金伟波
- 作品数：51 被引量：82H指数：6
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 拟南芥基因组中新的microRNA预测及分析被引量：2
- 2007年
- MicroRNA(miRNA)是一类存在于动植物体内、长度为21￣25nt的内源性小RNA,对生物体的转录后基因调控起着关键作用,但一些低丰度的miRNA和组织特异性miRNA往往很难发现。为了系统识别拟南芥基因组中新的非同源miRNA,首先基于已报道的拟南芥miRNA的特征,从全基因组范围中筛选出453条可能的miRNA前体;其次,为了进一步对上述miRNA前体进行筛选,利用人的miRNA前体数据构建了支持向量机模型GenomicSVM,该模型对人测试集的敏感性和特异性分别为86.3%和98.1%(30个人miRNA前体和1000个阴性miRNA前体),对拟南芥测试集的正确率为93.6%(78个miRNA前体);最后,利用GenomicSVM预测上述453条miRNA前体序列,得到了37条候选的新的拟南芥miRNA前体,为进一步的miRNA实验发现研究提供了指导。
- 金伟波孔栋应晓敏郭蔼光李伍举
- 关键词：拟南芥基因组MICRORNA
- 谷胱甘肽硫转移酶与hEGF在大肠杆菌中的融合表达及活性研究被引量：2
- 2007年
- 为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子(hEGF),将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pGEX-4t-1(+)-hEGF转化入BL21-CodonPlusTM-RP表达宿主菌进行大量表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在。收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过GlutathioneSepharoseTM4B纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白。以兔抗人EGF单克隆抗体为一抗,进行Western blotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hEGF。最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hEGF生物学活性。
- 吴方丽金伟波王保莉
- 关键词：表皮生长因子PGEX-4T-1生物学活性
- 小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因的花粉管通道法转化被引量：8
- 2008年
- 【目的】利用优质高分子量麦谷蛋白亚基对小麦进行遗传转化和品质改良。【方法】采用花粉管通道法,将小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因导入洛阳8716、陕354、陕893、小偃107和陕150 5种不含该亚基的小麦品种中,转化后代在大田播种出苗后,利用小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因特异性引物进行PCR检测,分析其转化率。【结果】不同品种、不同处理间转化率存在很大差异,其中以陕354授粉后切去柱头,滴加50 ng/μL DNA液处理的转化率最高,为1.01%,所有转化材料的平均转化率为0.56%。【结论】利用花粉管通道法对小麦进行遗传转化是可行的。
- 刘香利刘缙郭蔼光赵惠贤金伟波
- 关键词：小麦花粉管通道法转基因小麦PCR法检测
- 小麦高分子量谷蛋白14亚基基因的PCR体系及原核表达研究被引量：2
- 2007年
- 小麦高分子量谷蛋白14亚基(HMW-GS1Bx14)被认为可能对面团加工品质有很大贡献的亚基.为了验证其功能,本研究欲通过PCR方法扩增14亚基基因,并使其在大肠杆菌中大量表达,为下一步用掺粉实验验证其功能奠定基础.但是由于HMW-GS1Bx14基因由2388bp个碱基组成,GC含量较高,并且在基因中包含约1.6kb的重复区,所有这些都使常规PCR难以成功扩增出HMW-GS1Bx14基因.本研究采取以下三种措施①设计一对高Tm值的特异引物;②采用二段法PCR反应程序;③改良PCR反应的缓冲体系、添加有机溶剂(DMSO,甜菜碱等)和Taq酶保护剂(BSA等);最后成功地扩增出目的片段.此外由于不同生物间对密码子使用存在很大差异,因此HMW-GS1Bx14基因很难在大肠杆菌中得到有效大量的表达.本研究选用万能菌株Rosetta(DE3)plysS作为表达用菌,从而克服了不同生物间密码子使用偏爱性的问题,成功的使HMW-GS1Bx14得到表达,为下一步研究HMW-GS1Bx14的基因功能奠定了基础.
- 金伟波吴方丽郭蔼光
- 关键词：小麦原核表达
- 水稻microRNA基因的预测及验证
- 本研究利用已报道的水稻pre-miRNA的序列与结构的信息,通过支持向量机(Support Vector Machine,SVM)在miRNA前体上预测成熟区,在水稻上得到敏感性和特异性分别为86．7％和100％;在拟南...
- 金伟波吴方丽孔栋刘变芳李楠郭蔼光
- 文献传递
- 能够促进丹参毛状根中丹参酮积累的诱导方法
- 本发明公开了一种能够促进丹参毛状根中丹参酮积累的诱导方法，包括以下步骤：1)丹参毛状根的初培养：在每50mL的6，7‑V培养基接种0.15～0.2g丹参毛状根，于100～150rpm、24～26℃的培养条件下黑暗培养17...
- 梁宗锁杨东风韩名宇郭万里杨宗岐金伟波刘岩
- 文献传递
- 可促进丹参毛状根活性成分积累的改良6,7-V培养基
- 本发明公开了一种可促进丹参毛状根活性成分积累的改良6,7‑V培养基，该改良6,7‑V培养基相对于常规的6,7‑V培养基而言，将NaH<Sub>2</Sub>PO<Sub>4</Sub>的浓度由150mg/L改成1.5mg...
- 梁宗锁杜旭红韩名宇杨东风金伟波陈海敏张海花齐志鸿
- 文献传递
- 一种RNA抑菌剂miRNA482a及作物病菌抑制剂
- 本发明提供一种RNA抑菌剂miRNA482a，其具有SEQ ID NO.1所示的RNA序列。本发明还提供一种作物病菌抑制剂，所述抑制剂中至少包含miRNA482a。具体的，所述抑制剂可以为包含所述miRNA482a的喷雾...
- 吴方丽黄雕金伟波黄雅妮
- 文献传递
- 一种RNA抑菌剂siR2及作物病菌抑制剂
- 本发明提供一种RNA抑菌剂siR2，其具有SEQ ID NO.1所示的RNA序列。本发明还提供一种作物病菌抑制剂，所述抑制剂中至少包含siR2。具体的，所述抑制剂可以为包含所述siR2的喷雾剂，通过喷雾来实现对灰霉病的有...
- 吴方丽黄雕金伟波黄雅妮
- 文献传递
- 一种可用于灰霉病防治的RNAsqu纳米分子及一种作物病菌抑制剂
- 本发明提供一种可用于植物灰霉病防治的RNAsqu纳米分子及一种作物灰霉病菌抑制剂，其具有SEQ ID NO.1所示的RNA序列。本发明还提供一种灰霉病菌抑制剂，所述抑制剂中至少包含RNAsqu纳米分子。通过实验证明，添加...
- 金伟波赵夏阳吴方丽
