赵爱华
- 作品数：96 被引量：138H指数：7
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术农业科学更多>>
- 一种免疫佐剂和含有该佐剂的疫苗
- 本发明提供了一种新型免疫佐剂，其主要成分是从卡介菌中提取的CpG-DNA，其为富含CpG基序的DNA。该佐剂为免疫刺激型佐剂，本身具有免疫活性作用，在体内诱导的是Th1型免疫应答，可作为治疗与预防用疫苗佐剂。
- 王国治赵爱华贾淑珍乔来艳寇丽杰
- 文献传递
- 国内外卡介菌的分子遗传学特性被引量：7
- 2009年
- 目的比较我国生产用卡介菌上海菌株与国际常用卡介菌亚株(巴斯德1173P2株、法国F6株、丹麦1331株、丹麦2株、日本172株、Connaught)在分子遗传学上的差异。方法应用PCR和多重PCR方法,对国内外不同卡介菌的各缺失区(RD1、RD2、RD8、RD14、RD16、nRD18、RDDenmark/Glaxo)、插入序列IS6110拷贝数及基因座SenX3-Regx3串联重复序列拷贝数进行检测。结果我国生产用卡介菌上海菌株(BCG Chinese)缺失RD1和RD2,不缺失RD8、RD14、RD16、nRD18及RDDen-mark/Glaxo,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有3个串联重复序列,PCR产物为353bp;巴斯德1173P2株缺失RD1、RD2、RD14和nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;法国F6株缺失RD1、RD2和nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;丹麦1331株缺失RD1、RD2及RDDenmark/Glaxo,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;丹麦2株与丹麦1331株相似,只是SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列和3个串联重复序列并存的现象;日本172株只缺失RD1,RD16只显示401bp的产物,含有2个IS6110插入序列;Connaught株缺失RD1、RD2、RD8及nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有1个串联重复序列。结论我国生产用卡介菌上海菌株与国外其他卡介菌亚株在分子遗传学特性上有一定的差异。
- 赵爱华贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词：多重PCR
- 针对世界卫生组织对卡介苗两次文件立场观点差异的探讨
- 对世界卫生组织1995年发布的卡介苗声明与2004年发布的卡介苗接种立场文件中的相关观点进行比较、分析、解读,为重新认识卡介苗提供参考依据。同时,从结核病预防控制策略角度,探讨进行卡介苗对青少年及成年人保护效力临床评价的...
- 赵爱华徐苗郑素华逄宇吴雪琼王国治
- 关键词：结核疫苗卡介苗
- 文献传递
- 关于BCG—PPD与TB—PPD在结核分枝杆菌感染、结核病筛查结果差异的相关意见
- 2015年
- 目前国内有经结核分枝杆菌滤液提取的PPD（TB-PPD）与减毒牛分枝杆菌提取的PPD（BCG-PPD）2种产品，TB-PPD还有5IU／人份与2IU／人份2种剂量，使用者对不同品种与剂量产品用途存在疑问。根据由国家药品主管部门批准的PPD规程与使用说明书，TB-PPD与BCG-PPD均以PPD国际标准PPDS标化的同剂量国家标准品进行标化，活性效价完全一致。目前国内使用的主流产品50IU／ml规格的TB-PPD与BCG-PPD用途相同，可用于结核病的临床诊断、卡介苗接种对象的选择及卡介苗接种后的质量监测；而20IU／ml规格的TB-PPD则专供结核病流行病学调查及临床疑似结核病患者诊断使用。建议使用者根据PPD使用说明书及用途选择适用的制品。
- 卢锦标王国治赵爱华
- 关键词：BCG-PPD结核分枝杆菌感染筛查结果TB
- 鼠疫耶尔森菌基因分型国家参考品研制
- 2023年
- 鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)(简称鼠疫菌)引起的一种自然疫源性疾病,以发病急、传播快、病死率高为特征,对人类社会影响巨大。鼠疫主要在啮齿类动物中引起原发性感染,病原菌经鼠蚤传播给人,其引起的疾病主要包括腺鼠疫、肺鼠疫和败血型鼠疫3种类型。其中肺鼠疫发病迅猛,可通过空气在人间传播,病死率极高[1]。人类历史上曾发生过三次鼠疫大流行,造成上亿人死亡。时至今日,很多地区,如非洲、亚洲、美洲,仍将鼠疫视为可能会死灰复燃的烈性传染性疾病之一[2-4]。
- 张园园靳娟彭文轩周亚洲赵爱华崔玉军杨瑞馥郭彦魏东
- 关键词：肺鼠疫腺鼠疫原发性感染自然疫源性疾病鼠疫耶尔森菌国家参考品
- 一种未甲基化CpG二核苷酸的含量的检测方法
- 本发明提供了一种测定未甲基化CpG含量的方法，该方法采用特异甲基化酶SssI修饰CpG二核苷酸的胞嘧啶为5－甲基胞嘧啶，然后利用核酸酶P1和细菌碱性磷酸酶将DNA水解为单个脱氧核苷，利用反相－高效液相法对修饰和未修饰的D...
- 王国治赵爱华贾淑珍乔来艳寇丽杰
- 文献传递
- 重组结核杆菌融合蛋白(EC)产品质量标准的建立被引量：5
- 2020年
- 目的建立重组结核杆菌融合蛋白(EC)[该制品名称是国家药典委员会确定的药品中文通用名称,"EC"为重组融合蛋白"结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)";简称"EC"]原液及成品的质量标准。方法选取6批次EC原液及11批次EC成品、体质量300~400g无特定病原体(SPF)级白色豚鼠21只、卡介苗(BCG)活菌菌液(1mg/ml)、结核分枝杆菌减毒株H37Ra活菌菌液(2mg/ml)作为实验材料,建立EC原液质量标准,包括残余抗生素活性检测、致敏效应实验、效价测定及动物法鉴别实验;建立EC成品质量标准,包括鉴别实验及效价测定;应用建立的质量检测标准对连续6批次EC原液和11批次EC成品进行检测,验证其适用性和可行性。结果(1)EC原液残余抗生素活性检测。①专属性实验:磷酸盐缓冲液的吸光度值(A值)为1.736,卡那霉素标准品(0.0ng/ml)的A值为2.178;②线性与范围实验:卡那霉素标准品在0.5~40.5ng/ml范围内,连续3次实验回归方程拟合优度的判定系数R^2均大于0.99;③准确性实验:连续3批次EC原液的卡那霉素残留量回收率分别为112.163%、117.285%、103.527%;④重复性实验:连续3批EC原液重复性实验A值相对标准偏差(RSD)分别为5.59%、9.18%、8.07%;⑤中间精密度实验:同一实验员不同时间及不同实验员检测连续3批次EC原液卡那霉素残留量检测均小于定量限0.5ng/ml,为限量测定;⑥耐用性实验:改变读板时间(0、5、10min)对EC原液卡那霉素残留量检测无影响,卡那霉素残留量均小于定量限0.5ng/ml。(2)EC原液效价测定:稀释度为1μg/ml(5U/ml)、2.5μg/ml(12.5U/ml)、5μg/ml(25U/ml)及10μg/ml(50U/ml)时,每个稀释度对应的2批次EC原液动物皮肤试验的硬结或红晕平均直径及硬结或红晕平均直径总和比值分别为(15.17±0.88)mm、(13.67±1.25)mm、1.11(91.00/82.00);(17.00±1.76)mm、(16.08±1.32)mm、1.06(102.00/96.50);(19.58±1.69)mm、(17.67±1.37)mm、1.11(117.
- 张凯沈小兵陶立峰韦芬陈保文仇晶晶陈伟卢锦标朱银猛程兴钟再新赵爱华蒲江
- 关键词：药物评价体外研究
- 重组结核分枝杆菌11kDa蛋白鉴别潜伏性结核感染与卡介苗接种的研究被引量：5
- 2020年
- 目的评价重组结核分枝杆菌11kDa(相对分子质量为11000)蛋白(简称"重组11kDa蛋白")在潜伏性结核感染筛查和卡介苗接种鉴别中的应用。方法由首都医科大学附属北京胸科医院联合北京市昌平区结核病防治所、北京市怀柔区结核病防治所和北京市大兴区结核病防治所,于2014年7月至2016年3月在以上3个区的高校和工厂招募健康志愿者。共计招募3001名志愿者,所有志愿者体检合格,均签订知情同意书。对所有志愿者采用Mantoux法进行重组11kDa蛋白和结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)同体双臂皮肤试验,分别于不同前臂皮内注射0.1ml重组11kDa蛋白(10μg/ml)和0.1ml TB-PPD(50U/ml),观察注射后72h后的皮肤反应。于皮肤试验前采集所有志愿者的静脉血,进行体外γ-干扰素释放试验(IGRA)检测。采用"一致率(%)"和"一阶一致性系数(the first-order agreement coefficient,AC1)比较重组11kDa蛋白皮肤试验、TB-PPD试验及IGRA结果的差异。3001名志愿者均接受3种方法检测,其中475名3种检测结果均为阴性的受试者,采用数字表法按随机双盲的原则,以2∶1的比例接种卡介苗(318名;失访8例)和安慰剂(147名;失访2例),接种3个月后再次进行重组11kDa蛋白皮肤试验、TB-PPD皮肤试验及IGRA,采用"一致率(%)"和"AC1"比较其结果差异。结果健康志愿者潜伏性结核感染筛查中,IGRA阳性率(34.4%,1033/3001)明显高于重组11kDa蛋白(32.2%,966/3001),差异有统计学意义(χ^2=22.787,P<0.001);IGRA与重组11kDa蛋白的一致率为93.4%(2804/3001),AC1值为0.882(95%CI=0.866~0.898),两者有较好的一致性。TB-PPD阳性率(47.7%,1430/3001)明显高于重组11kDa蛋白(32.2%,966/3001),差异有统计学意义(χ^2=182.146,P<0.001);TB-PPD与重组11kDa蛋白的一致率为60.6%(1819/3001),AC1值为0.243(95%CI=0.207~0.279),两者的一致性较差。卡介苗接种鉴别研究中,接种卡介苗的志愿者重组11kDa蛋白的阳性率(1.3%,4/318)与IGRA(3.1%,10/318)�
- 赵爱华康万里王国治高正伦都伟欣卢锦标沈小兵苏城徐苗郑素华
- 关键词：重组蛋白质类试剂盒皮肤试验卡介苗
- 冻干重组结核杆菌融合蛋白(EC)原液效力评价用国家参考品的初步建立被引量：3
- 2020年
- 目的以冻干重组结核杆菌融合蛋白(EC)[该制品名称是国家药典委员会确定的药品中文通用名称,"EC"为重组融合蛋白"结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)"](以下简称"EC")原液为原材料,研制EC变态反应原原液效力评价用国家参考品。方法以电泳法、高效液相色谱法分别测定备选EC原液纯度,纯度合格后经精密称量、分装、冻干制成候选国家参考品,再测定其蛋白质和水分含量。将候选国家参考品稀释成不同稀释度后,皮内注射结核分枝杆菌活菌致敏的豚鼠,根据皮肤试验硬结或红晕反应平均直径大小(简称"反应平均直径大小")结果探索原液效价测定的适宜稀释度。在此基础上,将候选国家参考品用于EC原液的效价测定并进行方法验证,初步评价其适用性能。研究还初步观察了候选品在-20℃放置24个月的稳定性。结果 EC原液电泳法纯度为100.00%,高效液相色谱法纯度为95.33%,候选国家参考品蛋白质含量为508μg/瓶,水分含量为1.57%,分装精度控制在±1%以内。稀释度探索结果显示:候选品稀释度为2.5μg/ml(12.5U/ml)、5μg/ml(25U/ml)和10μg/ml(50U/ml)时剂量对数反应平均直径大小曲线有良好的线性关系(R^2=0.9944),可作为后续研究的适宜稀释度。将候选国家参考品用于EC原液效价测定,两者剂量对数反应平均直径大小曲线趋势基本一致(R^2=0.9878,R^2=0.9643),且每个稀释度EC原液与相应稀释度候选国家参考品反应平均直径大小的比值均满足1.0±0.2。方法验证结果显示:候选国家参考品和EC原液的剂量对数反应平均直径大小曲线趋势基本一致(R^2=0.9999,R^2=0.9815),且两者相应稀释度反应平均直径大小的比值均满足1.0±0.2,方法可行。初步稳定性研究结果显示:-20℃放置24个月的候选国家参考品效价测定性能稳定。结论候选国家参考品的纯度、蛋白质含量、水分含量及均匀
- 都伟欣韦芬卢锦标赵爱华蒲江王国治徐苗
- 关键词：分枝杆菌结核重组融合蛋白质类冷冻干燥法国家参考品效价
- 应用四唑鎓盐法快速检测卡介苗活菌含量被引量：6
- 2009年
- 目的通过四唑鎓盐(XTT)方法快速检测卡介苗样品中的活菌含量,结果与传统培养法菌落形成单位计数结果进行相关性分析,探讨应用XTT方法快速检测卡介苗(BCG)制品中的活菌含量的可行性。方法活菌含量是BCG疫苗重要的质控指标,它决定疫苗的效力。传统活菌含量的检测采用固体培养法计数菌落形成单位,但耗时长,重复性差。因此快速检测卡介苗活菌含量的方法急需建立和应用。四唑鎓盐(XTT)由于其水溶性的显色反应能够反映细胞的活力,同样也能应用于细菌的活力检测。其原理是细菌在代谢过程中,通过氧化-还原反应将XTT还原为可溶性的高色产物甲臢(formazan),甲臢含量反应了细菌的活菌数量。将该方法应用于卡介苗活菌含量的快速检测中,通过已知活菌含量BCG参考品制备活菌含量和XTT有色产物吸光度值的参比曲线,根据未知样品的吸光度值,在此参比曲线上读出未知样品的活菌含量。同时将该快速检测方法得到的结果和传统培养法活菌含量结果进行相关性分析。结果XTT法能反应BCG制品中活菌的含量差异,在一定的浓度范围内,活菌含量和有色产物吸光度值间有线性关系,相关系数R2达到0.99以上,应用该方法对10批BCG样品活菌含量进行快速检测,结果和培养法菌落形成单位(CFU)结果的相关系数r=0.834,实验可在24h左右完成。结论XTT法能够快速检测BCG制品中的活菌含量,结果与培养法菌落形成单位计数结果有较好的相关性,实验耗时由4周减少到24h,该法可以用于BCG活菌含量快速检测。
- 赵爱华贾淑珍寇丽杰乔来艳王国治
- 关键词：卡介苗结核
