谢三群
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 供职机构：大连工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 响应面法优化海洋枯草芽孢杆菌HS-A38增殖发酵培养基被引量：10
- 2012年
- 在摇瓶培养条件下,优化提高海洋枯草芽孢杆菌菌体浓度的发酵培养基组分。采用Plackett-Burman法确定了影响菌体浓度的显著性因子,即葡萄糖和ZnSO4;通过最陡爬坡实验逼近这两个重要因子的最大响应稳定区域,采用中心组合实验确定显著性因子的最佳水平,并用Design expert 7.13软件进行回归分析。优化后培养基的组成为:葡萄糖8.49g/L,豆粕粉12.0g/L,尿素0.625g/L,酵母膏4.0g/L,K2HPO44.0g/L,ZnSO40.053g/L。优化后的活菌浓度达到1.64×109 cfu/mL,与优化前菌体浓度(7.22×108 cfu/mL)相比,提高了1倍多。通过统计优化培养基组分可有效提高海洋枯草芽孢杆菌HS-A38的发酵液菌体浓度。
- 张欢丛丽娜侯英敏王丹谢三群
- 关键词：枯草芽孢杆菌响应面法活菌数
- 海刺参(Stichopus japonicus)电压依赖性钙离子通道β亚基基因及其编码产物的结构特点被引量：3
- 2009年
- 电压依赖性钙离子通道(voltage-dependent calcium channels,VDCC)是细胞膜上控制Ca2+进入胞内的特殊蛋白质,VDCCβ亚基具有调节其通道活性的作用.使用RT-PCR和RACE PCR技术,从海刺参(Stichopus japonicus)肠中克隆得到电压依赖性钙离子通道β亚基(SjCaβ)基因,所得序列提交GenBank,登录号EU853658.该基因全长1 867 bp,包含1个1 614 bp的开放阅读框(ORF),编码537个氨基酸.将SjCaβ与多种无脊椎动物钙离子通道β亚基进行分析比较,发现它们有较高的同源性,并具有钙离子通道β亚基基因内保守的2个功能区域,即SH3功能区(src-homology 3 domain)和GK功能区(guanylate kinase domain).在功能区域附近还具有电压依赖性钙离子通道β亚基特有的BID区(βinteraction domain),氨基酸保守序列为PYDVVP-RP---VGPSLKGYEVTDMMQKALFDF,进一步确定了得到的cDNA序列为海刺参电压依赖性钙离子通道β亚基.对SjCaβ的二级结构进行了预测,构建了系统进化发育树,并运用同源建模法构建了SjCaβ的三维结构模型.研究结果对深入研究海刺参离子通道的结构以及在信号传导过程中的作用有着重要意义,并为研究海刺参自溶等问题提供一定的理论基础.
- 杨冠科丛丽娜谢三群张宗申朱蓓薇
- 关键词：Β亚基
- 海洋枯草芽孢杆菌HS-A38产直链脂肽活性物质的初步检测被引量：6
- 2011年
- 从海参肠道中分离得到了一株海洋枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HS-A38,将其发酵上清液经盐酸沉淀、有机溶剂萃取得到具有广谱抗菌活性的代谢物质。采用薄层层析和茚三酮显色检测到4种物质,分别命名为化合物1、2、3和4;应用层析板覆盖指示菌的生物自显影技术对其抗菌活性成分进行追踪、检测,结果发现化合物1和2具有显著抑制弧菌的作用。进一步检测分析表明,化合物1、2和4具有很强的热稳定性,初步推断它们属于直链的脂肽类化合物,并且这4种物质出现在不同的发酵代谢时期,这将为研究群体效应提供基础检测依据。
- 张欢丛丽娜侯英敏李爱民谢三群王丹
- 关键词：抗菌活性
- 基因工程菌发酵生产海洋生物溶菌酶的研究与开发
- <正>研究背景:近年来,我国水生无脊椎动物(如对虾、贝类、海参等)养殖业取得了巨大进步。然而,随着养殖环境日趋恶化和人为原因导致的水质污染等问题的出现,使我国的水产养殖业依旧面临着流行性病原(细菌、病毒和真菌)的考验。为...
- 丛丽娜谷跃峰王丹谢三群王秀霞
- 文献传递
- 牡蛎溶菌酶在原核细胞中的高效表达
- 牡蛎（Oyster）,是一种世界性的贝类,也是我国第一大养殖贝类,广泛分布于辽宁、河北、山东、江苏、浙江、广东、广西、海南等地。牡蛎肉中含有丰富的优质蛋白质,是一种高蛋白低脂肪的优良食品。且还有防治心血管病及抗凝血、降血...
- 谢三群
- 关键词：太平洋牡蛎纯化
- 文献传递
- 太平洋牡蛎i型溶菌酶基因的克隆与重组高效表达被引量：1
- 2011年
- 在双壳类软体动物牡蛎体内,溶菌酶(Lysozyme)在实现宿主免疫防御,破坏和消除侵入体内的病原中发挥着重要的作用。根据GenBank已有的太平洋牡蛎溶菌酶的全长cDNA序列(GenBank:AB179775),通过RT-PCR技术,从太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)中克隆得到溶菌酶(简称为CgLys)基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列。生物信息软件分析表明,其ORF为414 bp,编码137个氨基酸(aa),前20个aa为信号肽,成熟肽由117个aa组成,其分子量为13.2 kD。通过构建分子系统发育树对其同源性进行分析比较,初步推断该CgLys属于i型溶菌酶。将该CgLys基因的成熟肽亚克隆进原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-CgLys,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS。该基因工程菌经IPTG诱导发酵后,成功高效地表达了重组CgLys蛋白,其分子质量约为18 kD。该重组CgLys蛋白主要存在于细菌裂解液的上清液中,即以可溶性蛋白形式存在。上述结果将显著简化后续的蛋白纯化过程,为今后扩大规模生产牡蛎溶菌酶提供参考。
- 谢三群丛丽娜张欢王丹
- 关键词：无脊椎动物太平洋牡蛎纯化
- 重组海参溶菌酶工程菌发酵及表达产物纯化和性质的研究被引量：4
- 2011年
- 旨在研究重组海参i型溶菌酶(Stichopus japonicus lysozyme,SjLys)可溶性表达的发酵条件、纯化及生物学性质。采用摇瓶发酵的培养方式,分别从培养基组分和发酵条件两个方面对获得可溶性重组SjLys进行研究。表达产物通过亲和层析纯化以及凝胶过滤层析脱盐,获得了电泳纯为95%的重组SjLys蛋白。进一步对其生物学活性分析,结果表明该酶最适温度为45℃,最适pH值为6.8,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有广谱抑菌作用。上述结果将为海参溶菌酶进行产业化奠定应用基础。
- 王丹丛丽娜谢三群张欢
- 关键词：可溶性蛋白纯化酶活性溶菌酶
