金超智
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 蛋白激酶CK2B的相互作用蛋白筛选被引量:1
- 2007年
- 目的研究与蛋白激酶CK2B发生相互作用的蛋白。方法应用酵母双杂交系统,以人蛋白激酶CK2B为诱饵,筛选成人肝cDNA文库,利用生物信息学分析,一对一酵母回复性杂交等提供的信息,筛除假阳性。结果经过酵母双杂交共获得211个克隆,经过验证分析,最终确定12个相互作用蛋白,其中3个是已知的,9个是新发现的相互作用。结论获得的9个新的相互作用蛋白可能揭示CK2新的作用机制。
- 陈慧储著朗金超智王建杨晓明汪思应
- 关键词:蛋白激酶类
- 人类肝脏重要蛋白质相互作用连锁图研究进展
- 肝脏是人体最大的代谢器官,在人体中具有不可替代的重要生理功能。蛋白质相互作用连锁图研究是揭示重要蛋白质未知功能的重要手段,是理解肝脏生理功能和分子机制的基础。根据肝脏的基因表达谱,我们选取了代谢、物质转运、氧化应激、信号...
- 杨晓明王建许望翔虞东辉杨永升刘琼明周颖张翠莉吴志豪张万巧刘涛唐刘君原艳芝郝峰金超智贺福初
- 文献传递
- 应用酵母双杂交系统筛选MRP2胞内区相互作用蛋白被引量:1
- 2007年
- 目的应用酵母双杂交技术研究与多药耐药蛋白MRP2发生相互作用的蛋白。方法应用酵母双杂交系统,以人MRP2胞内区C末端220个氨基酸为诱饵,筛选成人肝cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白。利用生物信息学分析,一对一酵母回复性杂交等提供的信息,筛除假阳性。结果经过酵母双杂交共获得162个克隆,经过验证分析,最终确定3个无重复阳性克隆。结论获得的3个基因编码的蛋白可能揭示MRP2新的作用机制。
- 刘涛金超智张翠莉陈慧储著朗王英杰杨晓明
- 关键词:MRP2酵母双杂交蛋白质相互作用
- 酵母双杂交系统筛选GATA-1相互作用蛋白质及功能验证被引量:2
- 2010年
- 目的 利用酵母双杂交技术从人脑cDNA文库中筛选与人GATA-1相互作用的蛋白质.方法 从人K562细胞中扩增出全长GATA1基因,设计引物将其3段截断体亚克隆入酵母表达载体pDBLeu中,转化至AH109感受态酵母中,利用酵母双杂交技术筛选人脑cDNA文库中与其相互作用的蛋白质,阳性克隆通过回转及免疫共沉淀试验进行验证,利用3xGATA荧光素酶报告基因对相互作用蛋白质进行功能验证.结果 成功构建出酵母诱饵蛋白表达质粒pDBLeu-GATA1(1),pDBLeu-GATA1(2),pDBLeu-GATA1(3),筛到34个阳性克隆,用生物信息学分析及回转验证得到5个与GATA-1相互作用的候选蛋白,通过免疫共沉淀试验进一步验证,获得3个蛋白质能与GATA-1相互作用,分别是ECSIT,EFEMP1和GPS2.荧光素酶试验表明这3个蛋白质均能对GATA1的转录活性产生影响,证实它们之间的相互作用具有影响GATA1转录的功能.结论 应用酵母双杂交技术及免疫共沉淀试验,从人脑cDNA文库中成功获得3个与GATA-1相互作用并对其转录活性具有调节作用的蛋白质,为研究GATA1蛋白质的功能提供了新的线索.
- 冯志伟李长燕陈慧金超智唐刘君张卜兮原艳芝詹轶群王建杨晓明
- 关键词:GATA-1酵母双杂交蛋白质相互作用免疫共沉淀
- 酵母双杂交筛选类固醇激素合成急性调节蛋白的相互作用蛋白质
- 2012年
- 目的:利用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库中与类固醇激素合成急性调节蛋白(STAR)相互作用的蛋白质。方法:将全长STAR基因克隆到酵母表达载体pDBLeu中,形成诱饵;将构建好的诱饵质粒转化至AH109酵母感受态中,利用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库中与其相互作用的蛋白质,并进行相互作用的回转验证。结果:构建了酵母诱饵蛋白表达质粒pDBLeu-STAR,并筛选到6个猎物,其中有5对相互作用回转验证阳性。结论:为进一步研究STAR的功能和作用机制提供了新的线索。
- 杨晓扬于淼王建唐刘君陈慧金超智张卜兮詹轶群王晓辉杨晓明
- 关键词:酵母双杂交蛋白质相互作用