌素细胞凋亡凋亡调控基因
- “导师负责制”模式下普通外科临床实习的教学体会
- 2011年
- 在当前特殊的医疗环境下,如何在原有教学模式的基础上引入一些新颖的教学模式,增加一些新的思路和方法,帮助医学生更好地完成临床实习这一重要的学习阶段,一直是医学教育者不断探讨的问题。文章结合自身多年的临床教学经验,从入科宣教、教学模式改进、能力培养、医德医风及医患沟通等多个方面加以阐述。
- 茆家定吴佩武健陈贤军
- 关键词：导师负责制普通外科教学模式
- 胃泌素高表达型大肠癌差异表达基因研究被引量：1
- 2012年
- 目的运用基因芯片技术分析胃泌素（GAS）高表达与无GAS表达大肠癌组织的差异表达基因，以筛选GAS依赖型大肠癌相关及候选基因。方法运用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测43例大肠癌手术标本癌组织中GAS的含量，选择GAS高表达（实验组）与无GAS表达（对照组）的癌组织进行基因i占片分析，通过实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）技术验证芯片分析出的在信号传导通路中起关键作用的10个差异基因。结果两类癌组织发生显著表达变化的基因有1182个，与对照组比较，在实验组中上调表达的基因有738个，下调表达的基因有444个，其中包括与细胞生长及增殖调控相关的基因、与癌细胞转移相关的基因以及与细胞骨架结构相关的基因，且主要集中于Wnt等多条信号传导通路中。选择10个在通路中起关键作用的基因进行Real-timePCR验证，验证的数据与芯片中的数据一致。结论cDNA微阵列法可以用于筛选与GAS有关的大肠癌的相关基因，获得的差异表达基因具有强烈的代表性。
- 徐洪海吴佩茆家定吕坤卢林明
- 关键词：大肠癌胃泌素基因
- 双吻合器联合TME在低位直肠癌保肛手术中的效果观察被引量：1
- 2008年
- 为了探讨双吻合器联合全直肠系膜切除（TME）在低位直肠癌保肛手术中的应用价值，回顾性分析应用双吻合器联合TME治疗低位直肠癌97例的临床资料。97例中，癌肿下缘距肛缘4.5-7.0cm，其中4例为4.5cm。DukesA期9例，B期67例，C期21例。所有病例肿瘤浸润肠周1／4-3／4，均无远处转移。术后发生吻合口漏4例，其中直肠阴道瘘2例，吻合口狭窄4例，吻合口出血3例，术后切口裂开1例，切口感染3例，术后肛门坠胀不适21例。85例获得1-3年的随访，局部吻合口周围复发7例，肝脏转移4例，腹腔广泛转移3例。结果表明，双吻合器联合TME是治疗低位直肠癌保肛有效、安全的术式，能降低术后局部复发率，改善患者生存质量，提高生存期和保肛率，但应严格掌握适应证。
- 茆家定吴佩黄鹤
- 关键词：双吻合器全直肠系膜切除术直肠癌保肛手术
- 胃切除术后并发上消化道大出血的诊治分析被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨胃切除术后上消化道大出血的原因、诊断和治疗。方法:对我院2006年1月～2010年12月间收治的23例胃切除术后大出血患者的临床资料进行回顾分析。结果:本组中有10例行急诊胃镜检查,4例行超选择性血管造影检查,1例通过剖腹探查而得以诊断;有6例接受手术治疗,4例行超选择性血管栓塞治疗;治愈17例(73.9%),死亡6例(26.1%)。结论:超选择性血管造影及胃镜检查,有利于明确出血的部位及原因;选择恰当的治疗方式对防止再出血非常重要。
- 汪进国吴佩武健陈贤军瞿章茆家定梁林虎黄鹤
- 关键词：胃切除术手术后并发症出血
- 乳腺癌腋淋巴结转移影响因素分析被引量：7
- 2009年
- 目的:探讨乳腺癌腋淋巴结转移的相关因素,为乳腺癌的治疗与预后提供理论依据。方法:收集皖南医学院弋矶山医院经手术治疗的乳腺癌病例137例,采用Logistic回归方法分析与乳腺癌腋窝淋巴结转移的相关因素。结果:60例患者发生了淋巴结转移,发生率为43.8%。肿瘤的大小(OR=2.139,P<0.05)和P53(OR=3.094,P<0.05)是淋巴结转移的危险因素,雌激素受体(OR=0.435,P<0.05)是淋巴结转移的保护因素,年龄、孕激素受体和人类表皮生长因子受体-2与淋巴结转移之间无统计学意义。结论:乳腺癌淋巴结转移与多种因素有关,P53阳性表达、较大体积的肿瘤易促进淋巴结转移,而雌激素受体阳性表达则可能抑制淋巴结转移。
- 方芳吴佩茆家定张帆陈剑平
- 关键词：乳腺肿瘤淋巴结转移
- 胃泌素调控ERK信号通路在促进大肠癌CACO2细胞增殖中的作用被引量：5
- 2017年
- 目的:利用RNA干扰技术探讨ERK1/2基因在胃泌素促进大肠癌细胞株CACO2增殖中的作用及分子机制。方法:通过慢病毒感染细胞构建胃泌素受体(CCK-BR)阳性的细胞稳转株CACO2,应用qRT-PCR检测大肠癌细胞株CACO2中CCK-BR的表达情况。应用RNA干扰技术沉默ERK1/2基因后,分析其总的ERK基因的蛋白表达及其磷酸化水平变化。实验共分4组:对照组、阴性干扰组、胃泌素组及质粒干扰组。使用流式细胞仪Annexin V-FITC法检测各组细胞增殖指数及Western blot检测各组细胞ERK1/2蛋白的表达和磷酸化水平。结果:慢病毒感染后,在CACO2细胞中均检测到目的条带膜蛋白,CACO2细胞存在着一定量的CCK-BR mRNA表达,扩增产物为185 bp。筛选出干扰质粒,质粒与脂质体比例在1∶2,转染效率达到40%~50%,转染干扰质粒的细胞中ERK蛋白表达水平降低,从蛋白水平说明构建的质粒沉默有效。胃泌素组细胞增殖指数明显高于质粒干扰组,也高于阴性干扰组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。4组细胞间ERK1/2的蛋白表达及磷酸化水平比较,差异有统计学意义(P<0.01)。胃泌素组ERK1/2的蛋白表达及磷酸化水平明显高于质粒干扰组,也高于阴性干扰组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:胃泌素能够通过ERK信号通路促进体外大肠癌CACO2细胞增殖。通过RNA干扰技术有效地阻断ERK信号通路下调ERK蛋白磷酸化水平,有望为胃泌素依赖型大肠癌综合治疗寻找到一条新的切入途径。
- 茆家定胡迪吴佩
- 关键词：胃泌素ERK1/2大肠癌RNA干扰慢病毒感染
- 结肠癌靶向治疗的研究进展被引量：11
- 2017年
- 结肠癌是最常见且近年发病率逐渐升高的消化道恶性肿瘤之一，在国内的一项流行病学数据显示，结肠癌的发病率已跃居所有恶性肿瘤第4位，病死率居第5位。右半结肠（RSC）和左半结肠（LSC）有明显不同的组织学和分子生物学特征。Bufill等首次较为系统地从流行病学、病理学、细胞遗传学、分子特征、致癌机制等方面阐述了左右半结肠癌的差异，并且提出左、右半结肠癌是两种疾病。手术治疗是结肠癌最常用的治疗方法，其次是辅助治疗，包括化学药物治疗及生物药物治疗即靶向治疗。
- 郭文文茆家定
- 关键词：右半结肠癌消化道恶性肿瘤分子生物学特征化学药物治疗年发病率细胞遗传学
