袁世珍 作品数:16 被引量:46 H指数:5 供职机构: 中山大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
胰腺癌中MAT1蛋白的表达与其临床病理特征的关系 被引量:7 2005年 目的研究MAT1蛋白在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌多项临床病理特征的关系。方法使用免疫组化首先分析了70例外科手术切除的胰腺癌标本、10例胰腺良性肿瘤、14例慢性胰腺炎和10例尸解来源正常胰腺组织标本中的MAT1蛋白表达。然后比较MAT1蛋白的表达与胰腺癌患者多项临床病理特征的关系,包括患者年龄、性别、癌灶部位、癌灶大小、组织学类型、分化程度和TNM分期。结果MAT1蛋白主要表达于胰腺癌癌细胞,也可见于成纤维细胞,棕黄色染色局限于细胞浆和核膜。757%(53/70)的胰腺癌组织中可见MAT1蛋白的表达,而正常对照标本中则未表达或仅微弱表达MAT1。MAT1在4种组织中的表达程度有显著差异(P<001)。其中MAT1在胰腺癌中的表达显著高于其它3种组织。进一步分析发现,MAT1蛋白表达与胰腺癌患者的TNM分期呈显著相关(P<005),但与其它临床病理特征无关。结论在胰腺癌中表达明显上调的MAT1蛋白可能与胰腺癌的发生相关,并且MAT1蛋白是评估胰腺癌患者预后的一个有用的肿瘤标志物。 刘建平 袁世珍 张世能 詹俊 朱兆华关键词:胰腺肿瘤 细胞周期 蛋白激酶类 MAT1-siRNA体外转染抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的研究 被引量:1 2007年 目的:观察siRNA沉默MAT1基因对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响,探讨MAT1基因作为胰腺癌基因治疗标靶的可行性。方法:在脂质体介导下将MAT1基因序列特异性siRNA体外转染人胰腺癌BxPC-3细胞,采用RT-PCR和W estern印迹法分析MAT1基因的表达,锥虫蓝染色计数法和Boyden小室模型分别测定细胞的增殖和体外侵袭能力变化。结果:与对照各组相比,实验组BxPC-3细胞MAT1 mRNA和蛋白在一定时间内均表达下调,其中mRNA表达在24 h和48 h分别下调达55.2%和64.3%(P<0.01);细胞体外增殖和侵袭能力均明显受抑,差异具统计学显著性(P<0.01)。结论:针对MAT1基因的siRNA可抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力,MAT1可能是胰腺癌基因治疗的靶点。 张世能 刘建平 徐凤琴 傅玉茹 左海军 袁世珍关键词:胰腺肿瘤 RNA干扰 细胞增殖 肿瘤侵润 NK4基因在人胰腺癌细胞中的表达及其对血管内皮生长的影响 被引量:1 2002年 目的 :构建NK4基因真核表达载体并进行转染研究。方法 :对重组质粒pcDNA3/hNK4进行酶切 ,将目的基因NK4克隆到较强的真核表达载体pRC/CMV2中 ,应用脂质体将NK4基因转染到胰腺癌细胞株SW1990中 ,G4 18筛选获得稳定表达克隆 ,采用RT -PCR及Westernblot鉴定及筛选出高转录和高表达的细胞克隆。以MTT法检测转染重组质粒pRC/CMV2 -hNK4的细胞克隆表达产物对血管内皮细胞生长的影响。结果 :在转染NK4基因的SW1990细胞克隆中 ,RT -PCR能扩增出NK4mRNA预期的 4 5 3bp片段 ,但强弱不同 ,Westernblot显示均有约 5 0kD的NK4蛋白的表达。其上清可显著抑制血管内皮细胞的生长。结论 :重组质粒pRC/CMV2 -hNK4是一种高效真核表达载体 ,并且能够在SW1990细胞中高表达 ;NK4能够抑制血管内皮细胞的生长 ,提示其在肿瘤基因治疗中可能具有重要意义。 赖人旭 袁世珍 刘启才关键词:胰腺癌 NK4基因 基因疗法 胰腺肿瘤 血管内皮 MATl基因沉默对胰腺癌细胞生长的影响 被引量:1 2012年 我们既往的研究证实,作为调控细胞周期循环的关键基因之一,人类MATl(ménage à trios1)基因在胰腺癌组织中表达增强,它参与胰腺癌的发生[1-2]。转染反义MATl基因可使胰腺癌细胞出现明显的G.期阻滞[3]。为此,本研究应用体外转录法合成靶向MATl基因的小干扰RNA(small interferenceRNA,siRNA),转染胰腺癌Capan-2细胞,观察其对细胞的生长抑制效应,探讨siRNA沉默MATl基因用于胰腺癌基因治疗的可行性。 刘建平 陶永胜 李辉 张世能 袁世珍关键词:胰腺癌细胞生长 基因沉默 转染反义 胰腺癌组织 RNA沉默 NK4基因在人胰腺癌细胞中的表达及其生物学活性 被引量:2 2002年 目的 肝细胞生长因子通过其受体c met的激活 ,在调节肿瘤侵袭、转移和血管形成中具有重要作用。NK4不仅是肝细胞生长因子的拮抗剂 ,而且也是血管形成的抑制剂 ,阻断HGF/c met途径和肿瘤血管的形成可成为抗胰腺癌治疗的策略之一。为此 ,构建NK4基因真核细胞表达载体并进行转染研究 ,探讨NK4基因在胰腺癌细胞中的表达及其生物学活性。方法 对重组 pcDNA3/hNK4质粒转行酶切 ,将NK4基因克隆到真核表达载体pRC/CMV2 ,应用脂质体将重组 pRC/CMV2 hNK4质粒转入胰腺癌SW 1990细胞中 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)及免疫印迹 (Westernblot)分别检测转染肿瘤细胞中NK4mRNA和蛋白的表达 ,并筛选出高转录和高表达的细胞克隆。以MTT法检测其细胞克隆表达产物对血管内皮细胞增殖的影响。结果 转导NK4基因的SW1990细胞可表达并分泌NK4,RT PCR扩增出预期的 45 3bp片段 ,Westernblot显示有 5 0 0 0 0的NK4蛋白 ,其上清液可显著抑制血管内皮细胞的生长 (0 .5 37± 0 .10 6和 1.15 2± 0 .12 8,0 .736± 0 .10 8和 1.16 1± 0 .110 ,P <0 .0 1)。结论 NK4基因对血管内皮细胞的生长具有抑制作用 。 赖人旭 袁世珍 Matsumoto K关键词:NK4基因 胰腺癌 生物学活性 脂质体 基因治疗 血管内皮细胞 “分子开关”MAT1基因的研究进展 被引量:5 2004年 MAT1作为三聚体CAK激酶的重要组成部分 ,对CAK的活性起着“分子开关”的作用 ,因而在调节信号分子转导、控制细胞周期的进程、影响细胞的增殖和凋亡等方面起着关键作用。作为肿瘤相关基因 ,MAT1是肿瘤基因治疗靶目标中值得期待的一个突破口。 刘建平 袁世珍关键词:细胞周期 siRNA沉默MAT1基因抑制胰腺癌细胞生长的实验研究 胰腺癌是预后最差的恶性肿瘤,手术、化疗和放疗等传统治疗方法效果均不理想,作为一种极具潜力的肿瘤治疗手段,胰腺癌的基因治疗正以迅猛的速度发展.作为一种简单有效的代替基因敲除的新的基因治疗工具,RNAi除了可以高通量的研究基... 刘建平 袁世珍 张世能关键词:胰腺癌 细胞生长 癌细胞 基因治疗 文献传递 应全面加强胰腺癌相关抑郁的临床诊断和治疗 被引量:1 2008年 胰腺癌预后极差,胰腺癌相关抑郁的发生率高,对胰腺癌的发生、发展和预后有不容忽视的影响,应加强和重视其临床诊治。 贾林 袁世珍关键词:胰腺癌 抑郁症 慢性乙型肝炎病毒携带者外周血T细胞亚群及其表达的CD28和CD80分子 被引量:1 2003年 【目的】探讨慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)携带者的外周血细胞免疫状态。【方法】采用荧光素双标记的流式细胞仪法检测慢性 HBV 携带者和对照组外周血 T 细胞亚群、表达协同刺激分子 CD28和 CD80的 T 细胞的百分率。【结果】与健康对照组相比,慢性 HBV 携带者外周血 T 细胞亚群及表达协同刺激分子 CD28和 CD80的 T 细胞无显著性差异。【结论】与健康人比较,慢性 HBV 携带者机体的细胞免疫功能未见明显降低。 苏红 袁世珍 黄志明 魏菁 文艳玲转染NK4基因对人胰腺癌SW1990细胞生物学特性的影响 被引量:3 2004年 背景与目的:肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)通过其受体c-Met的激活,在调节肿瘤侵袭和转移和血管形成中具有重要作用。NK4不仅是HGF的拮抗剂,也是血管形成的抑制剂,阻断HGF/c-Met途径和肿瘤血管的形成可成为抗肿瘤治疗的策略之一。为此,我们构建NK4基因真核细胞表达载体并进行转染研究,探讨NK4基因在胰腺癌细胞中的表达及其对胰腺癌细胞生物学特性的影响。方法:对重组pcDNA3/hNK4质粒进行酶切,将NK4基因克隆到真核表达载体pRC/CMV2,应用脂质体将重组pRC/CMV2-hNK4质粒转入胰腺癌SW1990细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Westernblot)分别检测转染的肿瘤细胞中NK4mRNA和蛋白的表达并筛选出高表达的细胞克隆。采用Transwall小室和Matrigel侵袭小室测定转染NK4基因对胰腺癌细胞运动和侵袭的影响。结果:转导NK4基因的SW1990细胞可表达并分泌NK4,RT-PCR扩增出预期的453bp片段,Westernblot显示有50000的NK4蛋白,转染NK4基因对胰腺癌细胞SW1990的生长无抑制作用(P>0.05),但可显著抑制HGF或成纤维细胞所诱导胰腺癌细胞的运动和侵袭(P<0.01),而转染空载体则无此作用(P>0.05)。结论:转染NK4基因可抑制胰腺癌细胞的运动和侵袭,在胰腺癌抗转移治疗中可能具有重要作用。 赖人旭 袁世珍 Toshikazu Nakamura关键词:NK4基因 转染 细胞生物学特性 真核细胞表达载体 细胞克隆