陈洁
- 作品数：18 被引量：66H指数：5
- 供职机构：山西医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 滴鼻免疫有效的诱导粘膜及系统免疫反应被引量：17
- 2001年
- 为了探讨粘膜疫苗滴鼻免疫对小鼠不同粘膜部位和系统免疫部位的影响 ,将BALB/c小鼠随机分为三组 ,每组 15只 ,FSM— 2 117或FS— 5 416 4× 10 7cfu/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔两周 ,4次免后 7天活杀 ,收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清 ,ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIg和AIgG ;分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP淋巴细胞 ,细胞中加入全菌破碎抗原共培养 ,于不同时间取出细胞 ,提取RNA做RT PCR。两株菌苗经鼻内免疫均诱发了鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA、IgG的显著增加(P <0 0 1) ;免疫动物的NALT、NP、PP结淋巴细胞在体外经抗原刺激后均在不同时间出现IFN γ和IL 4mRNA的表达 ,而TGF βmRNA的表达在免疫前后无明显变化。疫苗经鼻粘膜免疫可诱导不同粘膜部位及系统免疫反应的发生 。
- 舒翠莉彭虹王华陈洁高杰英
- 关键词：粘膜疫苗滴鼻免疫细胞因子免疫反应免疫途径
- 滤泡相关上皮生物学特性及其与Peyer's结淋巴细胞相互作用的初步研究
- 一.小鼠Peyer's结滤泡相关上皮和M细胞结构特点以及感染后变化的观察.该研究首先对小鼠小肠Peyer's结表面滤泡相关上皮和M细胞形态结构特点及其肠内感染后的变化进行了观察.二.肠上皮细胞与Peyer's结免疫细胞相...
- 陈洁
- 关键词：粘膜免疫伤寒沙门氏菌肠上皮细胞LPS
- 文献传递
- Peyer’s结淋巴细胞对上皮屏障功能的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 :体外建立稳定的上皮细胞与Peyer’s结淋巴细胞 (PPL)共培养体系 ,进一步研究该体系中的上皮细胞生理学特性。方法 :采用短路电流检测单层上皮细胞跨上皮电阻 (TER)的变化、半定量RT PCR方法检测上皮细胞间的紧密连接相关蛋白ZO 1和ZO 2mRNA的表达。结果 :①Caco 2细胞单层与PPL共培养的第 2天 ,无论是混合共培养还是上下共培养组的TER均与对照有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;②同时上下共培养或混合共培养组在第 8天TER仍保持较高水平 ,与对照有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;③在上下共培养和混合共培养组中 ,半定量RT PCR检测ZO 1mRNA的表达也均明显高于对照。结论 :Peyer’s结淋巴细胞 (PPL)可以较好地维持上皮屏障功能。
- 陈洁高杰英曾丽玲徐鹏辉钟耀华陈小章
- 关键词：共培养CACO-2
- 正常小鼠小肠微皱褶细胞的形态学观察被引量：5
- 2002年
- 目的 观察正常小鼠小肠Peyer’s集合淋巴小结滤泡相关上皮中微皱褶细胞的形态结构、分布及其表面特性。方法 常规的扫描电镜、透射电镜和免疫荧光、免疫冷冻超薄切片技术。结果 微皱褶细胞的粘膜面具有许多短而不规则的微绒毛和微皱褶 ,基部胞膜向顶部呈穹隆状突起 ,形成“口袋”样结构 ,其内含有B、T淋巴细胞和少量的巨噬细胞 ,顶部胞质内终末网不发达 ,有许多小泡 ;荆豆凝集素UEA 1可特异性地与微皱褶细胞结合。结论 微皱褶细胞是分布于Peyer’s集合淋巴小结圆顶区表面滤泡相关上皮中的一种特化的上皮细胞 ,利用标记的凝集素UEA 1可作为鉴别微皱褶细胞的依据。
- 陈洁高杰英常昕赵新荣胡白河
- 关键词：M细胞免疫学形态学
- 双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后不同部位淋巴细胞表型的变化
- 2003年
- 目的:观测双价痢疾工程菌苗滴鼻免疫小鼠后,不同时间、不同部位淋巴组织细胞表型的变化,探讨痢疾菌苗滴鼻免疫对黏膜和系统免疫应答的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为3组,每组30只,分别以FSM-2117和FS-5416痢疾菌苗经滴鼻途径免疫小鼠4次,菌量依次为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只,对照组给予PBS,间隔2 wk。4次免疫后7、30和90 d活杀,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP结淋巴细胞,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果:4次免疫后7 d,小鼠鼻相关淋巴组织(NALT)、鼻通道(NP)和Peyer’s结(PP)淋巴细胞中,CD3+T细胞数均显著增加,其中以CD4+T细胞增加为主。FSM-2117免疫组的脾细胞中B220+细胞显著增加;而FS+5416免疫组的脾细胞中CD3+T细胞显著增加。4次免疫后30 d,NALT、NP和脾淋巴细胞仍出现上述变化;而90 d,仅NALT和NP淋巴细胞出现上述同样变化。结论:两株双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后,能有效地诱导黏膜和系统免疫应答,且持续时间较长,但该免疫应答的减弱是从距免疫部位较远的部位而开始的。
- 舒翠莉高杰英彭虹徐辉王华陈洁石辛甫
- 关键词：滴鼻免疫淋巴细胞表型流式细胞术
- Peyer’s结淋巴细胞对结肠上皮细胞屏障功能的影响被引量：2
- 2003年
- 为探讨粘膜上皮细胞与淋巴细胞相互作用的机制,利用Caco-2上皮细胞(系)与新鲜分离的小鼠Peyer’s结淋巴细胞共培养模型,采用短路电流检测单层上皮细胞跨上皮电阻(TER)的变化,半定量RT-PCR方法检测上皮细胞间的紧密连接相关蛋白ZO-1和ZO-2mRNA的表达以及ELISA方法测定相关细胞因子mIL-6和hIL-8的变化。结果表明,Peyer’s结淋巴细胞可以较好地维持上皮的屏障功能,但当痢疾杆菌F2a-12脂多糖(LPS)作用后,却使跨上皮电阻明显降低。细胞因子mIL-6和hIL-8在不同共培养情况下的差异表达,揭示淋巴细胞与上皮细胞间的“对话”包括细胞间的直接接触作用。
- 陈洁高杰英曾丽玲徐鹏辉钟耀华陈小章
- 关键词：结肠粘膜上皮细胞细胞培养
- 两种肠道侵袭性菌与小鼠小肠微皱褶细胞相互作用的初步研究被引量：2
- 2003年
- 利用小鼠肠袢模型进行局部感染 ,在不同的时间取Peyer’s结对其进行扫描电镜和透射电镜的观察 ,并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明 ,鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12两种肠道侵袭性菌与微皱褶细胞的粘附发生在局部感染 3 0min ,感染 60～ 90min在M细胞和淋巴细胞中可见到细菌 ,而在感染 6～ 8h后Peyer’s结中的细胞凋亡百分率与对照相比差异最为明显。提示 :鼠伤寒沙门氏菌 460 0 43和痢疾杆菌F2a 12均是借助于M细胞通过上皮屏障 。
- 陈洁彭虹王华高杰英
- 关键词：细胞凋亡
- 双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠后粘膜免疫与系统免疫应答持续时间的观察被引量：13
- 2002年
- 本文探讨双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠一段时间后,粘膜免疫和系统免疫应答的变化.将BALB/c小鼠随机分为三组,每组30只.PBS、FSM-2117和FS-5416(菌量为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只/次)经滴鼻途径免疫小鼠.间隔2周,4次免疫后7、30和90d活杀,收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清.采用ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内LPS IgA和IgG.结果是两株疫苗经鼻内免疫后,诱发鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内LPS IgA、IgG的显著增加(P＜0.01).特异性抗体水平虽然在免疫后的30、90 d明显下降,但仍明显高于PBS对照组水平.故认为两株双价志贺疫苗滴鼻免疫小鼠后能有效诱导粘膜免疫和系统免疫应答,并持续较长时间.
- 舒翠莉高杰英彭虹王华陈洁石辛甫
- 关键词：滴鼻免疫粘膜上皮
- 小鼠Semcap2分子的组织学分布与亚细胞定位
- 2002年
- 目的 研究小鼠Semcap2分子的组织学分布与细胞内定位 ,为了解其免疫学功能提供线索。方法 用RT PCR方法进行Semcap2mRNA组织分布的检测。构建与绿色荧光蛋白融合表达的质粒pEGFP N1 mSemcap2 ,并将其转入HeLa细胞。结果 Semcap2mRNA主要分布在小肠、胃、肺、肾脏。mSemcap2蛋白主要位于细胞胞浆和胞核内。结论 mSemcap2的功能有待进一步实验研究。
- 王华高杰英周洁易绍琼石辛甫陈洁
- 关键词：组织学亚细胞定位逆转录-聚合酶链反应分子免疫学
- mCD1.1分子的真核表达及其对NKT细胞的刺激作用被引量：1
- 2006年
- 目的:获得稳定表达mCD1.1分子的细胞系,研究其对肝脏和肠系膜淋巴结淋巴细胞的刺激作用。方法:分离C57小鼠的小肠上皮细胞,制备总RNA,通过RTPCR扩增mCD1.1编码区基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1。将所得重组质粒pcDNA3.1mCD1.1通过电穿孔法转至CHO细胞中,在含G418的的选择性培养基中筛选抗性克隆,利用RTPCR和流式细胞术对挑取的克隆进行mCD1.1表达的鉴定。将表达mCD1.1的细胞与新分离的肝脏和肠系膜淋巴结(MLN)的淋巴细胞进行共培养,并用丝裂霉素C抑制CHO细胞的增殖,然后利用MTT法检测淋巴细胞的增殖情况;另外将表达mCD1.1的CHO细胞与淋巴细胞共培养后,分离淋巴细胞,然后用PEantiNK1.1和CychromeantiCD3对其进行标记,利用流式细胞术检测CD3细胞中NK1.1阳性细胞的比例。结果:通过RTPCR,得到mCD1.1的编码区基因,序列与预期相符;通过多次鉴定,证明筛选得到的细胞克隆可稳定表达mCD1.1;CHOmCD1.1细胞与新分离的淋巴细胞共培养,在有无LPS存在的情况下,均能刺激淋巴细胞发生增殖,并使CD3+细胞中NK1.1阳性细胞的比例增加。结论:表达mCD1.1的CHO细胞能够刺激NKT细胞增殖。
- 易绍琼彭虹王华王岚陈洁赵光宇高杰英
- 关键词：NKT细胞细胞增殖
