陈宝军
- 作品数：47 被引量：160H指数：8
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胃癌相关抗原MG7-Ag模拟肽表位的筛选及测序分析被引量：14
- 2000年
- 目的 从噬菌体呈现的随机肽库中筛选胃癌单克隆抗体MG7所识别的胃癌相关抗原的短肽模拟表位 ,为进一步研究胃癌相关抗原与单抗结合的结构基序奠定基础。方法 用胃癌单克隆抗体MG7对呈现于噬菌体衣壳蛋白pⅧ上的 2个九肽库分别进行亲和富集和免疫筛选 ;阳性克隆进一步用荧光标记和硝酸纤维素膜斑点印迹法证实其结合活性 ;经随机抽取部分阳性克隆进行DNA序列分析 ,推导出相应噬菌体呈现肽的氨基酸序列 ,通过序列比较分析相对保守的表位信息 ;运用HLA分子结合分析软件预测已测序短肽与HLA分子结合的可能性。结果 经反复多轮筛选和结合活性检测 ,从pⅧ和pⅧ cys 2个噬菌体肽库中分别得到了 12和 30个阳性克隆 ;通过对部分阳性克隆进行测序分析 ,推导相应的随机肽序列和序列比较分析 ,得到具有相对保守性的表位信息如PLX0 2 S、SAVR、XRMX、YARN等。经计算机预测分析 ,发现它们可与HLA多个分子结合。结论 PLX0 2 S、SAVR、XRMX、YARN等有可能为胃癌单克隆抗体MG7所识别的表位基序。
- 徐立乔泰东陈宝军欧阳为明丁杰张庆华周隽吴昕彦金伯泉樊代明
- 关键词：噬菌体单克隆抗体肽类胃肿瘤
- 胃癌单克隆抗体MG7的噬菌体呈现型抗独特型单链抗体ScFv的制备被引量：13
- 2001年
- 目的 获得胃癌单克隆抗体 (简称单抗 )MG7的噬菌体呈现型抗独特型单链抗体ScFv(抗 IdScFv) ,为研制MG7的抗 IdScFv重组胃癌瘤苗奠定基础。方法 以MG7单抗与匙孔血蓝蛋白(KLH)的交联物免疫Balb/c小鼠 ,取脾分离mRNA。以逆转录聚合酶链反应技术分别扩增抗体重、轻链可变区基因 (VH和VL) ,经linkerDNA连接形成ScFv基因片段。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1。在辅助噬菌体M13KO7的作用下 ,获得重组噬菌体抗体ScFv。以单抗MG7对重组噬菌体抗体ScFv进行四轮筛选后 ,随机挑取克隆 ,经噬菌体ELISA筛选抗 IdScFv单克隆 ,并对其所属抗 Id类型进行初步鉴定。结果 VH、VL和ScFvDNA分别约为 340、32 0和 75 0bp。经富集后 ,在随机筛检的 6 0个克隆中得到 2 4个噬菌体呈现型抗 IdScFv单克隆 ,阳性率为40 %。在 2 4个克隆中 ,有 5个为 β或γ型抗 IdScFv。 结论 用噬菌体抗体技术能够成功地获得单抗MG7的抗 IdScFv ,为开展用抗
- 何凤田聂勇战韩者艺陈宝军乔太东樊代明
- 关键词：噬菌体胃癌单克隆抗体MG7单链抗体
- 胃癌细胞内正常细胞物质MGf_1S和MGf_2S的丢失及其在细胞癌变中的意义
- 1989年
- 本文用正常胃粘膜免疫Balb/c小鼠,用细胞杂交技术制得2株单克隆抗体,即MGf1和MGf2。这两株抗体能与正常胃粘膜细胞发生强阳性反应,本文称MGf1识别的物质为MGf1S,称MGf2识别的物质为MGf2S。用ABC免疫酶标组记法发现胃癌细胞内MGf1S和MGf2S出现显著减少甚至完全消失。本文讨论了这种现象在细胞癌变中的意义。
- 樊代明张学庸陈希陶牟震先胡家露陈宝军乔太东丁杰陈增民朱延光
- 关键词：胃癌单克隆抗体细胞癌
- Occludin在胃癌耐药细胞SGC7901中mRNA水平被引量：2
- 1999年
- 肿瘤多药耐药现象是肿瘤化疗研究的热点。且前已经发现的多药耐药机制主要涉及Pgp、MRP、LRP、GSH/GST、TopoⅡ和多种凋亡相关基因的变化。但这些还不能圆满解释肿瘤多药耐药现象。本所制备的胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR细胞形态与亲本细胞SGC7901相比,细胞扁平,排列紧密,细胞间紧密连接非常突出。RNA点杂交结果初步表明参与紧密连接的重要分子Occludin在胃癌耐药细胞SGC7901/VCR中表达显著高于其亲本细胞SCG7901,而SGC7901又明显高于fas基因转导的耐药细胞SGC7901/VCR,提示Occludin可能通过调节细胞紧密连接处通透性参与肿瘤多药耐性(MDR)产生。这可望为探讨胃癌耐药新机制奠定一定的基础。
- 尹芳时永全肖冰陈宝军苗继延樊代明
- 关键词：SGC7901胃癌耐药细胞系肿瘤多药耐药MRNA水平
- 超声引导经皮穿刺自动活检术在肺外周型病变诊断中的作用被引量：1
- 2007年
- 目的探讨超声引导经皮穿刺自动活检在肺外周型病变诊断中的作用。方法回顾分析各种肺外周型病变217例,在超声引导下用Bard活检枪和18 G切割活检针进行经皮穿刺活检。结果穿刺活检成功率为100%,取材满意度93.5%,其组织学阳性率为91.2%,可疑阳性率为5.1%,假阴性率为3.7%,诊断准确性为96.3%。无严重并发症发生。结论超声引导经皮穿刺活检是诊断肺外周型病变有效、安全、简便的方法,使多数肺外周型病变获得了明确诊断,有助于临床进一步治疗。
- 王建宏周晓东韩增辉苏海砾郭悦何光彬陈宝军
- 关键词：超声引导活组织检查
- 单抗MGb1的噬菌体呈现型ScFv片段的制备被引量：1
- 2000年
- 目的 制备胃癌单抗MGb1的噬菌体呈现型单链可变区片段 (ScFv) ,为获得用于胃癌体内诊疗研究的靶向载体分子奠定基础。方法 从杂交瘤细胞分离mRNA ,扩增抗体重、轻链可变区(VH和VL)cDNA ,经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体抗体ScFv。经亲和筛选和ELISA检测获得呈现MGb1ScFv的噬菌体单克隆。结果 VH、VL和ScFvDNA分别约为 340bp、32 0bp和 75 0bp。经筛选得到 17个呈现MGb1ScFv的噬菌体单克隆 ,其中结合抗原能力强的克隆有 4个。结论 获得了单抗MGb1的噬菌体呈现ScFv ,为拓展抗体的应用范围创造了条件。
- 何凤田陈宝军聂勇战韩者艺乔太东樊代明
- 关键词：胃肿瘤噬菌体呈现技术单克隆抗体
- 增殖细胞核抗原与胃癌淋巴结转移的关系被引量：7
- 1996年
- 目的：研究增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与胃癌淋巴结转移的关系和意义．方法：采用ＡＢＣ免疫组织化学染色法对４４例经福尔马林固定、石蜡包埋的胃癌手术标本进行半定量检测，观察ＰＣＮＡ与淋巴结转移和胃癌组织学类型的关系．结果：伴淋巴结转移组ＰＣＮＡ高表达者占７６．２％（１６／２１），显著高于无转移组１３％（２／２３），两者呈显著相关联（Ｐ＜０．０５）．低分化型胃癌ＰＣＮＡ高表达者６８．４％（１３／１９）显著高于高、中分化型胃癌２４％（６／２５），Ｐ＜０．０１．结论：ＰＣＮＡ表达强者，淋巴结转移发生率高。
- 戴林张学庸陈宝军陈宝军王剑波张惠中
- 关键词：增殖细胞核抗原胃肿瘤淋巴结
- 艾氏腹水瘤全细胞瘤苗诱导的特异性杀伤活性被引量：2
- 2001年
- 目的研究艾氏腹水瘤全细胞瘤苗诱导的特异性杀伤活性。方法用40g/L的多聚甲醛处理的艾氏腹水瘤细胞作为全细胞瘤苗免疫Balb/c小鼠,建立瘤苗小鼠模型。用HE染色法对亲本肿瘤细胞皮下再次攻击形成的肿瘤结节进行病理学观察;用51Cr释放法测定瘤苗免疫组、荷瘤组、正常组小鼠脾细胞,对亲本艾氏腹水瘤细胞和Sp2细胞的杀伤活性。结果HE染色显示,经瘤苗免疫后亲本肿瘤细胞皮下再次攻击形成的肿瘤结节中,瘤细胞几乎完全坏死,同时在坏死部位有大量炎细胞浸润、纤维母细胞和小血管增生而对照组则无以上现象。效靶比为200∶1时,免疫小鼠脾细胞体外杀伤亲本艾氏腹水瘤细胞的杀伤率%为42.3±3.2%,显著高于荷瘤组的12.1±2.3%、正常组的6.1±1.1%和对Sp2/0细胞的杀伤率8.8±0.4%P均0.05。结论艾氏腹水瘤全细胞瘤苗可诱导机体产生特异性杀伤活性。
- 刘娜樊代明马征陈宝军乔泰东
- 关键词：艾氏腹水瘤肿瘤疫苗
- 胃癌MG7-Ag模拟表位与HSP70融合基因疫苗的构建及其诱导小鼠免疫反应的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 以热休克蛋白 70 (HSP70 )为载体 ,构建胃癌MG7 Ag模拟表位与HSP70融合基因的DNA疫苗 ,并观察该疫苗诱导C5 7BL/ 6小鼠产生MG7 Ag特异性免疫反应的作用。方法 将胃癌MG7 Ag模拟表位 (九肽 )的编码序列设计在HSP70下游引物的 5′末端 ,通过PCR方法获得HSP70与模拟表位的融合基因片段。将PCR产物克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+) ,构建融合基因疫苗。将该融合基因疫苗接种C5 7BL/ 6小鼠股四头肌 ,每隔 3周加强免疫一次 ,共接种 3次。分别在每次接种后 3周收集免疫血清 ,用细胞ELISA法检测小鼠血清中抗MG7 Ag抗体的水平。末次免疫后 3周 ,收集脾细胞 ,用51Cr释放法检测MG7 Ag特异性CTL的杀伤活性。结果 PCR扩增得到大小约 2 .0kb的片段 ,与预期大小一致。将该片段克隆入pcDNA3.1(+) ,DNA序列测定证实MG7 Ag模拟表位的编码序列已成功融合于HSP70cDNA的 3′末端。基因疫苗免疫后 ,融合基因免疫组小鼠于第 9周出现抗MG7 Ag抗体 ,而对照组小鼠无MG7 Ag抗体产生 (P <0 0 5 )。51Cr释放实验结果表明 ,融合基因免疫组小鼠脾细胞对靶细胞的杀伤率与对照组相比无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 MG7 Ag模拟表位与HSP70融合基因疫苗构建成功 ;该融合基因疫苗能够诱导MG7
- 宁晓暄吴开春李源时永全徐立乔太东陈宝军樊代明
- 关键词：胃肿瘤热休克蛋白质类70分子模拟
- 结肠癌单抗MC5的噬菌体呈现型单链可变区片段的制备被引量：1
- 2002年
- 背景与目的:MC5是一种特异性良好的针对人结肠癌的鼠源性单克隆抗体,而将鼠源性抗体小型化可使其用于在体研究时引起人抗鼠抗体反应的可能性大大降低。本研究的目的是制备MC5的噬菌体呈现型单链可变区片段(ScFv)。方法:从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA,RT-PCR分别扩增抗体的重、轻链可变区DNA(VH和VLDNA),两者经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7辅助噬菌体感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv。以高表达MC5结合抗原的细胞株SW480对重组噬菌体抗体ScFv进行两轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现MC5ScFv的噬菌体单克隆,经竞争ELISA对阳性克隆结合抗原的能力进行鉴定。结果:VH、VL和ScFvDNA分别约为340bp、320bp和750bp。在随机筛检的25个克隆中得到10个呈现MC5ScFv的噬菌体单克隆,其中结合抗原能力强的克隆有3个。结论:用噬菌体呈现技术成功地制备了单抗MC5的ScFv,为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。
- 何凤田李蓉芬张艳吉清陈宝军乔太东樊代明
- 关键词：结肠癌单克隆抗体噬菌体呈现技术
