陈志祺
- 作品数：15 被引量：32H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：武汉市科技攻关计划项目国家自然科学基金武汉市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 氯化锂治疗慢性青光眼神经退行性病变的作用机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察在慢性青光眼大鼠视网膜神经节细胞层中Tau蛋白磷酸化的变化,并通过利用氯化锂抑制Tau上游激酶GSK-3β活性的实验,为在临床上用氯化锂治疗慢性青光眼神经退行性变提供实验依据。方法建立慢性高眼压SD大鼠模型,分为2组。一组为高眼压未治疗组,另一组为高眼压氯化锂治疗组,每组各15只。右眼为高眼压模型眼,左眼为对照眼。治疗组于建模当天起每天腹腔注射0.6 mol·L-1氯化锂(GSK-3β抑制剂)。在2周和4周从2组中各取3只大鼠处死并摘取眼球,Western blot方法观察视网膜总Tau和磷酸化Tau蛋白的变化;并于2周、4周,从2组中各取2只大鼠处死并摘除眼球,免疫荧光化学染色检测Tau蛋白在视网膜组织的表达。结果高眼压模型建立成功。高眼压模型眼总Tau含量在2周时下降为对照眼的77.3%,在4周时下降为对照眼的60.4%;P-Tau与总Tau的比值,在2周时几乎没有变化,在4周时增加至对照眼的135.4%,磷酸化明显增加。氯化锂对高眼压模型鼠的影响:在4周时,高眼压氯化锂治疗组视网膜总Tau含量较高眼压未治疗组明显升高,为对照眼的99%;P-Tau与总Tau的比值较高眼压未治疗组明显下降,几乎降至对照眼水平。在高眼压未治疗组视网膜,总Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白的表达在各层都显著减少;而高眼压氯化锂治疗组视网膜总Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白的表达在各层都较高眼压未治疗组有显著增加。结论持续高眼压刺激导致大鼠视网膜总Tau蛋白表达量降低,Tau蛋白磷酸化水平增加;氯化锂能减轻由持续高眼压引起的Tau蛋白的过度磷酸化。
- 石慧向艳陈岚陈志祺李贵刚张虹
- 关键词：青光眼神经退行性病变慢性高眼压模型TAU蛋白氯化锂
- 内皮素-1对体外培养人小梁网细胞纤维连接蛋白及Ⅰ型胶原表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察内皮素-1(ET-1)对人小梁网细胞(TMCs)细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(COLI)的影响。方法取死亡24h内尸眼小梁网组织,行TMCs原代和传代培养,并用FN、层黏连蛋白(LN)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)鉴定为人TMCs后,取传3代的人TMCs,给予不同浓度ET-1(10-9、10-8、10-7mol/L)孵育72h后,免疫荧光和Westernblot观察ET-1对TMCs中FN、COLI表达的影响;然后取传3代的人TMCs,分别给予10-7mol/LET-1、10-7mol/LET-1+10-7mol/LETA受体拮抗剂、10-7mol/LET-1+10-7mol/LETB受体拮抗剂后孵育72h,Westernblot观察ET受体拮抗剂对FN、COLI表达的影响。结果研究受到伦理委员会的批准,取材前征得供体家属的知情同意。培养的细胞形态多样,含少许色素颗粒,FN、LN、NSE染色均呈阳性反应,FⅧRAg呈阴性反应。人TMCs与10-9～10-7mol/LET-1共孵育后FN表达上调(F=18.41,P<0.05);与10-8mol/L、10-7mol/LET-1共孵育后COLI表达上调(F=39.81,P<0.05),并呈浓度依赖性,10-7mol/L时作用最明显;给予ETA受体拮抗剂后,与ET-1组相比,FN、COLI的表达均降低(qFN=7.213,P<0.05;qCOLI=6.187,P<0.05),但给予ETB受体拮抗剂后,FN、COLI的表达均无明显变化。结论 ET-1能够促进体外培养的人TMCs中FN、COLI的表达,其机制可能是通过激动ETA受体而非ETB受体发挥作用的。
- 向艳陈志祺王瑞琳徐玲娟石慧陈岚李贵刚张虹
- 关键词：小梁网细胞内皮素-1纤维连接蛋白
- He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道瘢痕化的影响及其机制(英文)被引量：3
- 2010年
- 目的:研究He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道瘢痕化的影响及其机制,探讨He-Ne激光在青光眼小梁切除术中的应用价值。方法:于小梁切除手术前采用功率密度200mW/cm2He-Ne激光照射兔眼(右眼)手术区,照射部位选择鼻上象限角膜缘紧邻上直肌处,光斑直径4mm,照射时间10min,1次/d,连续照射3d。最后一次照射后24h实施双眼小梁切除术。手术后第7,14,28d检测手术区组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF);第14和第28d检测胶原密度(masson染色)。左眼设为单纯手术对照组。每时间点各7只兔。结果:手术后第7,14d,He-Ne激光组CTGF表达较对照组减少(P=0.01;P=0.005)。手术后第14,28dHe-Ne激光组胶原密度显著低于对照组(P=0.013;P=0.01)。结论:功率密度200mW/cm2He-Ne激光预照射小梁切除术手术区域,可下调术后该区域成纤维细胞CTGF表达并减少胶原合成,可能有助于减少兔眼小梁切除术后滤过道瘢痕形成。He-Ne激光有可能为预防青光眼滤过手术后瘢痕化提供新的方法。
- 王瑞琳李贵刚陈志祺向艳张虹
- 关键词：HE-NE激光滤过手术
- 软性角膜接触镜配戴对眼内压测量影响的研究被引量：2
- 2011年
- 目的:观察配戴软性角膜接触镜对眼压测量的影响。方法:选取没有角膜病变的健康志愿者30例30眼(右眼)及无法以非接触眼压计测得眼压的患者21例21眼,角膜表面麻醉后,用非接触眼压计和Tono-pen眼压笔分别测量眼压,配戴角膜接触镜再次测量眼压,记录各次测得的平均眼压值。采用配对t检验比较配戴前后的眼压值及非接触眼压计与Tono-pen眼压笔所测得的眼压值的差异。结果:非接触式眼压计测量正常眼戴镜前后的眼压分别为:15.25±2.83mmHg和15.20±2.89mmHg(P=0.825);Tono-pen眼压笔测得戴镜前后的眼压值为15.93±2·43mmHg和16.60±3.09mmHg(P=0.146)。戴镜前后非接触眼压计与Tono-pen眼压笔所测得的眼压值没有统计学差异(P=0.052,0.096)。在21只无法以非接触眼压计测得眼压的患眼中,15眼戴镜后可测得眼压值,且所测得的眼压值与戴镜后Tono-pen所测得的眼压值没有明显差异(P=0·136)。患眼戴角膜接触镜前后Tono-pen眼压笔所测得的眼压值也没有明显的差异(P=0.266)。结论:配戴-0.50D软性角膜接触镜对正常眼及角膜病变眼眼压测量没有显著影响,提示有望以角膜接触镜作为媒介或载体实现眼压的测量和监控。
- 徐玲娟陈志祺向艳李贵刚张虹
- 关键词：角膜接触镜眼压非接触式眼压计
- 原发性开角型青光眼中枢形态学及功能学改变的MRI研究
- 青光眼是世界上第一位不可逆性致盲眼病,是一组以进行性视网膜神经节细胞及其轴突的丢失为特征的视神经病变。已有研究证实原发性开角型青光眼神经损伤不仅仅局限于眼部,而且累及全视路。目前该疾病中枢损害的研究数据多来自动物实验。磁...
- 陈志祺
- 关键词：外侧膝状体原发性开角型青光眼磁共振成像弥散张量成像原发性开角型青光眼磁共振成像原发性开角型青光眼磁共振成像
- 文献传递
- He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道成纤维细胞增殖的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究兔眼小梁切除术前辅助使用He-Ne激光照射滤过区对滤过道成纤维细胞增殖情况的影响。方法随机选取健康新西兰大白兔29只(58眼)用于实验。实验一:将健康新西兰大白兔8只(16眼)随机分为4组,即100mW.cm-2、150mW.cm-2、200mW.cm-2激光手术组及空白对照组,每组各2只(4眼),激光手术组兔眼使用不同功率密度的He-Ne激光照射,空白对照组兔眼不行激光照射。照射部位选择兔眼鼻上象限角膜缘紧邻上直肌处,照射距离10cm,光斑直径4mm,照射时间10min,每天1次,连续照射3d。最后一次照射24h后处死动物,取照射区组织采用病理学和免疫组织化学技术,检测增殖细胞核抗原(prolife rating cell nuclear antigen,PCNA),并使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)观察照射区成纤维细胞增殖和凋亡的病理改变。实验二:将另外21只兔(42眼),采用200mW.cm-2He-Ne激光同上法预处理每只兔右眼手术区,最后一次照射24h后实施小梁切除术(即激光联合小梁切除术组),左眼行单纯小梁切除术为单纯手术对照组,分别于手术后7d、14d、28d检测滤过区组织上述指标。结果实验一:各He-Ne激光联合小梁切除术组与空白对照组均仅检测到少量PCNA阳性细胞,未见明显TUNEL凋亡细胞,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。实验二:200mW.cm-2He-Ne激光联合小梁切除术组与单纯手术对照组PCNA阳性细胞率术后7d最高,14d显著降低,28d降至最低。术后7d、14d,200mW.cm-2He-Ne激光联合小梁切除术组PCNA阳性细胞率分别为(19.34±2.35)%、(10.48±3.29)%,均明显低于单纯手术对照组(22.88±3.29)%、(14.35±2.56)%(均为P<0.05);术后28d,2组PCNA阳性细胞率均较低,差异无统计学意义(P>0.05)。2组各时间点亦未检测到明显TUNEL凋亡细胞。结论 He-Ne激光照射对正常兔眼结膜下及巩膜成纤维细胞活性无明显影响,
- 陈志祺李贵刚王瑞琳向艳张虹
- 关键词：HE-NE激光小梁切除术
- 严重PDR玻璃体切割术后雷珠单抗注射的效果观察（英文）被引量：5
- 2016年
- 目的:对严重增殖性糖尿病视网膜病变的患者行玻璃体切割术后行雷珠单抗注射的效果观察。方法:回归性分析。12例严重增殖性糖尿病视网膜病变患者(12眼)接受睫状体平坦部玻璃体切割术,同时给予硅油、惰性气体或者平衡液的玻璃体腔填充。在手术结束的同时给予雷珠单抗的玻璃体腔注射。结果:随访时间平均为2.75mo。这12眼中分别包括玻璃体积血(1眼);玻璃体积血伴纤维血管化增生(1眼);玻璃体积血伴牵拉性视网膜脱离(3眼);纤维血管化增生伴牵拉性视网膜脱离(2眼);玻璃体积血伴新生血管性青光眼伴牵拉性视网膜脱离(1眼);玻璃体积血伴纤维血管化增生伴牵拉性视网膜脱离(2眼);玻璃体积血伴纤维血管化增生伴新生血管性青光眼伴牵拉性视网膜脱离(1眼);玻璃体积血伴牵拉性孔源性视网膜脱离(1眼)。12眼中,8眼行玻璃体腔硅油填充,2眼行惰性气体填充,2眼行平衡液填充。所有的患者之前均未接受任何治疗。视网膜脱离复位率为10/10(100%)。1眼术后出现前房积血。9眼术后最佳矫正视力较术前提高,2眼无明显变化,1眼较术前下降。OCT检查显示8眼术后未见黄斑水肿。结论:玻璃体切割术后雷珠单抗注射对严重增殖性糖尿病视网膜病变患者有明显的治疗效果:手术成功率明显提高;患者视力显著提高;糖尿病黄斑水肿的发生概率减少;术中及术后并发症的发生率降低。
- 陈博张宪杨华静陈志祺王帅帅尹铁梅孙旭芳
- 关键词：糖尿病视网膜病变玻璃体切割术
- 糖原合酶激酶3β对体外加压培养下的视网膜神经节细胞的作用被引量：1
- 2011年
- 目的研究体外加压培养的视网膜神经节细胞（RGCs）中糖原合酶激酶313（GSK313）活性变化及其对RGCs存活的影响。方法实验研究。混合培养大鼠RGCs，分为RGCs无加压对照组、单纯RGCs加压组（60mmHg压力下培养24h）、RGCs加压＋10mmol／L氯化锂（Licl，GSK313抑制剂）组和RGCs加压＋20mmol／LLicl组。采用免疫荧光法检测RGCs中磷酸化丝氨酸9位点GSK3β（pS9．GSK3[3）的表达情况；以MTr法检测吸光度（OD）值反映RGCs活性。对数据进行单因素方差分析。结果加压组pS9．GSK313表达的荧光密度平均光密度（MOD）值为0．057＋0．012，较对照组（0．085＋0．023）低．而加压＋10mmol／LLiel组和加压＋20mmol／LLicl组pS9．GSK3β表达的荧光密度（分别为0．081±0．016和0．099±0．024）均较加压组大，且随着Licl浓度的增加，pS9．GSK3β表达的荧光密度增大。MTT结果显示，4个实验组的OD值差异有统计学意义（F=14．539，P〈0．05）。加压组OD值（0．109±o．016）较对照组（0．135±o．015）低（P〈0．05），细胞活性较低；而加压＋20mmol／L Licl组中OD值（0．159±0.014）．014）较加压组高（P〈0．05），细胞活性较高。结论压力培养下，视网膜神经节细胞中pS9．GSK3β表达减少，提示GSK3β活性增强，RGCs活性降低。Licl作为GSK313的抑制剂，可能对RGCs有保护作用。
- 陈岚向艳李贵刚陈志祺高晶石慧张虹
- 关键词：糖原合酶激酶3Β视网膜神经节细胞细胞氯化锂
- 内皮素-1对人小梁细胞吞噬功能的影响
- 2010年
- 目的观察内皮素-1(ET-1)对人小梁细胞(TMCs)吞噬功能的影响及作用机制。方法取培养第3代人TMCs,与直径0.5μm荧光标记的乳胶微粒共孵育0、4、8、12、24、48、72h,荧光显微镜下动态定量观察人TMCs吞噬动力学。取6孔板培养3代人TMCs,随机分为4组,观察不同浓度ET-1对人TMCs吞噬功能的影响:对照组(0mol/LET-1)、低剂量组(10-9mol/LET-1)、中剂量组(10-8mol/LET-1)、高剂量组(10-7mol/LET-1),分别与乳胶颗粒共孵育后观察各组细胞吞噬乳胶颗粒数。取6孔板培养人TMCs随机分为4组,观察内皮素受体对吞噬功能的影响:对照组(0mol/LET-1)、ET-1组(10-8mol/LET-1)、ETA受体拮抗剂组(10-8mol/LET-1+10-7mol/LBQ123)、ETB受体拮抗剂组(10-8mol/LET-1+10-7mol/LBQ788),并分别与乳胶颗粒共孵育,观察各组人TMCs吞噬乳胶颗粒数。结果人TMCs免疫组织化学鉴定纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、神经元特异性烯醇酶(NSE)染色均呈阳性;Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)染色阴性;人TMCs吞噬动力学观察示,人TMCs与乳胶颗粒共孵育4h后可见明显的吞噬颗粒,随时间延长吞噬微粒数明显增多,24h吞噬微粒密度最佳,48h吞噬微粒达到饱和,细胞形态改变;加入ET-1干预后,细胞内吞噬乳胶微球数明显减少,其吞噬抑制效果呈ET-1浓度依赖性(F=28.91,P<0.05);ET-1组吞噬颗粒数较对照组减少(q=13.7228,P<0.05),而ETA受体拮抗剂组吞噬颗粒较ET-1组明显增多(q=9.4312,P<0.05),ETB受体拮抗剂组与ET-1组相比差异无统计学意义(q=1.1600,P>0.05)。结论ET-1能抑制体外培养人TMCs的吞噬能力;ET-1主要通过ETA受体发挥抑制人TMCs吞噬功能的作用。
- 向艳李贵刚徐林娟陈志祺王瑞林张虹
- 关键词：小梁细胞内皮素-1
- 超声联合靶向微泡介导EGFP基因转染脉络膜新生血管被引量：4
- 2010年
- 目的探讨超声联合靶向微泡介导增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因转染脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)的可行性和应用价值。方法 BN大鼠通过半导体倍频激光(波长为532nm)光凝方式建立CNV模型。实验分为7组:对照组、单纯超声辐照组、靶向微泡+超声辐照(TM+US)组、裸质粒(P)组、质粒+超声辐照(P+US)组、质粒+靶向微泡(P+TM)组、质粒+靶向微泡+超声辐照(P+TM+US)组。光凝后7d,实验组鼠尾静脉注入EG-FP质粒和靶向脂质体微泡的复合物。处理7d后摘除眼球行冰冻切片,激光共聚焦显微镜下观察CNVEGFP基因表达效率。结果对照组、单纯超声辐照组及TM+US组脉络膜无荧光表达。P组和P+US组脉络膜血管呈弱荧光表达,CNV荧光强度分别为22.49±4.61和26.87±6.73,和正常脉络膜血管荧光表达强度比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。P+TM组和P+TM+US组可见CNV有强荧光表达,CNV荧光强度分别为76.82±12.88和235.08±34.55,而脉络膜正常血管仅呈弱荧光。P+TM+US组CNV荧光表达最强。结论超声联合靶向微泡可高效、靶向地将质粒DNA输送至CNV。这种非侵入性的技术在CNV基因治疗上可能有很好的前景。
- 李涛张虹陈志祺王瑞霖
- 关键词：脉络膜新生血管超声微泡基因治疗
